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蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾ppt課件-展示頁(yè)

2025-05-12 06:14本頁(yè)面
  

【正文】 C H 2 S H g+ S汞 N5二甲氨基萘磺酰半胱氨酸 E N ZSN ( C H 3) 2S O 2 N H C H C O O HC H 2 S H gHENZ S(四) 5, 5′二硫雙硝基苯甲酸( DTNB)也常用于修飾 巰基 ,它與半胱氨酸形成混合二硫化物。 HENZ S C H 3C H 2ONO+ pH ﹥ 5 CC H 3CHCC H 2ONHE N Z COSH副反應(yīng): N H 2E N Z C H 3C H 2ONO+ pH ﹥ 7 CC H 3CHNCC H 2H ONHE N Z COH半胱氨酸 (三) 3類試劑對(duì) 巰基專一性最強(qiáng) 。 常用的有三類: 、碘乙酰胺或環(huán)乙烯亞胺 (一) 1類試劑是烷化劑,此類試劑還能與 甲硫氨酸 、 賴氨酸 或 組氨酸 反應(yīng)?;瘜W(xué)修飾的原理 化學(xué)修飾的方法學(xué) 蛋白質(zhì)側(cè)鏈的修飾 蛋白質(zhì)肽鏈的交聯(lián) 親和標(biāo)記 蛋白質(zhì)化學(xué)修飾的應(yīng)用 內(nèi) 容 提 要 (第九講) 三、羧基的修飾 用水溶性碳二亞胺作催化劑,通過(guò)胺專一地修飾蛋白質(zhì)中的羧基。 E N ZOCO+HNNCRRH+++ C+E N Z HHONCON RRC+E N Z HHONCON RR+ HX E N Z OCX C+ HHNON RR H +++ C+E N Z HHONCON RRCHNON RRHE N ZOC ++碳二亞胺 形成相應(yīng)酰胺 重排 四、巰基的修飾 由于半胱氨酸時(shí)蛋白質(zhì)中反應(yīng)性最強(qiáng)的殘基,所以很多試劑可用來(lái)修飾巰基側(cè)鏈。 ENZ S + I C H 2 C O O pH﹥ 7 E N Z C H 2 +S C O O I 碘乙酸 半胱氨酸 副反應(yīng): HE N ZNN + I C H 2 C O O pH﹥ E N Z C H 2N N H ++C O O I +組氨酸 C H 3E N Z SI C H 2 C O O +pH=2~ C H 3C H 2E N Z + +SC O O I N H 2E N Z I C H 2 C O O +pH= 甲硫氨酸 HN C H 2 HE N Z ++C O O I +(二) 2類試劑能與 巰基 形成對(duì) 酸穩(wěn)定 的衍生物,而與其它基團(tuán)形成的產(chǎn)物則對(duì) 酸不穩(wěn)定 。常用的是對(duì)氯汞苯甲酸, S汞N5二甲氨基萘磺酰半胱氨酸是對(duì)氯汞苯甲酸的衍生物,也可與巰基反應(yīng)。 HENZ S + SC O O O O CO 2 N S N O 2pH ﹥ E N Z SC O O S N O 2+ H ++SC O O N O 2DTNB 2硝基 5硫代苯甲酸 釋放出的 2硝基 5硫代苯甲酸陰離子在 412nm處有 吸收,可用光譜法測(cè)定其含量。 NHHONCN NHONCN C H 2 C O O NHONCNC H 2 C O O +NHONCNC H 2 C O O C H 2 C O O 1羧乙基組氨酸
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