天然藥物化學(xué)成分提取分離鑒定方法與技術(shù)色譜法-閱讀頁
2025-01-28 20:03本頁面
【正文】 通常為1:15 －1:20 。 ? 若柱過長而細(xì) ， 分離效果雖好 ，但 流 速慢 ， 消耗 時(shí) 間太 長 。 38 2）上樣 39 a 、樣品易溶于 洗 脫 劑 ：濕 法 上 上樣 b 、樣品難溶于洗脫劑： 干法上樣 將樣品溶解于少量洗脫劑，制成高濃度溶液后慢慢上柱。 均勻平鋪至柱子頂端 。 ② 洗脫劑液面高度始終要高于柱面 。 ④ 有色成分收集各色帶洗脫液 。 ⑥ 濃縮洗脫液 ， 薄層檢識后合并相同流分 。 3）洗脫 40 植物色素分離圖示 41 42 分配 色譜法 是以液 體做固 定相， 用與其 不相 混 溶的 的 溶劑 做 流動 相 的 液 液 色譜 法 。 易溶于流動相的成分，移動速度快。 分配色譜法 * （ Distribution Chromatography ） 溶 解 能 力 流動相 溶質(zhì) 固定相 競爭 在 液液分配色譜 中 ， 溶質(zhì)的保留和分離選 擇性 取 決于 其 在固 定 相和 流 動相 中 的 溶解度 ： 43 溶 解 能 力 二 、 分 配色譜中的固定相和 流動相 固 定 相： 被 支持 劑 固定 的 溶劑 。 44 支持劑 固定相 流動相 待 分 離物 質(zhì) 分 配 色譜 四要素 固體 液體 液體 三 、 支持劑 （ 載體、 擔(dān)體 ） 在 分 配 色 譜 中 起 到 支 持 和 吸 著 一 定 量 固 定相 的 作用 ， 本身 無 吸附 作 用 。 不 溶 于兩 相 溶劑 中 。 3 、紙 色譜法（PC ） 系 以 紙 為載 體 ，以 紙 上所 含 水分 為 固定 相 ，用展 開劑進(jìn) 行展開 的分配 色譜。 化 合 物 極 性 越 小 ，Rf值 越 大 ； 極 性 越 大 ，Rf值 越 小 。 ? 操 作 方式 ： 柱色譜 54 液 固色譜法 固定相：離子交換樹脂 流動相：含強(qiáng)離子的水溶液 ?固定相：離子交換樹脂（高分子化合物） 球 形 顆 粒 ， 不 溶 于 水 ， 可 在 水 中 溶 脹 離 子 交換基團(tuán) 強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂結(jié)構(gòu)圖 ?適用范圍： 分離具有解離能力的酸性、堿性及兩性化合物，如生物堿 、有機(jī)酸、酚酸、氨基酸等。 ? 固 定 相： 凝 膠 （ 具 多孔 網(wǎng) 狀結(jié) 構(gòu) ） 葡 聚糖 凝 膠 （sephadex G ） 羥 丙基 葡 聚糖 凝 膠 （ sephadex LH20 ） ? 流 動 相： 水 或有 機(jī) 溶劑 58 59 ? 適用范圍：分離分子量大小不同的化學(xué)成分，如 蛋 白質(zhì) 、 多肽 、 氨基 酸 、多糖、甾體等 。 大孔吸附樹脂色譜 ?基本原理： 利用大孔樹脂具有吸附性 和 分子篩作用，使 天 然 藥 物 中 相 對 分 子 量 大 小 及 吸 附 力 強(qiáng) 弱 不同 的 化學(xué) 成 分得 以 分離 。 ? 洗 脫 規(guī)律 和 洗脫 過 程與 普 通吸 附 色譜 相 似： 對極性吸附劑來說 ， 成分極性越大 ， 越難洗 脫 ；洗 脫 劑的 極 性越 大 ， 越 易 洗脫 。 63 其他色譜法 ? 高 效 液 相 色 譜 的 原 理 與 一 般液 相 色 譜 十 分 相 似 ， 樣品的分 離 取 決 于 其 在 流 動 相 和 固定 相 中 的分 配 。 二 、 氣相色譜法 流 動 相： 氣 體 固 定 相： 液 體或 固 體 基 本 原理 ： 利用 化 學(xué) 成 分 在 氣 體 與 固 定 相 之 間 吸附 能 力 不 同 或 分 配 系 數(shù) 不 同 的 差 異 而 分 離 的色 譜 分離 方 法 。 64 思考題 1 、 薄層色譜中 ， 吸附劑 、 被分離物質(zhì)及溶劑三者 之間的 關(guān)系如 何 ？ 2 、 聚 酰 胺 分 離 下 列 黃 酮 類 化 合 物 時(shí) （ 以MeOH為溶劑 ） ， 最先 洗 脫下 來 的是 （ ） 65 3 、 根 據(jù) 不 同 性 質(zhì) 的 化 學(xué) 成 分 ， 用 連 線 選 擇 與 其相 適 應(yīng)的 色 譜分 離 方法 ： 氧 化 鋁 吸 附 柱 色 譜 法 分 子 量 大 小 不 同 的 化 合 物 凝膠 濾 過 柱 色 譜 法 堿 性 親 脂 性 化 合 物 聚 酰 胺 吸 附 柱 色 譜 法 黃 酮 類 化 合 物 離 子 交 換 色 譜 法 酸 性 親 脂 性 化 合 物 硅膠 吸 附 柱 色 譜 法 離 子 性 化 合 物 66 謝 謝 ！
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