【正文】 化合物的存在及生物活性。 熟悉葛根 中黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。 2．簡述黃酮類化合物的酸性規(guī)律及在黃酮苷元分離中的應(yīng)用。 2．若濾液久置無結(jié)晶析出，可采取的方法有：松動(dòng)瓶塞；加入少量晶種；玻璃棒摩擦； 加有機(jī)可溶性鹽類鹽析。 結(jié)晶的操作技術(shù) （一）結(jié)晶分離技術(shù)的一般操作過程 1．將需結(jié)晶物質(zhì)置于錐形瓶中，加入較需要量略少的溶劑，于水浴上加熱至微沸； 2．將熱溶液趁熱抽濾，以除去不溶的雜質(zhì)； 3．將濾液冷卻，使結(jié)晶析出； 4．濾出結(jié)晶，必要時(shí)用適宜的溶劑洗滌結(jié)晶。一般常用甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等。 結(jié)晶溶劑的選擇 合適的溶劑就是在冷時(shí)對所要的成分溶解度小，而熱時(shí)溶解度又較大的溶劑。 苷類在中藥中分布很廣泛，且具有多方面的生物活性，是一類重要的中藥化學(xué)成分。 （二）黃芩中黃酮類化合物的提取分離 黃芩中黃酮類化合物的分離 方法一： 方法二 ： （二）黃芩中黃酮類化合物的提取分離 甘 肅 黃 芩 根 粉 末乙 烷 、 丙 酮 和 甲 醇 分 別加 熱 回 流 提 取 3 次 ， 過 濾減 壓 濃 縮丙 酮 部 位 甲 醇 部 位多 次 硅 膠 柱 層 析 ，氯 仿 甲 醇 乙 酸（ 1 0 0 ： 2 0 ： 0 . 5 ）梯 度 洗 脫濃 縮 析 晶 ， 重 結(jié) 晶黃 芩 苷木 蝴 蝶 素 漢 黃 芩 素 黃 芩 素 甘 黃 芩 苷 元 甘 黃 芩 素 四 知識(shí)鏈接及拓展 苷 檢識(shí) 結(jié)構(gòu) 與分類 理化性質(zhì) 苷（ glycosides）又稱糖苷、甙或配糖體，是糖及其衍生物的端基碳原子與另一非糖物質(zhì)（稱為苷元或配基）連接而成的化合物。黃芩苷經(jīng)水解能生成苷元黃芩素，黃芩素分子中具有鄰三酚羥基，易被氧化為醌類衍生物而顯綠色。水提取液酸化后，該鎂鹽又轉(zhuǎn)化為有游離羧基的黃芩苷， 因其難溶于酸水而沉淀析出。黃芩苷元的磷酸酯鈉鹽可用于治療過敏、哮喘等疾病。從其中分離出的黃酮類化合物有黃芩苷、黃芩素、漢黃芩苷、漢黃芩素、木蝴蝶素Ａ等 20多種。 學(xué)會(huì) 黃芩中黃酮類 化合物的色譜鑒定技術(shù) 。 知識(shí)要求 3 能力要求 1 掌握黃芩中黃酮類化學(xué)成分的提取分離原理及操作技術(shù)。 熟悉 黃芩中黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。原理：反相柱色譜（黃酮類化合物極性大） 固定相： ODS 流動(dòng)相：水 乙晴不同比例。 （ 1）聚酰胺柱色譜（首選法） 洗脫順序（含水溶劑：乙醇 水等） ①苷元相同：叁糖苷 → 雙糖苷 → 單糖苷 → 苷元（酚羥基比例） ②母核上羥基越多，洗脫越慢（酚羥基數(shù)量） ③酚羥基數(shù)量相同：鄰羥基的 → 對（間）羥基的（酚羥基的位置） ④芳香核、共軛雙鍵越多，洗脫越慢（酚羥基所處母核的共軛程度） ⑤不同苷元： 異黃酮 → 二氫黃酮醇 →黃酮 → 黃酮醇 母核共軛程度較后兩者小 ， 后者比前者多一個(gè)羥基。 分離依據(jù)： 游離黃酮類化合物的酸性差異 ?？扇苡跐饬蛩帷恹}酸等強(qiáng)無機(jī)酸生成 鹽，該鹽極不穩(wěn)定，加水后即分解。 其酸性強(qiáng)弱與酚羥基數(shù)目的多少和位置有關(guān)。 因此，可用 pH梯度萃取法來分離黃酮類化合物。 具有一般酚羥基者只溶于氫氧化鈉水溶液。 ★ 游離黃酮 水 甲醇乙醇 乙酸乙酯 氯仿 乙醚 稀堿水 + ++ + + + +（酚羥基 ) 溶解性取決于 分子的立體結(jié)構(gòu) 取代基團(tuán)的性質(zhì)、數(shù)目、連接位置 引入羥基，數(shù)目多， 4‘位，水溶度較大 羥基甲基化（ OCH3） , 水溶度降低 R=H 平面型分子 非平面型分子 黃酮 二氫類（ C環(huán)半椅式結(jié)構(gòu)） 黃酮醇 異黃酮（羰基與 B環(huán)立體障礙） 查耳酮 分子間排列不緊密， （交叉共軛） 水分子易于進(jìn)入 水溶度小 水溶度大 2OOHRH R=H 二氫黃酮 R=OH 二氫黃酮醇 水 甲醇乙醇 乙酸乙酯 氯仿 乙醚 稀堿 + ++ + + 黃酮類化合物溶解性（極性）規(guī)律 : 三糖苷 雙糖苷 單糖苷 苷元 3 O 糖苷 7 O 糖苷（平面性分子） 花色素 (平面性分子 ,離子型 ) 非平面性分子 平面性分子 ★ 黃酮苷 (親水性 ) 7， 4′2OH＞ 7或 4′OH＞一般酚羥基 5OH 7， 4′2OH者，由于 ρπ共軛效應(yīng)，使酸性增強(qiáng)而溶于碳酸氫鈉 水溶液。黃酮類甙元分子中羥基數(shù)越多，水中的溶解度越大。7+ +有顏色 交叉共軛體系 無顏色 游離黃酮 一般難溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚等有機(jī)溶劑及稀堿液中。 助色團(tuán)對顏色的影響 ： 助色團(tuán)（ OH、 OCH3等）能使顏色加深，但主要指助色團(tuán)處于 7或 4′位時(shí)，由于能形成 pπ共軛，可促使電子的轉(zhuǎn)移和重排而形成交叉共軛體系，從而使顏色明顯加深，但 OH、 OCH3引入其他位置時(shí)，對顏色的影響較小。其余的游離黃酮?jiǎng)t無旋光性 在紫外燈光下 普遍具有熒光 交叉共軛體系的存在 : 能形成交叉共軛體系的黃酮類化合物，常有明顯的黃色，并且共軛程度大小、共軛鏈的長短決定了顏色的深淺。A CB主要的天然黃酮類 化合物分為以下幾類（見下頁） 類型 基本結(jié)構(gòu) 類型 基本結(jié)構(gòu) 黃酮 二氫查耳酮 黃酮醇 花色素 二氫黃酮 黃烷 3醇 二氫黃酮醇 黃烷 3， 4二醇 異黃酮 雙苯吡酮 ( 酮 ) 二氫異黃酮 噢哢 (橙酮 ) 查耳酮 芹菜素 (5， 7， 4三羥基黃酮 ) 木犀草素 (5， 7， 3ˊ 4ˊ 四羥基黃酮 ) O HH OO HOOO H O HH OO HOOO HO HH OO HOOO HOOO HH OO HO HO HO HO H OOC H 3H OC H 3OOO HO