【正文】 理化檢驗(yàn)方法確認(rèn)的項(xiàng)目 項(xiàng)目 內(nèi)容 鑒別 有關(guān)物質(zhì) 檢查 含量測定 滴定法 HPLC 準(zhǔn)確度 － － － － 精密度 － 視情況而定 視情況而定 視情況而定 專屬性 視情況而定 + － 視情況而定 檢測限 － － － － 定量限 － + － － 制劑理化檢驗(yàn)方法確認(rèn)的項(xiàng)目 項(xiàng)目 內(nèi)容 鑒別 檢查（不溶性微粒檢查、含量均勻度、溶出度檢查） 雜質(zhì) （有關(guān)物質(zhì)、殘留溶劑） 含量測定 準(zhǔn)確度 － 視情況而定 視情況而定 視情況而定 精密度 － + + + 專屬性 + + + + 檢測限 － － － － 定量限 － 視情況而定 + － 注：以上表中列舉了在不同類型的檢驗(yàn)方法確認(rèn)中被認(rèn)為是最重要的項(xiàng)目，“－”表示通常不需要確認(rèn)的項(xiàng)目；“ +”表示通常需要確認(rèn)的項(xiàng)目；如遇特殊情況，仍應(yīng)根據(jù)具體分析對象和情況而定。方案應(yīng)該包括所有項(xiàng)目的檢測方法和接受標(biāo)準(zhǔn)。 項(xiàng)下列出的分析項(xiàng)目和相應(yīng)的確認(rèn)內(nèi)容可供參考。 檢驗(yàn)方法確認(rèn)內(nèi)容有：準(zhǔn)確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）專屬性、定量限。 檢驗(yàn)方法確認(rèn)的基本原則 法定方法中的鑒別試驗(yàn)、雜質(zhì)定量檢查或限度檢查、原料藥或制劑中有效成分含量測定需要酌情考慮進(jìn)行方法確認(rèn)，其余方法不需要進(jìn)行確認(rèn)。 ③如有一種方法不夠?qū)?，可用其他分析方法予以補(bǔ)充。 理化檢驗(yàn)方法驗(yàn)證的分析項(xiàng)目 項(xiàng)目 內(nèi)容 鑒別 限量檢查 含量測定及溶出量測定 定量 限度 準(zhǔn)確性 － + － + 重復(fù)性 － + － + 中間精密度 － +① － +① 重現(xiàn)性 ② + + + + 專屬性 ③ + + + + 檢測限 － － + － 定量限 － + － － 線性 － + － + 范圍 － + － + 耐用性 + + + + 注：①已有重現(xiàn)性驗(yàn)證，不需要驗(yàn)證中間精密度。方案應(yīng)該包括所有項(xiàng)目的檢測方法和接受標(biāo)準(zhǔn)。 微生物檢驗(yàn)方法要說明的內(nèi)容至少應(yīng)包括使用的菌種、菌液含量、所需培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間、計(jì)數(shù)方法、結(jié)果計(jì)算的公式。 檢驗(yàn)方法應(yīng)有詳細(xì)說明，并提供足夠的信息，能使經(jīng)過 正確培訓(xùn)的檢驗(yàn)人員可靠的進(jìn)行檢驗(yàn)。 項(xiàng)下列出的分析項(xiàng)目和相應(yīng)的驗(yàn)證內(nèi)容可供參考。 檢驗(yàn)方法驗(yàn)證內(nèi)容有： 理化檢驗(yàn)方法：準(zhǔn)確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性。藥品溶出度、釋放度等檢查中，其溶出量 等的測試方法也應(yīng)做必要的驗(yàn)證。 檢驗(yàn)條件發(fā)生改變可能影響到檢驗(yàn)結(jié)果時(shí)，方法應(yīng)重新驗(yàn)證。 檢驗(yàn)用設(shè)備主要部分改變。 法規(guī)規(guī)定的其他需要驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法。 檢驗(yàn)方法需變更的。 建立產(chǎn)品的微生物限度檢查時(shí)，應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌、霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證和控制菌檢查方法的驗(yàn)證，以確認(rèn)所采用的方法適合于細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)和控制菌的測定。 對標(biāo)準(zhǔn) 驗(yàn)證 崗 研究后 確定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案中變更后的檢驗(yàn)方法進(jìn)行確認(rèn)。 對 技術(shù)部 移交的新品應(yīng)研究建立設(shè)備清潔驗(yàn)證殘留物檢驗(yàn)方法，并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。 4 職責(zé) 標(biāo)準(zhǔn) 驗(yàn)證 崗 提升現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)工作時(shí)，對研究后確定的標(biāo)準(zhǔn)草案進(jìn)行檢驗(yàn)方法驗(yàn)證工作， 以確保檢驗(yàn)方法的適用性、科學(xué)性。 范圍：是指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高低濃度或量的區(qū)間。 定量限：是指供試品中被測物能被定量測定的最低量。 專屬性：是指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采 用的方法能正確測定出被測物質(zhì)的特性。 中間精密度：在同一個(gè)試驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測定結(jié)果之間的精密度稱為中間精密度。 精密度：是指在規(guī)定的測試條件下同一個(gè)均勻供試品經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。 藥典方法：經(jīng)過國家藥監(jiān)部門批準(zhǔn)的藥典收載的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢驗(yàn)方法 法定方法：法定方法包括藥典方法、國標(biāo)方法等。 檢驗(yàn)方法確認(rèn)：證明使用法定方法在目前實(shí)驗(yàn)室條件下是否能獲得可靠結(jié)果，是否適用于相應(yīng)的檢測工作。 2 適用范圍 對檢驗(yàn)方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證時(shí)； 對在研產(chǎn)品的檢驗(yàn)方法進(jìn)行復(fù)核確認(rèn)時(shí)； 對首次使用的藥典、國標(biāo)等檢驗(yàn)方法進(jìn)行確認(rèn)時(shí)。 1 目的 為 保證檢測方法 的適用性 、重現(xiàn)性和可行性， 特制訂本規(guī)程。 8 附件 .............................................................................................................. 錯(cuò)誤 !未定義書簽。分析方法驗(yàn)證與確認(rèn)管理規(guī)程 0 目錄 1 目的 ............................................................................................................................................. 1 2 適用范圍 ..................................................................................................................................... 1 3 定義 ............................................................................................................................................. 1 4 職責(zé) ............................................................................................................................................. 2 5 規(guī)程內(nèi)容 ..................................................................................................................................... 3 6 環(huán)境、健康和安全 EHS ............................................................................... 錯(cuò)誤 !未定義書簽。 7 相關(guān)文件 ...................................................................................................... 錯(cuò)誤 !未定義書簽。 9 變更歷史記錄 .............................................................................................. 錯(cuò)誤 !未定義書簽。本規(guī)程明確了檢驗(yàn)方法驗(yàn)證的基本內(nèi)容和測試方法，為檢驗(yàn)方法驗(yàn)證、確認(rèn)工作明確了 基本原則 。 3 定義 檢驗(yàn)方法驗(yàn)證：證明采用的方法適用于相應(yīng)檢測要求。在本質(zhì)上和驗(yàn)證一樣，但不一定是驗(yàn)證項(xiàng)目的全部。 準(zhǔn)確度：是指用該方法測定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般用回收率表示。 重復(fù)性：在相同條件下，由同一個(gè)分析人員測定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù)性。 重現(xiàn)性：在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測定結(jié)果之間的精密度稱為重現(xiàn)性。 檢測限：是指供試品中被測物能被檢出的最低量。 線性：是指在設(shè)計(jì)范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接 成 正比關(guān)系的程度。 耐用性：是指在測定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測定結(jié)果不受影響的承受程度。 對 技術(shù)部 移交的新品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案進(jìn)行確認(rèn)，以確保檢驗(yàn)方法適用性、科學(xué)性。 理化檢驗(yàn)崗 對首次采用的藥典或國標(biāo)檢驗(yàn)方法，進(jìn)行檢驗(yàn)方法確認(rèn)工作，以證明檢驗(yàn)方法的適用性，確保檢驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、可靠。 微生物崗 凡有國家檢測機(jī)構(gòu)對成品或中間體微生物限度檢驗(yàn)方法進(jìn)行確認(rèn)過的， 則該方法可直接用于檢驗(yàn)，否則需要按照藥典附錄要求進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。 5 規(guī)程內(nèi)容 檢驗(yàn)方法驗(yàn)證的基本原則 用于檢驗(yàn)的分析方法符合下列情形之一但不限于以下情況的，應(yīng)當(dāng)對檢驗(yàn)方法進(jìn)行驗(yàn)證： 新建的檢驗(yàn)方法，包括新建的產(chǎn)品檢驗(yàn)方法和設(shè)備清潔驗(yàn)證殘留物檢驗(yàn)方法等。 采用《中華人民共和國藥典》及 其他法定標(biāo)準(zhǔn)未收載的檢驗(yàn)方法。 將法定方法用于測定新藥，或?qū)⒛骋黄贩N的法定測定方法用于另一品種。 藥物生產(chǎn)工藝變更、制劑的組分變更。 需要驗(yàn)證的分析項(xiàng)目有： 理化檢驗(yàn)方法：鑒別試驗(yàn)、雜質(zhì)定量檢查或限度檢查、原料藥或制劑中有效成分含量測定，以及制劑中其他成分（如防腐劑等）的測定。 微生物檢驗(yàn)方法：細(xì)菌、霉菌和酵母菌的定量檢查，控制菌的定性檢查。視具體方法擬定方案。 微生物限度檢驗(yàn)方法：微生物限度檢驗(yàn)方法：細(xì)菌、霉菌和酵母菌數(shù)的計(jì)數(shù)方法驗(yàn)證（菌液回收率），控制菌的專屬性的驗(yàn)證。 理化檢驗(yàn)方法要說明的內(nèi)容至少應(yīng)包括檢測條件（如色譜檢測器）、所需試劑、對照品、結(jié)果計(jì)算的公式和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。 檢驗(yàn)方法驗(yàn)證應(yīng)該依據(jù)驗(yàn)證方案執(zhí)行。驗(yàn)證結(jié)果應(yīng)如實(shí)填寫，準(zhǔn)確完整記錄在驗(yàn)證報(bào)告中。 ②重現(xiàn)性只有在該分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)做。 以上表中列舉了在不同類型的分析方法驗(yàn)證中被認(rèn)為是最重要的項(xiàng)目，“－ ”表示通常不需要驗(yàn)證的項(xiàng)目，“ +”表示通常需要驗(yàn)證的項(xiàng)目，如遇特殊情況，仍應(yīng)根據(jù)具體分析對象和情況而定。 從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)方法轉(zhuǎn)移，可采用對照試驗(yàn)法，即取同一批樣品，按此法在兩實(shí)驗(yàn)室分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，將結(jié)果進(jìn)行比較。視 具體方法擬定方 案。 檢驗(yàn)方法確認(rèn)應(yīng)依據(jù)確認(rèn)方案執(zhí)行。確認(rèn)結(jié)果應(yīng)如實(shí)填寫，準(zhǔn)確完整記錄在確認(rèn)報(bào)告中。 理化檢驗(yàn)方法驗(yàn)證各分析項(xiàng)目 的內(nèi)容描述 準(zhǔn)確度： 用于定量測定的分析方法均需做準(zhǔn)確度驗(yàn)證。 可用已知純度的做加樣回收測定，即于已知被測成分含量的供試品中再加入一定量的已知純度的被測成分對照品，依法測定。 100%B AC% ??回收率 公式中： A表示供試品所含被測成分量，一般是采用重復(fù)性結(jié)果的均值。 記錄結(jié)果： 應(yīng)報(bào)告供試品取樣量、供試品中含有量、對照品加入量、測定結(jié)果和回收率（ %）計(jì)算值，以及回收率（ %）的相對平均偏差（ RSD%）。一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相 對標(biāo)準(zhǔn)偏差來表示。 中間精密度：是同一實(shí)驗(yàn)室的變化（通常是不同日期，不同分析人員、不同的設(shè)備等），測定結(jié)果之間的精密度。 重現(xiàn)性：不同實(shí)驗(yàn)室、不同分析人員檢驗(yàn)相同產(chǎn)品的結(jié)果應(yīng)平行，樣品批數(shù)至少是 3批。 鑒別試驗(yàn)：以不含被測成分的供試品（除去含待測成分藥材或不含待測成分的模擬方），不得干擾測定，以說明方法的專屬性。 含量測定和限量檢查：以不含被測成分的供試品（除去含待測成分藥材或不含待測成分的模擬方），不得干擾測定，以說明方法的專屬性。必要時(shí)可采用二極管陣列檢測和質(zhì)譜檢測，進(jìn)行峰純度檢查。 信噪比法：僅適用于能顯示基線噪音的分析方法，即把已知低濃度供試品的信號與空白樣品測出的信號進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。 根據(jù)響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差和斜率：檢測限度 SDL ?? 其中 S：校正曲線的斜率， S值是被分析物的校正曲線的斜率。 數(shù)據(jù)要求：應(yīng)附測試圖譜，說明測試過程和檢測限結(jié)果。一般以信噪比為 10： 1 時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定定量限。 S：校正曲線的斜率 ? ：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差 S 值是被分析物的校正曲線 的斜率。 數(shù)據(jù)要求：應(yīng)附測試圖譜，說明測試過程和定量限結(jié)果。 以測得的相應(yīng)信號作為被測物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。 范圍： 應(yīng)依據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果及要求確定。 原料藥和制劑的含量測定，范圍應(yīng)為測試濃度的 80%～ 120%。 溶出度應(yīng)為測試或釋放度的溶出量測定，范圍應(yīng)為限度的177。 如果含量測定與雜質(zhì)檢查同時(shí)測定，用面積歸一 化法，則線性范圍應(yīng)為雜質(zhì)規(guī)定限度的－ 20%至含量限度（或上限）的 +20%。 對于有毒的、具特殊功效或藥理作用的成分，其范圍應(yīng)大于限定含量的區(qū)間。如果測試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫明。 氣相色譜法變動(dòng)因素有：被測溶液的穩(wěn)定性，樣品提取次數(shù)、時(shí)間，不同廠牌或批號的同類型色譜柱，柱溫，固定相，不同類型的擔(dān)體，柱溫，進(jìn)樣口和檢測器溫度等。 微生物檢驗(yàn)方法驗(yàn)證的內(nèi)容 計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證： 細(xì)菌、霉菌和酵母菌的定量檢測 各試驗(yàn)組制備方法： 試驗(yàn)組： a） 平皿法計(jì)數(shù)時(shí)，取試驗(yàn)可能用的最低稀釋級供試液 1ml 和 50～ 100cfu 試驗(yàn)菌，按平皿法 測定其菌數(shù)。 菌液組：測定所加的試驗(yàn)菌數(shù)，菌液含量在 50～ 100cfu。 稀釋劑對照組：若供試液制備需要分散、乳化、中和、離心或薄膜過濾等特