【正文】 取特征性關(guān)聯(lián)關(guān)系，分析在不同方劑中的地位和作用，探討 ―十八反 ‖具體應(yīng)用的病證特點(diǎn)，以及針對(duì)不同病證，配伍的藥物種類、劑量、給藥方式，為 ―十八反 ‖中藥能否在臨床安全、合理應(yīng)用提供參考。以 ―十八反 ‖中藥為代表，針對(duì)反藥配伍特點(diǎn)開展數(shù)據(jù)挖掘研究，分析藥物性味歸經(jīng)、升降沉浮等屬性與劑量比例、功效特點(diǎn)、毒性反應(yīng)的配伍關(guān)系；發(fā)現(xiàn) ―十八反 ‖中藥區(qū)別于其他中藥和藥對(duì)的特殊屬性，為實(shí)驗(yàn)研究及臨床應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支持。設(shè)計(jì)特征性關(guān)聯(lián)檢索策略，為本項(xiàng)目研究開展提供堅(jiān)實(shí)的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。收集整理與本項(xiàng)目研究相關(guān)的古今文獻(xiàn)，考證 各 ―十八反 ‖中藥的衍化過(guò)程，整理歸納歷代醫(yī)家對(duì) ―十八反 ‖中藥的理論闡述、歷代相反藥項(xiàng)的范圍和臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，現(xiàn)代名家醫(yī)案、臨床報(bào)道、醫(yī)院處方和實(shí)驗(yàn)研究文獻(xiàn)，分析提取以 ―十八反 ‖為代表的配伍禁忌相關(guān)內(nèi)容，探討其來(lái)源、范圍、現(xiàn)狀和有爭(zhēng)議的問(wèn)題。 中藥 “十八反 ”文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的收集考證及數(shù)據(jù)庫(kù)建立 （ 1） ―配伍禁忌 ‖是指一般情況下不宜相互配合使用的藥物，傳統(tǒng)中藥的禁忌主要包括 ―十八反、十九畏 ‖，《本經(jīng)》明言： ―勿用相惡相反者 ‖。 技術(shù)方法創(chuàng)新 （ 1）建立適宜于中藥配伍多屬性、多層次關(guān)系研究的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘和知識(shí)發(fā)現(xiàn)體系； （ 2）建立集經(jīng)典毒理學(xué)、系統(tǒng)毒理學(xué)與快速篩查于一體的客觀、適宜、系統(tǒng)的 ―十八反 ‖毒性評(píng)價(jià)體系； （ 3）采用代謝組學(xué)及胚胎干細(xì)胞技術(shù)，早期發(fā)現(xiàn)反藥配伍的潛在毒性； （ 4）建立以致毒器官、藥物代謝酶為主要靶標(biāo)的中藥配伍禁忌致毒機(jī)理研究平臺(tái)； （ 5）建立以多組分毒代動(dòng)力學(xué)為特點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)藥理 毒理學(xué)和藥物相互作用研究方法和技術(shù)體系； （ 6）建立基于復(fù)合色譜 人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)相結(jié) 合的體內(nèi)外微量效應(yīng)物質(zhì)富集與檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)。 研究思路創(chuàng)新 （ 1）以古今信息數(shù)據(jù)挖掘?yàn)橹?，集成藥物安全性評(píng)價(jià)、毒理毒代、毒效物質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法，創(chuàng)建客觀表征中藥配伍禁忌量 毒 時(shí) 效關(guān)系的研究模式。 研究團(tuán)隊(duì)具有良好的硬軟件條件是實(shí)現(xiàn)預(yù)期目標(biāo)的有力支撐 項(xiàng)目承擔(dān)單位擁有國(guó)家級(jí)、省部級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、重點(diǎn)學(xué)科、創(chuàng)新工程中心等，具備良好條件和完備的儀器設(shè)施，保障項(xiàng)目的高質(zhì)量完成。所采用的研 究方法和技術(shù)具有相關(guān)研究積累，其方法和技術(shù)可行性強(qiáng)。 19課題一中藥 “ 十八反 ”宜忌條件與轉(zhuǎn)化研究中藥 “ 十八反 ” 配伍減效的基礎(chǔ)研究基于十八反的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘與知識(shí)發(fā)現(xiàn)研究“ 半蔞貝蘞及攻烏 ” 配伍關(guān)系與毒效表征課題二“ 藻戟遂芫俱戰(zhàn)草 ” 配伍關(guān)系與毒效表征課題四課題三” 諸參辛芍叛藜蘆 “ 配伍關(guān)系與毒效表征課題五課題六致毒增毒致毒增毒反藥配伍彼我交讎配伍減效配伍減效反藥配伍相反相制宜忌轉(zhuǎn)化宜忌轉(zhuǎn)化反藥配伍相激相成中藥 “ 十八反 ” 可行性分析 研究思路可行 在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，以海量古今信息數(shù)據(jù)挖掘?yàn)橹?，?現(xiàn)代研究方法 揭示 ―十八反 ‖毒效表征及其機(jī)理、妨害治療的減效機(jī)制與理論基礎(chǔ)，臨床宜忌條件及配伍關(guān)系，從而對(duì)科學(xué)假說(shuō)進(jìn)行驗(yàn)證 。 （ 二 ） 子課題設(shè)置思路 圍繞 ―十八反 ‖配伍關(guān)系研究的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題，在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，創(chuàng)建客觀適宜的研究模式：從古今中醫(yī)藥信息資源中挖掘 以 ―十八反 ‖為代表的中藥配伍禁忌的配伍關(guān)系特點(diǎn)和毒性反應(yīng)等科學(xué)內(nèi)涵；針對(duì)其致毒、增毒特點(diǎn)，集成毒理學(xué)、化學(xué)、藥效學(xué)、毒代動(dòng)力學(xué)、生物信息學(xué)等多學(xué)科方法，揭示 ―十八反 ‖烏頭組、甘草組、藜蘆組各反藥組合的毒效表征及其機(jī)理；從妨害治療的角度評(píng)價(jià) ―十八反 ‖組合影響藥效的特點(diǎn)，從反藥配伍組合及方劑配伍角度分析反藥配伍應(yīng)用的宜忌條件及配伍關(guān)系。 揭示 ―十八反 ‖配伍毒效表征及其機(jī)理； 闡明中醫(yī)臨床常用代表性反藥組合及其同方配伍妨害治療的效應(yīng)機(jī)制與理論基礎(chǔ) ；基于臨床從反藥組合及其方劑不同層面揭示宜忌條件及配伍關(guān)系。因此對(duì)―十八反 ‖反與不反的客觀界定、配伍禁忌的內(nèi)在規(guī)律，以及轉(zhuǎn) 化條件成為 ―十八反 ‖基礎(chǔ)研究的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題，并依此形成本項(xiàng)目的科學(xué)假說(shuō)。 三、研究方案 （一）學(xué)術(shù)思路 本項(xiàng)目組認(rèn)為：中藥 ―十八反 ‖是基于中醫(yī)臨床長(zhǎng)期實(shí)踐的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)形成的中藥配伍禁忌代表性內(nèi)核，反藥配伍其藥性與功效的相反是 ―十八反 ‖的核心內(nèi)容，表現(xiàn)出物質(zhì)的、效應(yīng)的選擇性臟腑歸屬特征和量 毒 時(shí) 效關(guān)系。為我國(guó)中藥配伍禁忌和藥物安全性研究提供示范，為臨床安全用藥提供指導(dǎo)，為制定我國(guó)中醫(yī)臨床用藥配伍禁忌指南和安全 用藥指導(dǎo)原則奠定基礎(chǔ)，豐富和發(fā)展中醫(yī)藥配伍理論，服務(wù)于經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展和人口健康需求做出應(yīng)有的貢獻(xiàn)。 項(xiàng)目名稱： 基于 “ 十八反 ” 的中藥配伍禁忌理論基礎(chǔ)研究 首席科學(xué)家： 段金廒 南京中醫(yī)藥大學(xué) 起止年限： 至 依托部門： 國(guó)家中醫(yī)藥管理局 江蘇省科技廳 二、預(yù)期目標(biāo) （一）總體目標(biāo) 依據(jù)中醫(yī)藥配伍理論，以 ―十八反 ‖為研究對(duì)象，圍繞科學(xué)假說(shuō)，創(chuàng)建基于藥物相互作用的 客觀表征中藥配伍禁忌量 毒 時(shí) 效關(guān)系的研究模式、方法和技術(shù)體系；回答反與不反、為什么反、怎么反的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題；闡明臨床應(yīng)用反藥配伍與妨害治療的效應(yīng)機(jī)制及其理論基礎(chǔ)；揭示含有反藥配伍組合的代表性方劑的宜忌條件和配伍關(guān)系；集成古今文獻(xiàn)與實(shí)驗(yàn)研究成果，豐富和發(fā)展中藥配伍禁忌理論體系。是課題2 臨床研究的實(shí)驗(yàn)深化，探討穴位協(xié)同作用和拮抗作用的生物學(xué)機(jī)制。在課題 2 臨床研究的基礎(chǔ)上，采用健康自愿者和相關(guān)內(nèi)臟疾病的模型，深 入研究針刺雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)的機(jī)制，是臨床研究的深化和充實(shí)。 課 題 3：針刺 對(duì)功能性腸病雙向調(diào)節(jié)的量 效關(guān)系研究 ， 與其他課題的關(guān)系及與總體目標(biāo)的關(guān)系 : 以往從未系統(tǒng)定量研究過(guò)穴位療效與相關(guān)藥物劑量之間的關(guān)系，該課題可以對(duì)針刺治療功能性腸病的臨床評(píng)價(jià)提供有價(jià)值的針刺量 藥物量的對(duì)應(yīng)值，是課題 2 臨床研究的升華。 課題 2： 針刺不同穴位對(duì)功能性腸病雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)規(guī)律的臨床研究與其他課題的關(guān)系及與總體目標(biāo)的關(guān)系 : 采用多中心隨機(jī)對(duì)照臨床研究方法，觀察不同穴位配伍方案治療功能性腸病相佐癥狀腹瀉、便秘的臨床療效。探討在病理情況下穴位的大小、生物學(xué)功能、位 臵 是否有 某些改變，回答穴位是什么的問(wèn)題；以明確病理情況下 “ 穴區(qū) ” 位 置 、穴位大小和效應(yīng)強(qiáng)弱以及穴區(qū)組織微理化環(huán)境的變化與相關(guān)機(jī)體病變的對(duì)應(yīng)關(guān)系。 共設(shè)計(jì) 6 個(gè)課題：課 題 1：功能性 腸病的穴位敏化規(guī)律和機(jī)制研究 ?與其他課題的關(guān)系及與總體目標(biāo)的關(guān)系 : 本課題著重解決穴位在腸道生理和病理情況下的穴位功能的變化和微理化環(huán)境的變化。實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)定性、定量分析功能；綜 合查詢與分析報(bào)表緊密結(jié)合、流程化數(shù)據(jù)提取和形象化表達(dá)等。 （ 24）研究穴位與腸道聯(lián)系的脊髓神經(jīng)與脊髓側(cè)角交感神經(jīng)聯(lián)系的神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)，有可能發(fā)現(xiàn)軀體骨骼肌運(yùn)動(dòng)與交感神經(jīng)調(diào)節(jié)內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)的體表運(yùn)動(dòng) 內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)反射，這在生命科學(xué)中是一種全新的軀體 內(nèi)臟聯(lián)系通路。由于引起體表 內(nèi)臟聯(lián)系 的神經(jīng)系統(tǒng)主要是通過(guò)細(xì)的傳入神經(jīng)發(fā)揮作用的，破壞 Trpv1 將可能影響 針刺 效應(yīng)的發(fā)揮。選用正常大鼠，觀察針刺不同穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)的基礎(chǔ)上，給予 M 受體激動(dòng)劑和拮抗劑，研究該類受體參與針刺雙向調(diào)節(jié)腸道運(yùn)動(dòng)的程度。 并與基因未改變的同類野生小鼠（ wild type）對(duì)照。研究不同穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用。 并與基因未改變的同類野生小鼠（ wild type）對(duì)照。研究不同穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用的機(jī)制。 （ 19） 采用激活不同組織感受器或傳入神經(jīng)纖維（分別刺激皮膚感受器、肌梭、腱器官、關(guān)節(jié)）的電針?lè)椒?刺激穴位，觀察對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的影響，闡明哪類組織感受器和神經(jīng)纖維介導(dǎo)了針刺的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)， 哪些裝置可能介導(dǎo)針刺的協(xié)同或拮抗作用， 則為針灸臨床選擇不同的針刺方法提供又一新的依據(jù)，有一定的臨床指導(dǎo)意義。在確定單個(gè)穴位作用的基礎(chǔ)上，研究?jī)蓚€(gè)以上穴位同時(shí)針刺的效應(yīng)，觀察協(xié)同穴位是否存在進(jìn)一步加強(qiáng)所固有的生物學(xué)效應(yīng)和飽和效應(yīng)。為臨床穴位配伍和穴位組方提供有價(jià)值的資料。 采用基因組學(xué)和蛋白組學(xué)技術(shù)，觀察功能性腸病結(jié)腸差異基因、差異蛋白表達(dá)，以及針刺不同穴位后的影響，分析針刺雙向調(diào)節(jié)的系統(tǒng)生物學(xué)機(jī)制。 （ 15） 以結(jié)腸 孤束核 迷走運(yùn)動(dòng)背核通路為中心，觀察調(diào)節(jié)結(jié)腸運(yùn)動(dòng)特異性的物質(zhì)（ Corticotropin releasing factor， CRF)在功能性腸病水平的變化、蛋白的表達(dá)以及針刺不 同穴位對(duì)其影響，分析針刺調(diào)節(jié)結(jié)腸活動(dòng)的分子生物學(xué)機(jī)制。在 T2 節(jié)段切斷脊髓后觀察電針效應(yīng)的變化 ，研究細(xì)的傳入纖維（ C纖維）與脊髓上中樞（如孤束核）調(diào)控的關(guān)系。觀察不同穴位刺激在調(diào)節(jié)腸道運(yùn)動(dòng)的同時(shí)研究對(duì)不同 自主 神經(jīng)系統(tǒng)種類活動(dòng)的影響，闡述哪類 自主 神經(jīng)與促進(jìn)腸道運(yùn)動(dòng)有關(guān)，哪類與抑制腸道運(yùn)動(dòng)有關(guān)。觀察不同取穴對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的調(diào)制強(qiáng)度與規(guī)律，探討不同穴位的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)的規(guī)律。各個(gè)穴位分別采用低于（約 ~ 倍閾值） RIII反射和等同 RIII 反 射的閾值電流作穴位電刺激（前者僅激活粗傳入纖維，為非傷害性的；后者能激活細(xì)的纖維，屬傷害性的），觀察對(duì)腸道感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)的影響。 （ 11）腸道力值變化和感覺(jué)尺度改變的研究：選擇健康志愿者，從感覺(jué)（傳入）和運(yùn)動(dòng)（傳出）兩方面評(píng)價(jià)在軀體各部位穴位刺激前后的腸道力值變化和感覺(jué)尺度的改變。為針刺臨床的效應(yīng)量化提供參考系數(shù)。 （ 10） 在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別研究針刺功能性單元穴位（天樞、大腸俞）對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的抑制作用，與不同劑量的阿托品抑制腸道運(yùn)動(dòng)的效應(yīng)作比較，量化針刺強(qiáng)度等同于多大的藥物劑量。 （ 8） 在功能性腹瀉 和便秘 患者觀察不同針刺強(qiáng)度電針（分別采用低于（約 倍閾值） RIII 反射和引起 RIII 反射的閾值電流作穴位電刺激；前者僅激活粗傳入纖維，后者能激活細(xì)的傳入纖維）刺激功能性單元穴位（天樞、大腸俞）治療效應(yīng)、效應(yīng)強(qiáng)度與藥物治療效應(yīng)強(qiáng)度的比較，量化針 刺所產(chǎn)生的臨床療效。 （ 6） 觀察探討相同的針刺方法刺激相同的穴位是否對(duì)腹瀉和便秘兩種不同機(jī)能狀態(tài)均可產(chǎn)生調(diào)節(jié)效應(yīng)（雙向調(diào)節(jié)），以闡明機(jī)體機(jī)能狀態(tài)在針刺雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)中的作用規(guī)律。以疾病癥狀的改善、腸電圖、大便的頻度、糞便的形狀、 腸道微生態(tài)的系統(tǒng)生物學(xué)、 直腸順應(yīng)性 檢測(cè)， 腦功能影像變化、 QoL、自主 神經(jīng)系統(tǒng)活動(dòng)為指標(biāo)，通過(guò)不同穴位及穴位配伍方法治療，系統(tǒng)評(píng)價(jià)其 臨床療效。 （ 5）研究導(dǎo)致穴位敏化和 采用不同的受體（ 緩激肽 ， P 物 質(zhì) , VR1, 辣椒素 , ACE 和 前列腺素 等）阻斷 劑 和激動(dòng)劑，基因敲除傷害感受器（ VR1 受體或辣椒素受體）后，探討 不同受體對(duì)穴位敏化現(xiàn)象的影響，研究與穴位敏化相關(guān)的受體機(jī)制。研究 穴位敏化 反應(yīng)與纖維直徑的關(guān)系，推論穴位激活相關(guān)的神經(jīng)類型。 （ 2）采用 直結(jié)腸擴(kuò)張 刺激 （ CRD， 20100mmHg， 分級(jí)的擴(kuò)張出現(xiàn)分級(jí)的疼痛 反應(yīng)），然后經(jīng)靜脈注射 Evans blue 引起體表皮膚蘭點(diǎn)滲出反應(yīng)的分布與相關(guān)穴位的關(guān)系。這是穴位存在的基礎(chǔ)。說(shuō)明臟腑有病可在體表一定部位出現(xiàn)病理反應(yīng)。 1． 功能性腸病相關(guān)穴位敏化現(xiàn)象的規(guī)律研究，為解決穴位的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)奠定科學(xué)基礎(chǔ)。闡明穴位功能和機(jī)體機(jī)能狀態(tài)的相關(guān)性的規(guī)律，揭示針灸雙向調(diào)節(jié)的規(guī) 律和機(jī)制，探討穴位配伍的機(jī)制及其生物學(xué)基礎(chǔ)，闡述對(duì)針灸學(xué)科發(fā)展具有普適性規(guī)律的雙向調(diào)節(jié)理論，指導(dǎo)臨床和進(jìn)一步提高療效。其意義在于揭示穴位功能和機(jī)體機(jī)能狀態(tài)的相關(guān)規(guī)律，為解決穴位的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)奠定科學(xué)基礎(chǔ)，明確穴位配伍的協(xié)同、拮抗關(guān)系和雙向調(diào)節(jié)規(guī)律，形成建立在科學(xué)基礎(chǔ)上的穴位組方原則，以指導(dǎo)臨床和提高臨床療效。調(diào)虛實(shí)、平陰陽(yáng)是針灸臨床治療的重要理論，反映的是針灸具有恢復(fù)機(jī)體穩(wěn)態(tài)的“雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)”，該效應(yīng)是在經(jīng)絡(luò)腧穴理論指導(dǎo)下，根據(jù)單穴及配穴的功能特性，通過(guò)穴位組合及刺激方法來(lái)實(shí)現(xiàn)的。擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題是：針灸調(diào)整和維持機(jī)體“穩(wěn)態(tài)系統(tǒng)”的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)的規(guī)律及其相關(guān)的生物學(xué)基礎(chǔ)。專著 1 部。 3． 研究證實(shí)針刺對(duì)機(jī)體的影響具有明確的雙向調(diào)節(jié)作用，即通過(guò)觸發(fā)機(jī)體自身固有的調(diào)節(jié)系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)其防病治病、增強(qiáng)免疫機(jī)能等作用，實(shí)現(xiàn)本項(xiàng)目的總體研究目標(biāo)。 預(yù)期目標(biāo)： 1． 提交臨床研究統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。 6． 結(jié)合國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究結(jié)果，系統(tǒng)整理，完成學(xué)術(shù)專著。 4． 研究針刺協(xié)同和拮抗作用與穴位不同的解剖學(xué)結(jié)構(gòu)的 相關(guān)性。結(jié)合以往研究探討穴位的生理和病理特性，揭示穴位反映病邪的診斷方面的特異性規(guī)律。 第五年 研究?jī)?nèi)容： 1． 臨床研究資料數(shù)據(jù)管理（匯總、錄入、審查等）以及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。 6. 發(fā)表研究論文 1820 篇， SCI 論文 3 篇。為穴位組學(xué)的建立提供科學(xué)數(shù)據(jù)。闡述這些物質(zhì)變化與胃腸運(yùn)動(dòng)之間的關(guān)系。 6. 開展 Trpv1 受體基因敲除對(duì)針刺雙向調(diào)節(jié)功 能影響、 Trpv1 受體激動(dòng)劑和拮抗劑對(duì)針刺雙向調(diào)節(jié)作用影響的研究工作。 4. 研究調(diào)節(jié)結(jié)腸運(yùn)動(dòng)特異性的物質(zhì)（ CRF)在功能性腸病的變化、蛋白的表達(dá)以及針刺不同穴位對(duì)其影響，分析針刺調(diào)節(jié)結(jié)腸活動(dòng)的