mcab單克隆抗體ppt課件-文庫(kù)吧資料
2025-05-11 18:19本頁(yè)面
【正文】 定；中和活性的鑒定；識(shí)別抗原表位的鑒定；親和力的鑒定。 ? 方法 ：常用的是有限稀釋法和軟瓊脂平板法。 （四）雜交瘤的克隆化 ? 雜交瘤的克隆化 指將抗體陽(yáng)性孔進(jìn)行克隆化。 ? 在 HAT培養(yǎng)液中，骨髓瘤細(xì)胞缺乏 TK或HGPRT而不能生長(zhǎng)，而脾細(xì)胞能生長(zhǎng)但不能長(zhǎng)期增殖而死亡，只有雜交瘤細(xì)胞具有以上兩種酶故能生長(zhǎng)。 ? 胸腺嘧啶激酶（ TK）、 次黃嘌呤鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（ HGPRT）。 常用的有 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞、小鼠脾臟細(xì)胞或胸腺細(xì)胞。由于每種抗原都有幾個(gè)抗原決定簇，用它免疫動(dòng)物將產(chǎn)生對(duì)各個(gè)決定簇的抗體，即多克隆抗體，單克隆抗體則是由一個(gè)產(chǎn)生抗體的細(xì)胞與一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合而形成的雜交瘤細(xì)胞經(jīng)無(wú)性繁殖而來(lái)的細(xì)胞群產(chǎn)生的，所以它的免疫球蛋白屬同一類(lèi)型，質(zhì)地純一，而且它是針對(duì)某一抗原決定簇的，因此特異性強(qiáng)，親和性也一致。 單克隆抗體（ monoclonal antibody,McAb) 概述 ? 1975年 Kohler和 Milstein發(fā)現(xiàn)將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與和綿羊紅細(xì)胞免疫的小鼠脾細(xì)胞進(jìn)行融合，形成的雜交瘤細(xì)胞既可產(chǎn)生抗體，又可無(wú)性繁殖，從而創(chuàng)立了單克隆抗體雜交瘤技術(shù)，這項(xiàng)技術(shù)上的突破使血清學(xué)的研究進(jìn)入了一個(gè)高度準(zhǔn)確的新紀(jì)元。 ? 免疫細(xì)胞化學(xué)的技術(shù) 關(guān)鍵之一 是制備 特異性強(qiáng) ，親和力大，滴度高的特異性抗體 。
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