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免疫組織化學(xué)技術(shù)介紹-文庫吧在線文庫

2025-02-15 03:57上一頁面

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【正文】 免疫組化標(biāo)記中,陽性標(biāo)記細(xì)胞學(xué)特征是反映免疫組化標(biāo)記中,陽性標(biāo)記細(xì)胞學(xué)特征是反映抗原在細(xì)胞中的定位和分布情況。一般而言,抗原含量越多,分布密度越高,標(biāo)記方法越敏感,陽性結(jié)果顯色則越強(qiáng)。免疫組織化學(xué)技術(shù)免疫組織化學(xué)技術(shù) 西南醫(yī)院病理學(xué)研究所西南醫(yī)院病理學(xué)研究所馮俊明馮俊明? 免疫組織化學(xué)(簡稱免疫組化)是組織化學(xué)的免疫組織化學(xué)(簡稱免疫組化)是組織化學(xué)的一種,它是利用已知的特異性抗體或抗原能特一種,它是利用已知的特異性抗體或抗原能特異性結(jié)合的特點,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記于結(jié)合異性結(jié)合的特點,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記于結(jié)合后的特異性抗體上的顯示劑,如酶、金屬離子后的特異性抗體上的顯示劑,如酶、金屬離子、同位素等,顯示一定的顏色,并借助顯微鏡、同位素等,顯示一定的顏色,并借助顯微鏡觀察其顏色的變化,從而在抗原抗體結(jié)合部位觀察其顏色的變化,從而在抗原抗體結(jié)合部位確定組織、細(xì)胞結(jié)構(gòu)的化學(xué)成份或化學(xué)性質(zhì)。一般而言,抗原含量越多,分布度和標(biāo)記方法及其敏感性。取了周圍組織抗原之故。等。依據(jù)抗原在胞漿內(nèi)分)等。這種毛,而胞漿和胞膜可以是陽性或陰性表達(dá)。形式出現(xiàn)。細(xì)胞角蛋白、上皮膜抗原在低分化鱗色深淺不一。陽性細(xì)胞多為細(xì)胞漿表達(dá),細(xì)較常見。反應(yīng),免疫組化標(biāo)記顯示網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。結(jié)腸癌相黃色顆粒,基底部多為陰性。星形膠質(zhì)細(xì)胞和唾液腺肌上皮。胞分化。因此,免疫組化特異性染色定位非常重要,如。及和深入,越來越多的問題也隨之出現(xiàn)。組化染色,即使做出了判斷也是不可信的。 二、引起假陰性和假陽性結(jié)果的原因 :假陰性結(jié)果的原因主要是:(( 1)) 抗體已失活或濃度不當(dāng)或抗體本身達(dá)不到應(yīng)有的敏感度抗體已失活或濃度不當(dāng)或抗體本身達(dá)不到應(yīng)有的敏感度;;(( 2)) 由于組織自溶,抗原擴(kuò)散而導(dǎo)致抗原消失,特別在長期由于組織自溶,抗原擴(kuò)散而導(dǎo)致抗原消失,特別在長期固定的標(biāo)本中因抗原漏出而致假陰性,因此應(yīng)多用新鮮固固定的標(biāo)本中因抗原漏出而致假陰性,因此應(yīng)多用新鮮固定之標(biāo)本;定之標(biāo)本;(( 3)) 操作步驟不當(dāng),如反應(yīng)時間不夠或過久、洗脫不夠或溫操作步驟不當(dāng),如反應(yīng)時間不夠或過久、洗脫不夠或溫度過高;度過高;(( 4)) 組織或細(xì)胞中抗原的含量很低,所用的方法難以檢測到組織或細(xì)胞中抗原的含量很低,所用的方法難以檢測到,如用直接法檢測為陰性,但改用間接法時則為陽性。要設(shè)陰性和陽性對照。:抗體保存: 20℃℃ 分裝凍存,或于分裝凍存,或于 4℃℃ 常規(guī)使用常規(guī)使用,切忌反復(fù)凍融。(三)部分區(qū)域不著色(三)部分區(qū)域不著色。、二甲苯或封顯色反應(yīng)物溶于脫水的酒精、二甲苯或封片液中。,一抗?jié)舛刃∮诙箍贵w過度稀釋,一抗?jié)舛刃∮诙埂1鶅銮衅航M織在貼片前已經(jīng)充分固定??贵w使用前未離心。當(dāng)加抗體時切片上緩沖液過多。 三月 2121:39:1421:39Mar2128Mar211故人江海 別 ,幾度隔山川。 21:39:1421:39:1421:393/28/2023 9:39:14 PM1成功就是日復(fù)一日那一點點小小努力的 積 累。 三月 21三月 21Sunday, March 28, 2023 閱讀 一切好 書 如同和 過 去最杰出的人 談話 。 2023/3/28 21:39:1421:39:1428 March 20231一個人即使已登上 頂 峰,也仍要自 強(qiáng) 不息。 勝 人者有力,自 勝 者 強(qiáng) 。 28 三月 20239:39:14 下午 21:39:14三月 211楚塞三湘接, 荊門 九派通。 三月 219:39 下午 三月 2121:39March 28, 20231行 動 出成果,工作出 財 富。溫箱干燥替代脫水過程。顯色反應(yīng)時間過短。蘇木素染液欠佳。切片無粘附試劑。(四)各種孵育結(jié)果所有抗體均不著色(四)各種孵育結(jié)果所有抗體均不著色。免疫組化常遇問題免疫組化常遇問題(二)部分區(qū)域背景著色(二)部分區(qū)域背景著色。 30min配置。陽性表達(dá)一概不能視為陽性。沒有陽性對照,就不能做出真正陰性確的判斷。另組織是呈陽性染色,常提示為非特異性染色。黃色,相互累及一片,色度無深淺之分。故抗體交叉解和認(rèn)識該抗體的功能和標(biāo)記范圍。此型多見于分化較好的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤和膠多見于分化較好的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤和膠質(zhì)細(xì)胞瘤等,陽性顆粒定位在細(xì)胞漿。胃腸低分化腺癌中有時表達(dá)。平滑肌肉瘤)。此型中細(xì)胞幾接,也可以單個細(xì)胞散在分布。漿同時陽性。在腫瘤標(biāo)記物中多見于上基底部可呈陰性反應(yīng)。局限者陽性顆粒彌漫而均勻地分布于整個細(xì)胞漿。等。根據(jù)抗原在細(xì)胞中分布和陽性顆粒判斷依據(jù)。在結(jié)果判斷中,后兩,示為強(qiáng)陽性。故對免疫組化標(biāo)記結(jié)果的意義多。故對免疫組化標(biāo)記結(jié)果的意義 不能絕對化不能絕對化 ,應(yīng)在光鏡觀察組織形態(tài)的基礎(chǔ)上,合理使用免疫應(yīng)在光鏡觀察組織形態(tài)的基礎(chǔ)上,合理使用免疫組化技術(shù),審慎判斷其標(biāo)記的意義。在結(jié)果判斷中,后兩者較有意義,可作為判斷依據(jù)。根據(jù)抗原在細(xì)胞中分布和陽性顆粒沉淀部
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