【正文】 中間體合成研究（Ⅴ）論文12g 溶于 40 mL 蒸餾水中。30 ℃揮去溶液中水分，加入 30 mL 甲醇重結(jié)晶，得白色晶體，即為化合物 B3。反應(yīng) 8 h（反應(yīng)液開始為淺黃色逐漸變?yōu)闊o色）最終得淺黃色液體略帶殘渣過濾得澄清液體。常溫反應(yīng)并攪拌。圖 3 化合物 B2 的 TLC 圖對溫度對試驗影響的研究蔗糖6乙酸酯 g，TEMPO g，NaBr g 溶于 40 mL 蒸餾水中。30 ℃揮去溶液中水分，加入 30 mL 甲醇重結(jié)晶，得白色晶體，即為化合物 B2。反應(yīng) 10 h（反應(yīng)液開始為淺黃色逐漸變?yōu)闊o色）最終得淺黃色液體略帶殘渣過濾得澄清液體。0 ℃冰水浴并攪拌。 蔗糖酯類陽離子類脂中間體合成研究（Ⅴ）論文11圖 2 化合物 B1 的 TLC 圖對超聲應(yīng)用的必要性的研究糖6乙酸酯 g，TEMPO g，NaBr g 溶于 50 mL 蒸餾水中。30 ℃揮去溶液中水分，加入 30 mL 甲醇重結(jié)晶，得白色晶體，即為化合物 B1。反應(yīng) 10 h（反應(yīng)液開始為淺黃色逐漸變?yōu)闊o色）最終得淺黃色液體略帶殘渣過濾得澄清液體。0 ℃冰水浴并攪拌進行超聲。 1＇，6＇位羥基氧化的探索蔗糖6乙酸酯 g，TEMPO g，NaBr g 溶于 40 mL 蒸餾水中。表 2 實驗儀器與設(shè)備一覽表序號 名稱 生產(chǎn)廠家 型號1 恒溫水浴鍋 上海申生科技有限公司 W5100SP2 電熱鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科技有限公司 BPG9070A3 循環(huán)水式真空泵 河南省鞏義市英峪儀器一廠 SHZD4 定時電動攪拌器 山東鄄城華魯有限公司 S74015 電子分析天平 上海精密科學(xué)股份有限公司 FA20226 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠 RE52997 托盤藥物天平 北京醫(yī)用天平廠制造8 微機熔點儀 上海精密科學(xué)儀器有限公司 WRS2A/29 澳柯瑪雙溫轉(zhuǎn)換冷柜 青島澳柯瑪股份有限公司 BD\C19110 圓底燒瓶 北京市光明醫(yī)療儀器廠 250mL11 三口燒瓶 北京市光明醫(yī)療儀器廠 500mL12 三口燒瓶 北京市光明醫(yī)療儀器廠 250mL13 量筒 北京市光明醫(yī)療儀器廠 200mL14 分液漏斗 北京市光明醫(yī)療儀器廠15 滴液漏斗 北京市光明醫(yī)療儀器廠16 燒杯 北京市光明醫(yī)療儀器廠 100mL17 布氏漏斗 北京市光明醫(yī)療儀器廠18 錐形瓶 北京市光明醫(yī)療儀器廠 100mL19 燒杯 北京市光明醫(yī)療儀器廠 250mL蔗糖酯類陽離子類脂中間體合成研究（Ⅴ）論文10 原料的制備 C6 羥基保護（蔗糖6乙酸酯的合成）的探索干燥蔗糖（50 g, mol，真空干燥箱中 60 ℃干燥 24 小時）于三頸燒瓶中，加200 mL DMF,緩慢滴加原乙酸三甲酯（21 mL, mol）及對甲苯磺酸（300 mg, mol）溶液，劇烈攪拌，室溫下反應(yīng) 150 min,溶液無色透明，加蒸餾水（20 mL）,繼續(xù)攪拌反應(yīng) 30 min,加特丁胺（5 mL, mol）,繼續(xù)攪拌反應(yīng) 70 min,pH 值約為 9，中和、過濾，濾液用甲苯共蒸發(fā)法將 DMF 蒸出，殘留物結(jié)晶得到白色晶體 A。蔗糖酯類陽離子類脂中間體合成研究（Ⅴ）論文83 實驗部分 實驗試劑與儀器 實驗試劑本實驗所使用的原料如表 1 所示。 酯基去保護C 中加入甲醇 20 mL，甲醇鈉 g，在 70 ℃水浴條件下反應(yīng)，得到酯去羥基保護產(chǎn)物（D） 。反應(yīng)結(jié)束后，保持 pH 值在 4 左右，濾去反應(yīng)液中的不溶物，待產(chǎn)物（B）析出。2 ℃，反應(yīng)在 40kHz 的超聲波冰水浴中進行。反應(yīng)結(jié)束后，保持 pH 值在 4 左右，濾去反應(yīng)液中的不溶物，待產(chǎn)物（ B）析出。 蔗糖6乙酸酯的選擇性氧化方案一：取前一步驟產(chǎn)物 g（2 mmol） ，TEMP g（ mmol）以及NaBr g（ mmol）溶于 25 mL 冷水中成溶液，21%次氯酸鈉溶液 mL 加至上蔗糖酯類陽離子類脂中間體合成研究（Ⅴ）論文7溶液中，用冰水浴控制反應(yīng)溫度控制在 5177。OOHHO OHOOCORHOROCH HCl(g)DMSO OClHO OHOOCORHOROCHETMSl蔗糖酯類陽離子類脂中間體合成研究（Ⅴ）論文52 .2 初步設(shè)計合成實驗原理及步驟 初步設(shè)計合成實驗原理以蔗糖為原料酯化，得到蔗糖6乙酸酯，蔗糖6 乙酸酯再經(jīng)過選擇性氧化，再酯化得到蔗糖三羧酸酯，再經(jīng) 6 位羥基去保護生成 1’,6’蔗糖二酯再經(jīng)過 6 位羥基鹵化得到目標產(chǎn)物蔗糖酯類陽離子類脂，其合成過程如下所示。 實驗研究內(nèi)容探索蔗糖酯類陽離子類脂中間體（鹵化）的合成研究（合成路線的設(shè)計、選擇、產(chǎn)品的提純） ；研究產(chǎn)物結(jié)構(gòu)確證方法；研究各因素對蔗糖酯類陽離子類脂的中間體鹵化的影響，設(shè)計單因素實驗和正交試驗；確認目標產(chǎn)物的收率為指標確定最佳條件 C6 羥基保護（蔗糖6乙酸酯的合成）的探索；蔗糖酯類陽離子類脂中間體合成研究（Ⅴ）論文42 合成路線設(shè)計 初步設(shè)計鹵化反應(yīng)的合成路線 通過中外文獻的檢索為發(fā)現(xiàn)相關(guān)蔗糖酯類陽離子類脂鹵化反應(yīng)的文獻，再結(jié)合中外文獻的基礎(chǔ)上采用模擬推斷法自行設(shè)計了兩種方案如下： 初步設(shè)計以 DMF 為溶劑的 C6 位羥基選擇性鹵化反應(yīng)酯化物（ mmol）的 DMF（60 mL）溶液中加入三苯基膦 PH3P( g, 23mmol)以及咪唑（ g, mmol）和碘 I2( g, mmol),混合物加熱至 80 ℃反應(yīng) h,產(chǎn)物視性質(zhì)純化處理。 本文的主要研究內(nèi)容以蔗糖為原料酯化，得到蔗糖6乙酸酯，蔗糖6 乙酸酯再經(jīng)過選擇性氧化，再酯化得到蔗糖三羧酸酯，再經(jīng) 6 位羥基去保護生成 1ˊ,6ˊ蔗糖二酯再經(jīng)過 6 位羥基鹵化得到目的產(chǎn)物蔗糖酯類陽離子類脂。近年來應(yīng)用較多的是鹵化法獲得陽離子類脂。近年來國內(nèi)外不斷有新的陽離子類脂的合成獲得成功，并取得相應(yīng)的專利 [8]。陽離子類脂作為一種表面活性劑，由于其具有較好的生物活性所以其在基因治療方面得到廣泛的應(yīng)用 1987 年，F(xiàn)elgner 和同事首次報道利用天然二醚聯(lián)陽離子脂質(zhì)（DOTMA）作為人類基因載體進入細胞進行基因治療。陽離子載體由于可以靜電吸附基因，構(gòu)成穩(wěn)定的基因復(fù)合物而日益得到廣泛的研究。因此人們越來越多的吧目光投向了非病毒載體。因此制備安全高效的基因載體就成為成功的基因治療的一個必要條件?；蛑委煹闹饕康氖浅晒Φ膶⑦z傳物質(zhì)傳遞到目標組織、器官或者細胞。因此探索一種合成簡單，無污染或少污染的新的陽離子類脂有著重要意義。因此，胞內(nèi)傳遞生物活性劑過程中最主要的困難被認為是如何將活性劑從胞外區(qū)轉(zhuǎn)移到胞內(nèi)區(qū)，同樣也難以將生物活性劑定位于選定細胞膜的表面 [6]。目前的生物活性劑體內(nèi)轉(zhuǎn)染細胞的方法一般是無效的，這樣阻礙了對治療各種疾病的改進方法的研究和使用。目前國外已經(jīng)有公司申請了相關(guān)的專利，并且就有關(guān)的陽離子類脂的合成給出了相應(yīng)的方法，所以在前人的工作基礎(chǔ)上我們能相應(yīng)的完成蔗糖酯類陽離子類脂的合成 [5]。本課題就是以蔗糖為原料通過酯化選擇性氧化再酯化，酯交換，鹵化等步驟來合成蔗糖酯類陽離子類脂的，本課題的目的就在于此。特別需要新的或更好的陽離子類脂用于胞內(nèi)傳遞生物活性劑 [4]。轉(zhuǎn)染后，補充血清。因為細胞需要血清來生存，所以這是一種嚴重缺陷。然而，目前能得到的陽離子類脂和陽離子脂質(zhì)體對生物活性劑的體內(nèi)胞內(nèi)傳遞一般是無效的。然而，目前可用的載體(包括脂質(zhì)體和聚合物)對于生物活性物質(zhì)在體內(nèi)的胞內(nèi)傳遞一般是無效的。人們已研制出多種用于轉(zhuǎn)染生物活性劑的載體。人們己研制出多種直接傳遞生物活性劑到活細胞內(nèi)的方法。其中，陽離子脂質(zhì)體由于具有對陰離子型聚電解志敏感，對待負電荷的 DNA 有較高的轉(zhuǎn)運能力，還能轉(zhuǎn)運 RNA、核糖體及其他大電荷的分子和大分子物質(zhì)進入細胞等優(yōu)點，其轉(zhuǎn)染效率比其他脂質(zhì)體高出許多倍，因而被廣泛應(yīng)用于基因轉(zhuǎn)移技術(shù)中 [2]。目前，用于臨床的基因載體大致分為病毒載體和非病毒載體兩類它們都具有各自鮮明的優(yōu)缺點，在臨床治療上亟需改進。基因治療載體在基因治療過程中起一個轉(zhuǎn)運和保護的作用，是基因治療成功與否的關(guān)鍵。 Halogenation。 (3) reaction time : h. The yield is % and the product is white crystal..Key words ：Sucrose ester cationic lipids。bit oxides,this pound is needed to go by esterify and ester group deprotection reaction, and then the target pound is obtained through the halogenation. In this article the last stride halogenation is described in the synthetic reaction of sucrose esters of cationic lipid purpose, in which material ra