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細胞凋亡和細胞壞死-文庫吧資料

2025-05-18 22:07本頁面
  

【正文】 散射光 (FSC)、高側向散射光 (SSC) 凋亡細胞的形成過程 二 . DNA降解分析 ? DNA降解過程的特點: ? 1. 發(fā)生于凋亡早期,由內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶激活引起 ? 2. DNA在核小體連接部位斷裂,產(chǎn)生180- 200bp為最小單位的單體或寡聚體片斷 ? 3. DNA碎片可被細胞膜包裹,形成凋亡小體 ? (一 ) DNA凝膠電泳 ? 原理:凋亡細胞降解產(chǎn)生一系列規(guī)則的 DNA片斷,其電泳結果呈典型的“ 梯狀帶 ” (ladder);而壞死或凋亡后壞死細胞的 DNA分解是隨機的,產(chǎn)生的碎片分子量大小不一,在電泳時形成“ 涂片狀 ” (smear)。 細胞凋亡的檢測 隨著研究技術的提高和對凋亡的認識不斷深入,檢測凋亡的方法已從細胞、染色質到分子水平日趨完善和成熟。 細胞增殖與死亡的速度平衡失調(diào)。 淋巴細胞發(fā)育分化成熟過程中,始終伴隨著細胞凋亡。 ( 二)鈣穩(wěn)態(tài)失衡引起細 胞凋亡的可能機制 Ca2+/Mg2+依賴的核酸內(nèi)切酶 (DNase),降解 DNA鏈; ,催化細胞內(nèi)肽鏈間的?;D移,在肽鏈間形成共價鍵,使細胞骨架蛋白分子間發(fā)生廣泛交聯(lián),有利于凋亡小體形成; ,加速細胞凋亡相關基因的轉錄; +在 ATP的配合下使 DNA鏈舒展,暴露出核小體之間的連接區(qū)內(nèi)的酶切位點,有利于DNA內(nèi)切酶切割 DNA。 ? 由一系列胞內(nèi)信號轉導環(huán)節(jié)激活,執(zhí)行染色質 DNA切割 3. Caspase 9 激活,需要通過 CARD( caspaserecruitment domain)、 Apaf細胞色素 c、 ATP等多個因子的參與 細胞凋亡的抑制物(如 Bcl2); 細胞的蛋白質結構, 導致細胞解體,形成 凋亡小體( apoposis boby); 相關活性蛋白 ,使該蛋白獲得或喪失某種生物學功能 Caspases在凋亡中的主要作用 細胞凋亡的調(diào)控 (一)細胞凋亡相關因素 (二 ) 細胞凋亡信號的轉導 ?.生理活性因子: TNF家族( FasL,TNF)、 TGF、神經(jīng)遞質 (谷氨酸、多巴胺 )、生長因子撤退、 GC等 ?.損傷相關因子:熱休克、病毒感染、自由基、癌基因、抑癌基因、放射線等 ?.化療藥物 ?.毒素:乙醇、 β 淀粉樣肽 .凋亡相關基因的抑制作用: p5 bclbclXL等。 —— 細胞凋亡過度 細胞凋亡的過程
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