天然藥物化學(xué)成分提取分離鑒定方法與技術(shù)色譜法-文庫吧資料
2025-01-19 20:03本頁面
【正文】 拌 勻 ② 抽 濾， 除 去多 余 的固 定 相 ③ 將 含有 固 定相 的 支持 劑 倒入 流 動相 中 飽和 ④濕 法裝柱 ⑤ 洗 脫用 的 流動 相 在使 用 前用 固 定相 溶 劑飽 和 51 2 、 分 配 薄 層 色 譜 法 ? 支 持 劑： 惰 性物 質(zhì) ? 固 定 相： 支 持劑 吸 附的 溶 劑 ? 流動 相： 事先要 用固定 相飽和 ? 裝 置 及操 作 同吸 附 薄層 色 譜， 區(qū) 別在 于 制板用 的 是支 持 劑不 是 吸附 劑 。 要求： 不與 被分離 成分反 應(yīng) 。 流 動 相： 與 固定 相 不相 混 溶的 另 一相 溶 劑 。 易溶于固定相的成分，移動速度慢。 一、基本原理 利用被分離成分在固定相和流動相中的 溶解度不同。 混合 成分則進(jìn)一步分離 。 ⑤ 無色成分則采用等分收集 。 ③ 控制洗脫劑流速為勻速 。 ① 梯度洗脫：洗脫劑極性從小到大 。 將 樣 品 溶 解 于 少 量 甲 醇 或 丙 酮 后 ， 均 勻 拌 入 適量 吸 附 劑 （1:21:3 ） ， 水 浴 揮 干 溶 劑 。 37 a 、 干法 b 、 濕法： 因濕法裝柱容易趕走硅膠內(nèi)的氣泡 ，故 一 般以 濕 法裝 柱 較好 。 ? 若柱粗而短 ， 則分離效果較差 。 柱色譜* 35 ? 其原 理、吸 附劑及 洗脫劑 的選擇 與薄層 色譜法 相 同。 原點(diǎn)至色譜斑點(diǎn)中心的距離 比移值 （Rf 值 ） ＝ 原點(diǎn)至展開劑前沿的距離 33 操作技術(shù) ——測定比移值 Rf 值越大 ，化合 物的極 性？ 34 上 樣 量 大 ， 常用于制備分離 ， 是 分 離 天 然 化學(xué) 成 分 最 常 用 的 方 法 。 ? 取 出 薄 層 板 預(yù)飽和中 展開中 30 預(yù)防 邊 緣 效應(yīng) 操作技術(shù)——顯色 顯色噴霧瓶 三用紫外燈 ? 本 身 帶 有 顏 色 ? 本 身 無 顏 色 ? 含 有 熒 光 劑 的 薄 層 板 有 色 斑 點(diǎn) 顯 色 劑 顯 色 暗 色 斑 點(diǎn) 觀 察 方 法 ： 日 光 、 熒 光 、 顯 色 。 ? 蓋 上 蓋 子 ， 展 開 。 ? 多 數(shù) 采 用 直 線 形 上 行 展 開 ， 薄 層 板 水 平 角 度 以75? 為 最 佳 。 ? 點(diǎn) 樣 量 應(yīng) 適 中 ， 過 載 會 引 起 斑 點(diǎn) 拖 尾 ， 分 離 度 變 差 。 硅膠 105 ℃110 ℃ 3060min 氧 化 鋁 105 ℃110 ℃ 30min 26 操作技術(shù) ——點(diǎn)樣 定量微升毛細(xì)管 薄層點(diǎn)樣毛細(xì)管 ? 配 制 樣 品 的 溶劑 具 高 度 揮 發(fā) 性 和 盡 可 能 非 極 性 ， 否則易 使 斑 點(diǎn) 擴(kuò) 展 。 2）薄層色譜的一般操作 a、制板 b、活化 c、點(diǎn)樣 d、展開 e、顯色 f 、 計 算比 移 值 24 操作技術(shù) ——手工鋪板 取 一 份 吸 附 劑 和 三 份 水 （ 或 另 加 黏 合 劑 ） ， 在研 缽 中 向 一 個 方 向 研 磨 混 合 成 均 勻 糊 狀 （ 無 氣 泡 和結(jié) 塊 ） ， 均 勻 涂 布 在 薄 層 板 上 。 21 常用的硅膠吸附劑 粒徑：200300 目 種 類 ：硅 膠G —— 硅膠+ 粘 合 劑煅 石 膏 硅膠GF254 —— 含 有 熒光 物 質(zhì) 硅膠H —— 不含 粘 合劑 煅 石膏 硅膠HF254 —— 含 有 熒光 物 質(zhì) 22 常用的展開 劑 正 己 烷 、 環(huán) 己 烷 、 四 氯 化 碳 、 甲 苯 、 氯 仿 、乙 酸 乙 酯 、 正 丁 醇 、 丙 酮 、 乙 醇 、 甲 醇 、 水 23 理 想 的溶 劑 應(yīng)能 使 混合 物 分離 后 各組 分 的Rf值 相 差盡 可 能大 ， 且盡 量 之間。 20 1）薄層色譜的吸附劑和支持劑： 在 選 用 吸 附 劑 或 支 持 劑 時 ， 一般是根據(jù)被 分 離 物 質(zhì) 的 化 學(xué) 性 質(zhì) 來 選 用 。 c、被分離物質(zhì) 遵 循 “相 似 相溶 ” 及“ 相 似者 易 吸附 ” 原理 ： 對 于 極 性 吸 附 劑 而 言 ： 被
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