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單克隆抗體的制備ppt課件-文庫吧資料

2025-05-12 13:10本頁面
  

【正文】 濃度 10%的二甲亞砜 (DMSO)凍存液后液氮 (196 ℃ )保存。 B 接種小鼠腹腔 , 取腹水提純 。 ⑶ 軟瓊脂平板法:下飼養(yǎng) /上融合 C,分層培養(yǎng)后用 ⑵ 法 ⑷ 細(xì)胞分選儀法:流式細(xì)胞儀分選 。 7. 克隆化并擴大培養(yǎng) (單細(xì)胞培養(yǎng)稱為克隆化 ): ⑴ 有限稀釋法 :將細(xì)胞懸液逐次稀釋后加入培養(yǎng)孔 (36%的孔為 1個細(xì)胞 /孔 ), 可獲得單個細(xì)胞形成的克隆 , 選擇高分泌抗體的細(xì)胞株擴大培養(yǎng)或凍存 。 ⑶ B細(xì)胞雖含有 HGPRT, 但不能在體外培養(yǎng)存活 ( 只存活 5~7d, 且功能下降 )。 6. HAT培養(yǎng)基的選擇原理: ⑴ 氨甲蝶呤 (A)是葉酸拮抗劑 , 可阻斷細(xì)胞利用正常途徑合成 DNA, 細(xì)胞在含有氨甲蝶呤的培養(yǎng)基中不能通過正常途徑合成 DNA。 含有三種關(guān)鍵成分:次黃嘌呤 (hypoxanthine,H)氨甲蝶呤(aminopterin,A)和
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