tunel染色檢測細胞凋亡-文庫吧資料
2024-10-06 02:09本頁面
【正文】
細胞凋亡中染色體 HYPERLINK DNA的斷裂是個漸進的分階段的過程，染色體 HYPERLINK DNA首先在內(nèi)源性的核酸水解酶的作用下降解為50300kb的大片段
。陽性對照的切片可使用DNaseI部分降解的標(biāo)本，陽性細胞對照可使用地塞米松（1μM）處理34hr的大、小鼠胸腺細胞或人外周血淋巴細胞。1 用二甲苯脫水3次，每次2min，封片、干燥后，在光學(xué)顯微鏡下觀察并記錄實驗結(jié)果。用蒸餾水洗3次，前兩次將載玻片提起放下10次，最后1次靜置30s。用蒸餾水洗4次，前3次每次1min，最后1次5min。用PBS洗4次，每次5min。將切片置于染色缸中，加入已預(yù)熱到37℃的洗滌與終止反應(yīng)緩沖液，于37℃保溫30min，每10min將載玻片輕輕提起和放下一次，使液體輕微攪動。用濾紙小心吸去載玻片上組織周圍的多余液體，立即在切片上加2滴 TdT酶緩沖液，置室溫1～5min。色缸中加入含2％過氧化氫的PBS，于室溫反應(yīng)5min。在載玻片上滴加 50～100μl細胞懸液并使之干燥。用PBS洗兩次，每次5min，然后按下述步驟2進行操作。用PBS洗兩次，每次5min。用蒸餾水洗4次，每次2min，然后按下述步驟2進行操作。用95％和75％乙醇各洗一次，每次3min。過氧化物酶標(biāo)記的抗地高辛抗體（ONCOR）（二）實驗步驟標(biāo)本預(yù)處理：（1）石蠟包埋的組織切片預(yù)處理：將組織切片置于染色缸中，
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