免疫組織化學(xué)技術(shù)介紹-文庫(kù)吧資料
2025-01-28 03:57本頁(yè)面
【正文】 在胞漿和胞核內(nèi)，EMA在細(xì)胞膜上。因而，沒(méi)有對(duì)照的免疫組化染色，即使做出了判斷也是不可信的。沒(méi)有陽(yáng)性對(duì)照，就不能做出真正陰性結(jié)果的判斷；同理，沒(méi)有陰性對(duì)照，也就不能做結(jié)果的判斷；同理，沒(méi)有陰性對(duì)照，也就不能做出真正陽(yáng)性結(jié)果的判斷。 ? 每批染色都要以特異性的陽(yáng)性每批染色都要以特異性的陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照為基礎(chǔ)，才能對(duì)染色結(jié)果做出正對(duì)照和陰性對(duì)照為基礎(chǔ)，才能對(duì)染色結(jié)果做出正確的判斷。因此，掌握對(duì)免疫組化結(jié)果的判斷原則是因此，掌握對(duì)免疫組化結(jié)果的判斷原則是很重要的。 免疫組化結(jié)果的判斷原則及免疫組化結(jié)果的判斷原則及對(duì)假陰性和假陽(yáng)性的認(rèn)識(shí)對(duì)假陰性和假陽(yáng)性的認(rèn)識(shí) ? 一、一、 免疫組化結(jié)果的判斷原則免疫組化結(jié)果的判斷原則 免疫組化具有特異性強(qiáng)、敏感性高及定免疫組化具有特異性強(qiáng)、敏感性高及定位正確等優(yōu)點(diǎn)，但隨著免疫組化應(yīng)用的普位正確等優(yōu)點(diǎn)，但隨著免疫組化應(yīng)用的普及和深入，越來(lái)越多的問(wèn)題也隨之出現(xiàn)。另組織片片 邊緣反應(yīng)邊緣反應(yīng) 和和 出血壞死灶周圍出血壞死灶周圍 陽(yáng)性反應(yīng)不能作為陽(yáng)性反應(yīng)不能作為診斷依據(jù)。如果缺乏細(xì)胞間的不均一性染色，即是呈陽(yáng)性染色，常提示為非特異性染色。因此，免疫組化特異性染色定位非常重要，如前所述，陽(yáng)性顆粒應(yīng)位于細(xì)胞胞膜、胞漿或胞核前所述，陽(yáng)性顆粒應(yīng)位于細(xì)胞胞膜、胞漿或胞核，陽(yáng)性細(xì)胞與陰性細(xì)胞相互交雜，陽(yáng)性染色強(qiáng)度，陽(yáng)性細(xì)胞與陰性細(xì)胞相互交雜，陽(yáng)性染色強(qiáng)度深淺不一。 ? 非特異性染色的原因常為組織標(biāo)本固定不佳、抗非特異性染色的原因常為組織標(biāo)本固定不佳、抗體質(zhì)量問(wèn)題或稀釋度不合理及操作方法不規(guī)范等體質(zhì)量問(wèn)題或稀釋度不合理及操作方法不規(guī)范等。這種標(biāo)記組織片不能作為免疫組織標(biāo)記結(jié)這種標(biāo)記組織片不能作為免疫組織標(biāo)記結(jié)果判斷依據(jù)。? （（ 4）非特異性染色）非特異性染色 是指抗原無(wú)明確定位是指抗原無(wú)明確定位，腫瘤細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞、細(xì)胞與間質(zhì)均為，腫瘤細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞、細(xì)胞與間質(zhì)均為黃色，相互累及一片，色度無(wú)深淺之分。? （（ 3）腫瘤細(xì)胞吞噬組織抗原：）腫瘤細(xì)胞吞噬組織抗原： 是由于某些惡性腫是由于某些惡性腫瘤細(xì)胞攝入周圍正常組織細(xì)胞成分，雖然后者也瘤細(xì)胞攝入周圍正常組織細(xì)胞成分，雖然后者也存在某些抗原，但不屬于瘤細(xì)胞固有成分，胞漿存在某些抗原，但不屬于瘤細(xì)胞固有成分，胞漿內(nèi)抗原定位較模糊，因此應(yīng)該區(qū)別。 ? （（ 2）腫瘤細(xì)胞異常表達(dá)）腫瘤細(xì)胞異常表達(dá) ：： 可選用多種標(biāo)記去證可選用多種標(biāo)記去證實(shí)或排除，鑒別其真正組織來(lái)源或向某一組織細(xì)實(shí)或排除，鑒別其真正組織來(lái)源或向某一組織細(xì)胞分化。故抗體交叉反應(yīng)只要應(yīng)用得當(dāng)仍有助于診斷。因此，應(yīng)全面了解和認(rèn)識(shí)該抗體的功能和標(biāo)記范圍。 S100蛋白則更為蛋白則更為嚴(yán)重，可表達(dá)于多種組織細(xì)胞。 五、非特異著色特征五、非特異著色特征 ? 以下情況可干擾免疫組化標(biāo)記結(jié)果的觀察和判斷以下情況可干擾免疫組化標(biāo)記結(jié)果的觀察和判斷：： （（ 1）抗體交叉反應(yīng)：）抗體交叉反應(yīng)： 是由于該抗原決定簇同是由于該抗原決定簇同時(shí)存在于多種組織細(xì)胞，如時(shí)存在于多種組織細(xì)胞，如 GFAP可同時(shí)存在于可同時(shí)存在于星形膠質(zhì)細(xì)胞和唾液腺肌上皮。質(zhì)細(xì)胞瘤等，陽(yáng)性顆粒定位在細(xì)胞漿。此型構(gòu)，部分陽(yáng)性細(xì)胞圍繞血管排列。結(jié)腸癌相關(guān)抗原在胃腸腺癌、膽囊腺癌、乳腺癌關(guān)抗原在胃腸腺癌、膽囊腺癌、乳腺癌中常表現(xiàn)為這種類型；卵巢癌相關(guān)抗原中常表現(xiàn)為這種類型；卵巢癌相關(guān)抗原在卵巢漿液性腺癌亦是如此；腫瘤相關(guān)在卵巢漿液性腺癌亦是如此；腫瘤相關(guān)粘液抗原在許多腺癌中也顯示腔緣陽(yáng)性粘液抗原在許多腺癌中也顯示腔緣陽(yáng)性。 ? 陽(yáng)性顆粒主要位于腺癌腔緣的陽(yáng)性顆粒主要位于腺癌腔緣的微絨毛處，沿腺管腔緣表面內(nèi)襯一薄層微絨毛處，沿腺管腔緣表面內(nèi)襯一薄層黃色顆粒，基底部多為陰性。胃腸低分化腺癌中有時(shí) HE很難鑒很難鑒別腺樣結(jié)構(gòu)，但用癌胚抗原、上皮膜抗別腺樣結(jié)構(gòu)，但用癌胚抗原、上皮膜抗原或結(jié)腸癌相關(guān)抗原則容易顯示出來(lái)。上皮標(biāo)記物多為胞漿表達(dá)。 ? 主要見(jiàn)于腺癌和具有腺癌樣結(jié)主要見(jiàn)于腺癌和具有腺癌樣結(jié)構(gòu)的胚胎性腫瘤。陽(yáng)性細(xì)胞膜與膜間相互緊靠，而胞核呈陰性細(xì)胞膜與膜間相互緊靠，而胞核呈陰性反應(yīng)，免疫組化標(biāo)記顯示網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 ? 此型主要見(jiàn)于細(xì)胞密度較大的此型主要見(jiàn)于細(xì)胞密度較大的大細(xì)胞腫瘤，標(biāo)記物多為膜抗原。此型可見(jiàn)于上皮源性腫瘤、某些向上皮分化的間葉源性腫瘤、惡性黑色素瘤、中分化神經(jīng)內(nèi)的間葉源性腫瘤、惡性黑色素瘤、中分化神經(jīng)內(nèi)分泌瘤及核形細(xì)胞瘤（如癌肉瘤和神經(jīng)纖維瘤、分泌瘤及核形細(xì)胞瘤（如癌肉瘤和神經(jīng)纖維瘤、平滑肌肉瘤）。陽(yáng)性細(xì)胞多為細(xì)胞漿表達(dá)，細(xì)胞間界限較清晰，但相互融合呈片狀或團(tuán)塊狀結(jié)胞間界限較清晰，但相互融合呈片狀或團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。 ? 較常見(jiàn)。此型中細(xì)胞幾乎都高度表達(dá)某種抗原，如淋巴瘤（白細(xì)胞共乎都高度表達(dá)某種抗原，如淋巴瘤（
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