通過單克隆抗體技術(shù)識(shí)別肉的種類以及加熱肉品終點(diǎn)溫度的確認(rèn)-文庫(kù)吧資料
2025-03-04 15:10本頁(yè)面
【正文】 已知應(yīng)用于一種特定的種類確認(rèn) ,那么在免疫分析技術(shù)中 ? 使用提純蛋白可以增加對(duì)于特定種類抗原決定基的免疫反應(yīng)機(jī)會(huì)。 3 單克隆抗體技術(shù)用于加熱處理肌肉蛋白的確認(rèn) 單克隆抗體介紹 ? 用于熱穩(wěn)定性或抗熱性蛋白的不同抗原已經(jīng)用于發(fā)展抗體技術(shù)來確認(rèn)加熱肉品的種類。大多對(duì)于加熱肉品種類的 確認(rèn)中大都使用多克隆抗體技術(shù)方法 .最近在 我們 實(shí)驗(yàn)室中對(duì)單克隆抗體技術(shù)確認(rèn)加熱肉種類的研究中也取得了 一 定的進(jìn) 展。這些抗體已應(yīng)用于夾心 ELISA中用于鑒別加熱和罐裝肉類食物中 。 但是不同類型 BE抗原的特性是顯著不同的， Sherikar使用 SDS聚 ? 丙稀酰胺凝膠電泳的方法檢測(cè)了不 同種類的 BE抗原，并且得出結(jié)論在 BE蛋白中肌鈣蛋白 T 屬 于特定種類蛋白部分。 在解決特定種類熱穩(wěn)定性組成方面已做了 十分大的努力。 因?yàn)橥ㄟ^加熱處理后，大多的蛋白質(zhì)變性并且成為不可溶的， 所以使用抗體來處置本源蛋白質(zhì)的方法 不可以用于加熱處理過的肉類。然而不溶性蛋白的 提取需要特殊的步驟。這些 檢測(cè)方法的優(yōu)點(diǎn)在于容易獲得提取樣品，更重要的一點(diǎn)在于對(duì)傳統(tǒng)檢測(cè)方法的改進(jìn)與發(fā)展。肌肉蛋白質(zhì)的存在是顯著的 ,預(yù)示了雞肉 ? 組織存在的可能性比血清蛋白存在的可能性要大。 抗原的選擇 ? 大多數(shù)對(duì)于原料肉種類的免疫檢測(cè)方法都采用多克隆方法來處理整個(gè)血 清或血清蛋白。經(jīng)過仔細(xì)的鏡檢和亞克隆后，可以挑選出穩(wěn)定的雜交細(xì)胞鏈，它可以分泌出針對(duì)某一特定抗原的抗體，而且產(chǎn)生抗體十分頻繁。它們來自融化得抗體分泌物 Blymphocytes,而這種分泌物又來自患有骨髓瘤的免疫老鼠。在檢測(cè)程度標(biāo)準(zhǔn)化的發(fā)展過程中，一組抗體親和力和結(jié)合 ? 特性的變化也引起了人們的關(guān)注。多克隆抗體技術(shù)在自然界中是外源的，亞群和特定種類抗原或相反種類抗原相結(jié)合。 抗體的來源 ? 在使用酶免疫測(cè)定來確認(rèn)肉的種類成功的發(fā)展的過程中，最重要的是特定種類的抗體，不同種動(dòng)物需要不同的免疫試劑。在表 1中對(duì)不同類型 ELISA用 各種肉的抗原對(duì)原料肉的確認(rèn)進(jìn)行了總結(jié)。另一 種抗體用作檢測(cè)抗體。固體相 抗原結(jié)合的特定種類抗原的限制數(shù)同液 體相中的抗原數(shù)成正比。間 接ELISA,先把抗原吸入一個(gè)微量平板上，之后相反動(dòng)物的抗體與抗原結(jié)合吸附在固體層上，通過二者與隨后加入的反免疫球蛋白的結(jié)合，通過外來添加酶而形成的顏色 .它可以檢測(cè)到抗原與抗體的結(jié)合物 。 ? ELISA由于下面的優(yōu)點(diǎn)而在肉種類 ? 的確認(rèn)中得到了十分廣泛的應(yīng)用：不用太貴的科學(xué)儀器，易于操作，免疫試劑用量小，可應(yīng)用于大數(shù)量，寬領(lǐng)域的檢測(cè)。免疫分析經(jīng)常用在臨床處置中，但是一項(xiàng)研究指出 ,用 I 標(biāo)記免疫試劑檢 測(cè)出牛肉中存在 5﹪ 的 其他成分。經(jīng)過隔夜培養(yǎng)后在抗體和它對(duì)應(yīng)的抗原相匯處形成一個(gè)可見的不透光的帶。血凝抑制實(shí)驗(yàn)是基于阻止抗原血 清 和 它的同類抗原之間積極的反應(yīng)，而此同種類抗原被同種外來羊的紅血細(xì)胞所包裹。免疫技術(shù)的先進(jìn)之處在于它可以在很大程度是提高檢測(cè)的敏感性和結(jié)果的準(zhǔn)確性。 免疫學(xué)方法 ? 免疫學(xué)方法是基于特定抗體－抗原反應(yīng)，它適用于分析復(fù)雜混合物中的成分，同時(shí)此成分有最低的檢測(cè)量。通過混合未標(biāo)記 DNA修飾 DNA 雜交可以減少交叉反應(yīng)， 從而可以從交叉雜交種類中區(qū)分綿羊和山羊，大約有 10﹪ 的區(qū) 別限度。 DNA 雜交技術(shù)已被用于多中肉類品種的 確認(rèn) ,下一步準(zhǔn)備也進(jìn)行基因組 DNA或克 隆 DNA同目標(biāo)DNA的雜交，同時(shí)用顏色或自行 x射線照相技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)工作。這些方法可以區(qū)分不同個(gè)體肉的種類，但是由于色譜類型復(fù)雜度的增加，這些方法在檢測(cè)復(fù)合肉品中摻雜肉的種類時(shí)會(huì) 失效。但是，當(dāng)混合肉中存在多種肉或蛋白添加劑時(shí) ,很難解釋其檢測(cè)結(jié)果。 對(duì)于蛋白質(zhì)的分離電泳技術(shù)是十分有效的 ， 不同的肌肉蛋白質(zhì)的 十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（ SDSPAGE）經(jīng)常產(chǎn)生相同的蛋白類型 ， 所 以在肉種類確認(rèn)方面它的可信度十分的小。在全部加熱處理過的肉品混合物中 MABS可以對(duì)目標(biāo)品 種的含量就行定量檢測(cè)， 而且可以決定預(yù)煮肉的最大中心加熱溫度。 在 免 疫 分 析中 使用 MABS可以提 供獨(dú)一無二的試劑， 并 且可以減少分 析 ? 的費(fèi)用， MABS已被用在原料肉種類的鑒定。盡管在每一種條件下單一的方法并不一定能 夠 滿足所 有的要求，但選擇 ELISA用于肉類的檢測(cè)可以滿足最多的要 求。 為了阻止肉類的攙雜和減少由于 不足夠加熱過程引起的食物傳染疾 病 的 危害，對(duì)于管 理 監(jiān) 督 部 門來講 ,采用 可 靠分析方法來執(zhí)行肉類管理程序是十分必要的。 鮮豬肉加熱時(shí)內(nèi)部溫度應(yīng)達(dá)到℃ ， 而且殺
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