【正文】 0S的剪接體，進(jìn)行 RNA前體分子的剪接。RNA的剪切： 許多相對(duì)分子質(zhì)量較小（106～185bp）的核內(nèi) RNA（如 U1,U2,U4,U5和 U6）以及與這些 RNA相結(jié)合的核蛋白（snRNP）參與 RNA的剪接。保守序列 GUAG,AUAC次要區(qū)別：Ⅰ、Ⅱ型剪接本身具有催化功能，屬于核酸催化，Ⅰ類(lèi)需游離鳥(niǎo)苷或鳥(niǎo)苷酸啟動(dòng)，Ⅱ類(lèi)無(wú)需，mRNA 剪接屬于蛋白催化。mRNA：許多分子量較小的核內(nèi) RNA（U1,U2,U4,U5,U6）以及與這些 RNA結(jié)合的核蛋白（snRNA）參與 RNA剪接。Ⅰ型：鳥(niǎo)苷或鳥(niǎo)苷酸的 3’－OH 作為親核基團(tuán)攻擊內(nèi)含子 5’端磷酸二酯鍵，從上游切開(kāi) DNA鏈；8 / 12再由上游外顯子（第一個(gè)）的自由 3’－OH 作為親核基團(tuán)攻擊內(nèi)含子 3’核苷酸的磷酸二酯鍵，使內(nèi)含子被完全切開(kāi)（不發(fā)生水解，無(wú)需供能） ；上下游兩個(gè)外顯子通過(guò)新的磷酸二酯鍵相連。RNA 合成起始后，ρ 因子即附著在新生的 RNA鏈上，靠 ATP水解能量，沿 5’?3’朝 RNA聚合酶移動(dòng)，到達(dá)RNA的 3’－OH 端后取代了暫停在終點(diǎn)位上的 RNA聚合酶，使之從模板 DNA釋放 nRNA，完成轉(zhuǎn)錄。終止效率與二重對(duì)稱(chēng)序列和寡聚 U的長(zhǎng)短有關(guān)。 新生 DNA中的發(fā)卡結(jié)構(gòu)會(huì)導(dǎo)致 RNA聚合酶的暫停，破壞 RNADNA雜合鏈 5’端的正常結(jié)構(gòu)；寡聚 U使雜合鏈的 3’部分出現(xiàn)不穩(wěn)定 rU?da區(qū)域。終止因子：協(xié)助 RNA聚合酶識(shí)別終止信號(hào)的蛋白因子。由于 CpG甲基化增加了胞嘧啶殘基突變的可能性，5－mC 也作為內(nèi)源性誘變劑或致癌因子調(diào)節(jié)基因表達(dá)。真核生物中 5－mC 主要出現(xiàn)在 5’－CpG－3’序列中，5－mC 脫氨后生成的胸腺嘧啶，不易被識(shí)別和矯正。因?yàn)榧谆瘜?duì)轉(zhuǎn)錄的抑制強(qiáng)度與 MeCP1結(jié)合 DNA的能力成正相關(guān)，甲基化CpG的密度和啟動(dòng)子強(qiáng)度之間的平衡決定了該啟動(dòng)子是否具有轉(zhuǎn)錄活性。當(dāng)這一類(lèi)啟動(dòng)子被增強(qiáng)時(shí)（帶有增強(qiáng)子） ，既使不去甲基化也可以恢復(fù)其轉(zhuǎn)錄活性。5－甲基胞嘧啶在 DNA上并不是隨機(jī)分布的，基因的 5’端和 3’端往往富含甲基化位點(diǎn)，而啟動(dòng)區(qū) DNA分子上的甲基化密度與基因轉(zhuǎn)錄受抑制的程度密切相關(guān)。研究表明，當(dāng)組蛋白 H1與含 CCGG序列的甲基化或非甲基化 DNA分別形成復(fù)合體時(shí)，DNA 的構(gòu)型存在著很大的差別，甲基化達(dá)到一定程度時(shí)會(huì)發(fā)生從常規(guī)的 BDNA向 ZDNA的過(guò)渡。在真核生物中，5－甲基胞嘧啶主要出現(xiàn)在 CpG序列、CpXpG、CCA/TGG 和 GATC中。28 DNA甲基化狀態(tài)可能調(diào)節(jié) DNA復(fù)制的機(jī)理如何？P250DNA甲基化能引起染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、DNA 構(gòu)象、DNA 穩(wěn)定性及 DNA與蛋白質(zhì)相互作用方式的改變，從而控制基因表達(dá)。相對(duì)分子量較大的前體 RNA出現(xiàn)在核內(nèi)，只有成熟的，相對(duì)分子量明顯變小并經(jīng)過(guò)化學(xué)修飾的 mRNA才進(jìn)入胞質(zhì)。原核 mRNA5’端無(wú)帽子結(jié)構(gòu)，3’端無(wú)poly(A)或只有較短的 poly(A)幾乎都是單順?lè)醋?，通過(guò) RNA聚合酶Ⅱ進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。mRNA可分為：①編碼區(qū)②位于 AUG之前 5’端上游非編碼區(qū)③終止密碼之后不翻譯的3’端下游非編碼區(qū)。mRNA帽子常被甲基化；帽子結(jié)構(gòu)可能使mRNA免受核酸酶破壞。原核 真核mRNA 半衰期短，細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄和翻譯是緊密相連的，一旦轉(zhuǎn)錄開(kāi)始，核糖體就結(jié)合到mRNA5’端啟動(dòng)蛋白結(jié)合，當(dāng)一個(gè) mRNA5’開(kāi)始降解時(shí)，3’可能仍在合成或被翻譯。GC區(qū)同上27 原核生物與真核生物 mRNA的特征主要表現(xiàn)在什么地方？單順?lè)醋樱褐痪幋a一個(gè)蛋白質(zhì)的 mRNA稱(chēng)為單順?lè)醋印?6 真核生物的啟動(dòng)子區(qū)的主要結(jié)構(gòu)特征是什么？各部分的作用如何？（原核生物：－10bpTATA 區(qū) －35bpTTGACA 區(qū)）真核生物：－25～30bpTATA 區(qū)，－70～－78bpCAAT 區(qū)，GC 區(qū)上游啟動(dòng)子原件 UPE或上游激活序列 UASTATA區(qū)：使轉(zhuǎn)錄精確地開(kāi)始，提供結(jié)合位點(diǎn)。特點(diǎn)：72bp，起始位點(diǎn)約 200bp處。25 何謂增強(qiáng)子其作用機(jī)制和特點(diǎn)是什么？增強(qiáng)子：能強(qiáng)化轉(zhuǎn)錄起始的序列為增強(qiáng)子或強(qiáng)化子。在解鏈區(qū)后面，DFNA 模板鏈與原先配對(duì)的非模板鏈重新結(jié)合成雙螺旋。轉(zhuǎn)錄起始后直到形成 9個(gè)核苷酸短鏈?zhǔn)雇ㄟ^(guò)啟動(dòng)子階段，轉(zhuǎn)錄開(kāi)始進(jìn)入正常的延伸階段。轉(zhuǎn)錄起始前，啟動(dòng)子附近的 DNA雙鏈會(huì)分開(kāi)形成轉(zhuǎn)錄泡，促使底物 NTP，與模板 DNA配對(duì)。24 試述轉(zhuǎn)錄的基本過(guò)程。P69酶 細(xì)胞內(nèi)定位 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 相對(duì)活性 敏感程度6 / 12DNApolyaseⅠ 核仁 rRNA 50～70％ －DNApolyaseⅡ 核質(zhì) hnRNA 20～40％ ＋DNApolyaseⅢ 核質(zhì) tRNA ≈10％ 存在物種特異三種聚合酶中有兩個(gè)行對(duì)分子量超過(guò) 1105的大亞基；同種生物 3類(lèi)聚合酶有“共享”小亞基的傾向。轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)：指與新生 DNA鏈上第一個(gè)核苷酸相對(duì)應(yīng)的 DNA鏈上的堿基。啟動(dòng)子：5’確保轉(zhuǎn)錄精確而有效地起始的序列。將其轉(zhuǎn)化成相應(yīng) AA后加入肽鏈的轉(zhuǎn)移 RNA。mRNA：編碼特定蛋白質(zhì)序列的信使 RNA。關(guān)于轉(zhuǎn)錄的幾個(gè)概念編碼鏈：有意義鏈，與 mRNA序列相同的 DNA鏈。σ：是酶的別構(gòu)效應(yīng)物，提高 RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)子 DNA親和力，專(zhuān)一性識(shí)別模板上的啟動(dòng)子；不同 σ 因子識(shí)別不同啟動(dòng)子。β、β’：共同組成 RNA聚合酶反應(yīng)中心，與真核的兩個(gè)大亞基有同源性。全酶：核心酶加上一個(gè) σ 亞基，只有 σ 存在時(shí)，轉(zhuǎn)錄起始才進(jìn)行，σ 亞基為起始亞基。（3）是轉(zhuǎn)錄過(guò)程種最重要的酶，但無(wú)校對(duì)功能。22 RNA聚合酶全酶與核心酶的組成成分及其作用是什么？主要區(qū)別？以 DNA為指導(dǎo)的 RNA聚合酶：（1）以 4種核糖核苷三磷酸 NTP作為底物，DNA 為模板，Mn 2+/Mg2+輔助因子。21 真核生物轉(zhuǎn)錄的主要成分有哪些？P66DNA模板，游離的核糖核酸，含 σ 因子的 RNA聚合酶，轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子。原核：－10TATA 區(qū)，－35TTGACA 區(qū)，啟動(dòng)區(qū)范圍較小。（4）引起生物進(jìn)化：可使原來(lái)相距甚遠(yuǎn)的基因組合倒一起，構(gòu)建成一個(gè)操縱子單元，也可能產(chǎn)生新功能蛋白。（2）殘生新基因。TnA家族：有 3個(gè)基因，其中一個(gè)編碼 β－內(nèi)酰胺酶，另兩個(gè)是轉(zhuǎn)座作用必須的。 （表明 IS序列插入到某個(gè)功能基因兩端時(shí)可能產(chǎn)生復(fù)合轉(zhuǎn)座子） 。2復(fù)合轉(zhuǎn)座因子：一類(lèi)帶有某些抗藥性基因（或其他宿主基因）的轉(zhuǎn)座子。5 / 12 （3）轉(zhuǎn)座時(shí)往往宿主靶位點(diǎn)一小段 DNA形成 IS兩端的正向重復(fù)序列。結(jié)構(gòu)：（1）很小的 DNA片斷，1kb。轉(zhuǎn)座：一個(gè)轉(zhuǎn)座子由基因組的一個(gè)位置轉(zhuǎn)移到另一個(gè)位置的過(guò)程。易錯(cuò)修復(fù)和 SOS應(yīng)急反應(yīng)：生物體為保細(xì)胞存活，受損部位既使出現(xiàn)不配對(duì)堿基也照樣復(fù)制，出現(xiàn)高突變率。直接修復(fù)：把被損傷的堿基回復(fù)到原來(lái)的狀態(tài)，并不需要切除堿基或核苷酸，光復(fù)活作用:DNA 光解酶。一旦復(fù)制起始。（2）核苷酸切除：核苷酸發(fā)生損傷后，由 DNA切割酶在已損傷的核苷酸 3’、5’分別切開(kāi)磷酸糖苷鍵，移去小片斷后由 DNA polyaseI合成新片斷，并由 DNA連接酶完成修復(fù)中的最后一道工序。這個(gè)過(guò)程可重復(fù)進(jìn)行直到生成原長(zhǎng) 20多倍的多聯(lián)體，并由噬菌體 DNA編碼的核酸酶特異切割形成單位長(zhǎng)度的 DNA分子。17 線(xiàn)性 DNA 5’端的復(fù)制如何?其生物學(xué)意義如何? 線(xiàn)性 DNA復(fù)制中的 RNA引物被切除后，留下 5’端部分單鏈 DNA，不能為 DNA聚合酶所作用，使子鏈短于母鏈。Ⅰ有Ⅱ、Ⅲ無(wú) 5’?3’外切活性。16 DNA Polymerase I, II, III性質(zhì)的比較 P47Ⅰ Ⅱ Ⅲ4 / 123’?5’外切 ＋ ＋ ＋5’?3’外切 ＋ － －新生鏈合成 － － ＋生物學(xué)活性 1