天然藥物化學(xué)成分提取分離鑒定方法與技術(shù)色譜法(參考版)
2025-01-16 20:03本頁(yè)面
【正文】 適用范圍：沸點(diǎn)低 、 易揮發(fā)的揮發(fā)油類成分 。 ? 特 點(diǎn) 是 使 用 高 壓 輸 液 泵 進(jìn) 行洗脫 ， 并 配 備 有 紫 外 等 檢 測(cè)系統(tǒng) ， 使 分 離 達(dá) 到 高 速 化 和高效化 。 一 、 高效液相色譜法 在 經(jīng) 典 柱 色 譜 法 基 礎(chǔ) 上 發(fā) 展 起 來(lái) 的 一 種具 有 高 效 、 快速 、 高 靈 敏 特 點(diǎn) 的 色 譜 分 離 方 法 。 60 液 固色譜法 固定相：大孔吸附樹(shù)脂 流動(dòng)相：溶劑 61 ?固定相：大孔吸附樹(shù)脂 高 分 子聚 合 物 多孔 網(wǎng)狀結(jié) 構(gòu) 不 含 交換 基 團(tuán) 吸 附 能力 ： 分子 間 作用 力 氫鍵 分 子 篩作 用 ：多 孔 性質(zhì) 特點(diǎn) 原理 62 ? 應(yīng)用： 苷類 、 皂苷 、 生物堿 、 萜類 、 黃酮等大分子 化合物 的分離 。 洗脫順序：分子量大的化合物先流出 。 56 ?離子交換樹(shù)脂的種類（功能基團(tuán)）： 陽(yáng)離子交換樹(shù)脂 ：強(qiáng)酸性（SO3H+） 弱酸性（COOH+） 陰離子交換樹(shù)脂：強(qiáng)堿性（N+ （CH3）3Cl） 弱堿性（NH2OH ，NH ，N= ） 被分離物質(zhì)帶 負(fù)電荷 被分離物質(zhì)帶 正電荷 水提 液 強(qiáng) 酸性 陽(yáng)離子 交換 樹(shù)脂 流 出液 樹(shù)脂 （酸 性、 中性 成分） （ 堿性 、兩性 成分 ） 強(qiáng) 堿性 陰離子 交換 樹(shù)脂 氨 水洗 脫 洗 脫液 流 出液 樹(shù)脂 強(qiáng) 堿性 陰離子 交換 樹(shù)脂 （中 性成分 ） （ 酸性 成分） 流出液 樹(shù)脂 （ 堿性成 分） （兩 性成 分） 水提液中酸性、堿性、兩性化合物的分離 凝膠過(guò)濾色譜法 （Gelpermeation chromatography ） ? 原理： 分子篩 。 53 紙色譜與薄層色譜裝置 離子交換色譜法 （Ion exchange chromatography ） ? 基 本 原理 ： 離 子 交換 樹(shù) 脂上 有 可解 離 的陽(yáng) 離 子或 陰離 子 基團(tuán) ， 能 可逆性 的 與 被分 離 成分 上 的離子基 團(tuán)發(fā)生 交換， 使混合 成分中 離子型 與非離 子 型物 質(zhì) 或具 有 不同 離 解度 的 離子 化 合物得 到 分離 。 ? 支持劑： 濾紙（纖維素） ? 固定相： 水 ? 流動(dòng)相 ：水飽和有機(jī)溶劑 52 用 作 微 量 分 析 ， 特 別 適 合 于 親 水 性 較 強(qiáng) 的 成 分 。 常 用 支持 劑 ： 含水硅膠 、 硅藻土 、 纖維素 、濾紙 45 適 用 范圍 ： 正 相 分配 色 譜： 親 水性 成 分和 弱 親脂 性 成分 反 相 分配 色 譜： 強(qiáng) 親脂 性 成分 根據(jù) 固定相 和流動(dòng) 相相對(duì) 極性大 小不同 ： 1 、 正 相分 配 色譜 極性： 固定相流動(dòng)相 2 、 反 相分 配 色譜 極性： 流動(dòng)相固定相 46 四、分配色譜的類型 1 、 正相分配色譜： ? 支持劑： 硅膠 等 （ 硅膠吸水＞超過(guò)17％ ， 不作 吸附劑 ， 而作為載體 ） ? 固定相：強(qiáng)極性溶劑 ， 如 水 、 緩沖液等 ? 流動(dòng)相： 氯仿 、 乙酸乙酯等弱極性親脂 有機(jī)溶劑 ? 洗脫規(guī)律： 47 ？ 極性小成分 極性大成分 先洗下 后洗下 2 、 反相分配色譜： ? 支持劑：硅膠、纖維素粉、濾紙等 ? 固定相：親脂性極性小的有機(jī)溶劑，可用石蠟油、反相硅膠RP1RP8 、RP2 ? 流動(dòng)相：水或甲醇等強(qiáng)極性溶劑 ? 洗脫規(guī)律： 48 ？ 極性大成分 極性小成分 先洗下 后洗下 表分配色譜的類型 類型 固定相 極性 流動(dòng)相 極性 分離速度 正相分配 大 小 極性小的分離速度快 反相分配 小 大 極性大的分離速度快 49 50 五、操作技術(shù) 1 、 分 配 柱 色 譜 法 ① 先 將支 持 劑和 固 定相
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