細胞凋亡與增殖的原位檢測-文庫吧資料
2024-12-14 11:40本頁面
【正文】 程中細胞的形態(tài)學變化 （二）細胞凋亡的形態(tài)學檢測方法 大部分情況下發(fā)生的凋亡都具有典型的形態(tài)學特征，因此可通過各種方法制片及染色后，用光鏡、熒光顯微鏡，或電子顯微鏡進行觀察，其識別比較容易。 （二） 測定細胞增生活性的應用與價值 判斷腫瘤的良惡性 腫瘤的病理學分級 判斷腫瘤患者預后 測定細胞增生活性除廣泛應用在腫瘤學領域外，在非腫瘤性疾病如腎小球腎炎，類風濕性疾病，宮內膜異位癥也有應用，在凡涉及反應性增生的疾病中，也有廣泛應用的前景。 各種方法相關性的比較研究表明核分裂像計數(shù)、 Ki67 LI、 PCNA LI及 AgNORs計數(shù)等之間均有明顯的相關性。 feulgen染色與流式細胞術相比，不需要將組織制成細胞懸液，所測得的增生活性更能反映組織原位的本來面貌。 測定細胞增生活性方法間的關系及其選用 原位測定細胞增生活性要求方法簡單、經(jīng)濟、重復性好、能常規(guī)使用，結果容易判斷。除AgNORs顆粒數(shù)外，其形態(tài)分類及分布部位在良惡性腫瘤的鑒別中也有應用價值。如用全自動圖像分析儀計算機計數(shù)，可計數(shù)數(shù)百或更多細胞。光鏡下， NORs為的黑色小點．多數(shù)直徑約 — 1um，位于核內，也可見于分裂細胞的染色體上。 NORs含有核糖體基因和一些對銀有高親和性的酸性蛋白質。 Feulgen染色后顯微分光光度計或計算機圖像分析能在原位檢測 DNA含量。并可出現(xiàn)二倍體以上甚至四倍體 DNA。 腸腺瘤 腸腺癌 3. DNA含量測定 正常體細胞含二倍體基因組 DNA。 細胞周期中不同時期的關卡蛋白或調節(jié)元件 細胞周期素 A、 B、 C、 D、 E 周期素依賴性激酶（ CDK） Ki67或 PCNA抗原在核內表達．故增生細胞的核呈棕色或紅色，用蘇木素襯染也能清楚區(qū)分陽性與陰性細胞。可顯示整個細胞周期細胞。 MCM蛋白 （微染色體維持蛋白） 是啟動 DNA復制和延伸的關鍵蛋白。在除 G0期外的其它時相細胞均可測出。 Ki67 因其所測的蛋白只表達在 G1， G2， M和 S期的細胞， G0 期及 G1早期細胞不表達。 切片不能過染 切片過染會導致核分裂像辨認困難。 注意事項： 嚴格控制切片厚度 在較厚的切片觀察時，微調顯微鏡可在不同平面計數(shù)核分裂像，與較薄切片相比，顯然增加了計數(shù)機會。 核分裂像計數(shù)有兩種方法 高倍視野法（ HPF） 一般在 400倍放大下，隨機選擇一定
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