【正文】 破壞，不能聚集到線粒體內(nèi)，紅色熒光減弱，單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光。細(xì)胞凋亡時線粒體膜電位發(fā)生去極化，JC1進(jìn)入線粒體以單體形式存在，僅在Fl1通道有熒光。DF 顯示 JC1在FL2通道熒光信號降低的細(xì)胞亞群(R2)顯著增加，證明線粒體膜電位△Ψm 下降，細(xì)胞發(fā)生凋亡。JC1 單體的最大激發(fā)波長為 514nm，最大發(fā)射波長為 527nm；JC1 聚合物(Jaggregates)的最大激發(fā)波長為 585nm，最大發(fā)射波長為 590nm。線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個標(biāo)志性事件。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化?？梢詸z測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。所以AnnexinV陰性PI陰性 代表正常細(xì)胞AnnexinV陽性PI陰性 代表凋亡早期的細(xì)胞AnnexinV陽性PI陽性 代表凋亡晚期的細(xì)胞或壞死的細(xì)胞AnnexinV陰性PI陽性 一般不存在這一群細(xì)胞，如果出現(xiàn)這一團(tuán)細(xì)胞可能是PI標(biāo)記時間過長，或者操作過于劇烈而傷害到原本正常的細(xì)胞。AnnexinV可以再鈣離子存在的情況下，和細(xì)胞表面外翻的磷脂酰絲氨酸結(jié)合，而磷脂酰絲氨酸的外翻是細(xì)胞凋亡的早期事件。在雙變量流式細(xì)胞儀的散點(diǎn)圖上，左下象限顯示活細(xì)胞，為（FITC/PI）；右上象限是非活細(xì)胞，即壞死細(xì)胞，為（FITC+/PI+）；而右下象限為早期凋亡細(xì)胞，顯現(xiàn)（FITC+/PI）。碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一種核酸染料，它不能透過完整的細(xì)胞膜，但在凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞，PI能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核紅染。PS轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外不是凋亡所獨(dú)特的，也可發(fā)生在細(xì)胞壞死中。AnnexinV是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力特異性結(jié)合。謝謝老師閱讀，有不正確的地方請老師批評指正。最后我個人的話最想獲得的是關(guān)于癌細(xì)胞無限增殖機(jī)理方面的指導(dǎo)，和我不成熟構(gòu)想的可實(shí)施率。至于疑惑這個方面就是在教材更新?lián)Q代不及時的情況下，我們是否只能通過課外閱讀這些方式來擴(kuò)展自己的知識面，還有就是技術(shù)的更新我們是否能夠跟的上，倘若有同學(xué)本科畢業(yè)便想進(jìn)入行業(yè)工作，最新的技術(shù)他們又要從何學(xué)習(xí)。同樣的癌細(xì)胞的無限增殖基因或許也能在器官移植這一領(lǐng)域有所貢獻(xiàn)，也是利用無限增殖，讓器官細(xì)胞增殖，成長成完整的細(xì)胞。我自己有一個不成熟的想法，很久之前曾了解到俄羅斯的“永生計(jì)劃”它的設(shè)計(jì)活體意識轉(zhuǎn)移到機(jī)器人身上，對此幾乎大多數(shù)人是不看好，不支持的。很多人對生物技術(shù)這個專業(yè)有很多的誤解，我們在完成自己研究項(xiàng)目的同時也有義務(wù)科普大眾。但是我們都知道越巨大的事物邁步子很大也很緩慢，何況在人才流失的情況下。然后關(guān)于自己的專業(yè)，現(xiàn)在我們所學(xué)的知識其實(shí)普遍落后，教科書的編排更新不及時，可能我們學(xué)到的東西可能學(xué)校外面已經(jīng)開始產(chǎn)業(yè)化了，測序技術(shù)已經(jīng)開始第四代了，而我們可能畢業(yè)前一年才開始學(xué)習(xí)切片制作，學(xué)習(xí)的東西很古老，再就是我們這個專業(yè)，并沒有像其他幾大理科領(lǐng)域一樣有清晰的邏輯和量化，這導(dǎo)致了很多小領(lǐng)域只有開頭和結(jié)果而沒有一個可復(fù)制的過程，而沒有可復(fù)制的過程就代表著無法帶領(lǐng)這個行業(yè)產(chǎn)業(yè)化，因此，這個行業(yè)在沒有開源的情況下就無法支撐這個領(lǐng)域下的大多數(shù)學(xué)生的溫飽，就只能節(jié)流，這樣就導(dǎo)致了本專業(yè)的人才無法繼續(xù)從事與本專業(yè)有關(guān)行業(yè)，轉(zhuǎn)而從事其他行業(yè)，從而導(dǎo)致人才流失，最終專業(yè)發(fā)展緩慢。對我自己而言，我想在生物技術(shù)這方面有所建樹，最主要的還是在科研方面能攻克一些難題，雖然可能現(xiàn)在想法不是太成熟但是我相信經(jīng)過幾年的磨練與努力我能夠攻破這些難題。再我自己看來生物技術(shù)其實(shí)是一個既可以看做一個基礎(chǔ)學(xué)科也可以看做是一個很新興的，綜合性的學(xué)科。它主要包括發(fā)酵技術(shù)和現(xiàn)代生物技術(shù)。生物技術(shù)，最官方的定義是指人們以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合其他基礎(chǔ)科學(xué)的科學(xué)原理，采用先進(jìn)的科學(xué)技術(shù)手段，按照預(yù)先的設(shè)計(jì)改造生物體或加工生物原料，為人類生產(chǎn)出所需產(chǎn)品或達(dá)到某種目的。4．細(xì)胞凋亡與壞死的區(qū)別 凋亡 壞死1機(jī)制 基因調(diào)控的程序化（programmed）細(xì)胞死亡，主動進(jìn)行（自殺性）意外事故性（accident）細(xì)胞死亡，被動進(jìn)行（他殺性）2誘因 生理性或輕微病理性刺激因子誘導(dǎo)發(fā)生，如生長因子缺乏 病理性刺激因子誘導(dǎo)發(fā)生，如缺氧、感染、中毒 死亡范圍 多為散在的單個細(xì)胞 多為聚集的大片細(xì)胞3形態(tài)特征 細(xì)胞固縮，核染色質(zhì)邊集，細(xì)胞膜及各細(xì)胞器膜完整，膜可發(fā)泡成芽，形成凋亡小體 細(xì)胞腫脹，核染色質(zhì)絮狀或邊集，細(xì)胞膜及各細(xì)胞器膜溶解破壞，溶酶體酶釋放，細(xì)胞自溶4生化特征 耗能的主動過程，有新蛋白合成，DNA早期規(guī)律降解為180200bp片段，瓊脂凝膠電泳呈特征性梯帶狀 不耗能的被動過程，無新蛋白合成，DNA降解不規(guī)律，片段大小不一，瓊脂凝膠電泳不呈梯帶狀5周圍反應(yīng) 不引起周圍組織炎癥反應(yīng)和修復(fù)再生，但凋亡小體可被鄰近細(xì)胞吞噬 引起周圍組織炎癥反應(yīng)和修復(fù)再生細(xì)胞自噬細(xì)胞自噬的生理功能1及時清除細(xì)胞中隨時產(chǎn)生的“垃圾”（如破損或衰老的細(xì)胞器、長壽命蛋白質(zhì)、合成錯誤或折疊錯誤的蛋白質(zhì)等），保持一種基礎(chǔ)、低水平的自噬活性是至關(guān)重要的，自噬的產(chǎn)物，如氨基酸、脂肪酸等小分子物質(zhì)，細(xì)胞自噬就是一個“備用倉庫”.鑒于上述作用，在正常生理情況下，：（1）首先，腫瘤細(xì)胞本身就具有高代謝的特點(diǎn)，對營養(yǎng)和能量的需求比正常細(xì)胞更高，但腫瘤微環(huán)境往往不能如意，如腫瘤發(fā)生初始期到血管發(fā)生之前、腫瘤長大發(fā)生血管崩塌時、腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)灶游走時等都會出現(xiàn)營養(yǎng)不足或供應(yīng)中斷，而此時提高自噬活性可以有助于度過這一危機(jī)（2）（2）當(dāng)化療、放療后，腫瘤細(xì)胞會產(chǎn)生大量的破損細(xì)胞器、損壞的蛋白質(zhì)等有害成分，此時提高自噬活性可及時清除這些有害物質(zhì)，并提供應(yīng)急的底物和能量為修復(fù)受損DNA贏得時間和條件.(3)另外，抑制細(xì)胞自噬可以導(dǎo)致細(xì)胞更容易發(fā)生凋亡，然而，細(xì)胞自噬在腫瘤的生成和癌癥的發(fā)展中到底扮演怎樣的角色，可能產(chǎn)生于以下幾種機(jī)制(1)細(xì)胞自噬的抑制會加重壞死細(xì)胞的局部炎癥反應(yīng)，從而導(dǎo)致腫瘤的生長(2)而細(xì)胞自噬可以