【正文】 第 四 年 完善數(shù)據(jù)存貯、展示、匯交、共享、分析、管理等功能為一體的管理平臺(tái)； 豐富中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫(kù)； 采用細(xì)胞、分子水平評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)反藥配伍組合致毒 /增毒 /減效的作用機(jī)理進(jìn)行研究； 中藥 ―十八反 ‖毒效化學(xué)成分群的分離制 備，豐富化學(xué)物質(zhì)庫(kù)； 采用分子生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、現(xiàn)代色譜分析和液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，建立各反藥配伍組合對(duì) P450 酶產(chǎn)生誘導(dǎo)或抑制的技術(shù)平臺(tái)； 基于藥代動(dòng)力學(xué)與藥物代謝酶研究代表性反藥配伍組合的妨害物質(zhì)相互作用； 研究不同病理狀態(tài)、給藥途徑、給藥次數(shù)、配伍比例、不同劑型等因素對(duì)生物效應(yīng)的影響。 第 二 年 基于文獻(xiàn)信息數(shù)據(jù)結(jié)合實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果， 進(jìn)行中藥 ―十八反 ‖配伍關(guān)系的數(shù)據(jù)挖掘研究；中藥 ―十八反 ‖在方劑中的應(yīng)用 特點(diǎn)與知識(shí)發(fā)現(xiàn)； 基于古今文獻(xiàn)信息和研究結(jié)果信息的集成和分析，初步創(chuàng)建我國(guó)中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫(kù)； 反藥配伍組 合致毒 /增毒特點(diǎn)及毒性程度研究； 中藥 ―十八反 ‖配伍前后毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究； 中藥 ―十八反 ‖各反藥配伍量 毒 時(shí) 效關(guān)系研究 中藥 ―十八反 ‖體內(nèi)過(guò)程研究； ―十八反 ‖代表性反藥配伍組合及方劑妨害治療的物質(zhì)基礎(chǔ)研究； 選擇含有反藥配伍的代表性方劑海藻玉壺湯，研究其宜忌條件與配伍關(guān)系。 研究目標(biāo) 基于 中藥 ―十八反 ‖臨床應(yīng)用 的 相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行收集整理，探討中藥 ―十八 反 ‖配伍 臨床應(yīng)用的宜忌條件及其規(guī)律， 本著循證醫(yī)學(xué)系統(tǒng)評(píng)價(jià)的 思想 ，對(duì)其療效和安全性進(jìn)行評(píng)價(jià) ； 在特定病理?xiàng)l件下，以傳統(tǒng)名方作為切入點(diǎn)， 以 ―十八反 ‖代表性反藥配伍組合及其方劑， 研究影響方中 生物效應(yīng)的因素， 揭示其基于臨床應(yīng)用的宜忌條件及規(guī)律特點(diǎn) ； 建立 基于 臨床應(yīng)用的中藥 ―十八反 ‖宜忌條件的研究平臺(tái)，為研究 反 藥 配伍組合 臨床應(yīng)用宜忌條件提供研究思路與方法 ； 從 多角度 豐富 中藥 ―十八反 ‖配伍禁忌理論，指導(dǎo)臨床合理、安全、有效地使用中藥 ―十 八反 ‖反藥 配伍 ； 培養(yǎng) 博士 研究生 46 名，碩士研究生 812 名，青年骨干教師 46 名 ； 在國(guó)內(nèi)外核心期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論文 1520 篇 。 （ 2）從文獻(xiàn)角度進(jìn)行 ―十八反 ‖配伍及其方劑的治療性臨床研究的療效和安全性 評(píng)價(jià) 。 在國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)核心期刊發(fā)表論文 15–20 篇，其中 SCI 收錄 5 篇以上； 培養(yǎng)博士后 12 名，博士研究生 35 名 ，碩士研究生 810 名。 “十八反 ”配伍妨害治療作用的藥效學(xué)評(píng)價(jià)研究 利用 客觀反映臨床實(shí)際的動(dòng)物模型及藥效指標(biāo)，觀察 ―十八反 ‖代表性 配伍 組合 及其含相反藥對(duì)對(duì)模型動(dòng)物藥效的干預(yù)影響，評(píng)估相反組對(duì) 和 方 劑 在病理生理?xiàng)l件下是否存在干擾或妨害組對(duì)內(nèi)藥物的某些藥效作用，探索其可能 影響因素。 承擔(dān)單位： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所 北京蛋白質(zhì)組研究中心 負(fù) 責(zé) 人： 王宇光 副研究員 科研骨干： 馬增春 副研究員 梁乾德 副研究員 郝運(yùn)偉 副研究員 孫愛(ài)華 副研究員 經(jīng)費(fèi)比例： 16% 課題五 基于妨害治療的中藥 “十八反 ”配伍基礎(chǔ)研究 主要研究?jī)?nèi)容 圍繞項(xiàng)目總體目標(biāo)，以中醫(yī)藥配伍理論為指導(dǎo)、歷代臨床用藥經(jīng)驗(yàn)為參考、前期研究 為 基礎(chǔ) ，從妨害治療的角度研究中藥 ―十八反 ‖配伍禁忌。 預(yù)期目標(biāo) 通過(guò)安全性評(píng)價(jià)體系的建 立與毒性評(píng)價(jià)，構(gòu)建基于 PXR～ CYP3A 通路的細(xì)胞篩選模型， 從動(dòng)物和細(xì)胞兩個(gè)層面建立 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖各單藥及與藜蘆配伍后毒性成分的毒效關(guān)系， 明確回答 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖配伍反與不反 ； 揭示 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖配伍組合致毒 /增毒物質(zhì)基礎(chǔ)。進(jìn)一步利用毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性發(fā)現(xiàn)技術(shù)等進(jìn)行毒性確認(rèn)，最終明確 相反配伍致毒 /增毒的物質(zhì)基礎(chǔ)。首先進(jìn)行―諸參辛芍叛藜蘆 ‖相關(guān)配伍毒性評(píng)價(jià)研究，明確 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖相反配伍的致毒 /增毒特點(diǎn)；明確 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖中主要藥材的化學(xué)組成，并考察相反配伍的體內(nèi)外化學(xué)成分變化，明確相反配伍致毒 /增毒的物質(zhì)基礎(chǔ)；在體、離體實(shí)驗(yàn)相結(jié)合考察相反配伍致毒 /增毒的物質(zhì)間的相互作用規(guī)律及其生物學(xué)基礎(chǔ)。在此基礎(chǔ)上，以計(jì)算機(jī)分子對(duì)接技術(shù)為先導(dǎo)，快速篩選反藥毒效物質(zhì)的生物學(xué)靶標(biāo)；并集成多種光譜 /色譜等技術(shù)開展小分子毒效物質(zhì)與關(guān)鍵靶標(biāo)間的相互作用研究；通過(guò)毒性靶標(biāo)群的生物信息學(xué)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建，揭示該組反藥配伍致毒增毒的分子網(wǎng)絡(luò)機(jī)制。 “藻戟遂芫 ”與甘草各配伍組合體內(nèi)過(guò)程及相互作用研究 以藥物體內(nèi)過(guò)程各環(huán)節(jié)為研究重點(diǎn)，探討甘草分別與海藻、大戟、芫花、甘遂配伍前后的吸收特點(diǎn)、分布規(guī)律、代謝轉(zhuǎn)化過(guò)程、毒性成分排泄及蓄積致毒特征。 ―藻戟遂芫 ‖與甘草配伍的毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究 利用極性分級(jí)溶出法、各種色譜方法，對(duì)單味藥及反藥配伍組合進(jìn)行化學(xué)物質(zhì)組分的系統(tǒng)分離，并對(duì)所得單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，建立化學(xué)物質(zhì)庫(kù)； 進(jìn)而對(duì)甘草系列相反藥物配伍前后的化學(xué)物質(zhì)變化進(jìn)行研究，比較配伍前后各成分含量、類型的改變，并與毒效作用進(jìn)行關(guān)聯(lián)，發(fā)現(xiàn)與相反配伍和毒效作用相關(guān)的化學(xué)成分及其含量；采用制備色譜、成分剔除等技術(shù)分離制備毒效相關(guān)成分，確定相反配伍物質(zhì)基礎(chǔ)；為全面考察相反配伍的成分變化，針對(duì)單味藥和相反配伍制成的湯劑 /散劑，分析其成分差異，研 究在不同環(huán)境下各藥物毒效物質(zhì)的溶出釋放規(guī)律。 研究目標(biāo) 完成 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖系統(tǒng)毒性評(píng)價(jià)研究，明確回答 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖配伍反與不反的問(wèn)題 ； 完成 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖相反配伍致毒 /增毒物質(zhì)基礎(chǔ)及機(jī)理研究，明確 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖配伍致毒 /增毒的化學(xué)實(shí)質(zhì)及生物學(xué)基礎(chǔ)； 完成 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖相反配伍致毒 /增毒物質(zhì)毒代動(dòng)力學(xué)及相互作用規(guī)律研究，通過(guò)量 毒 時(shí) 效關(guān)系與體內(nèi)過(guò)程變化研究，闡明 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖配伍致毒 /增毒物質(zhì)基礎(chǔ)相互作用規(guī)律； 培養(yǎng)碩士研究生 810 名，博士研究生 35 名；在國(guó)內(nèi)外期刊發(fā)表高質(zhì)量學(xué)術(shù)論文 2025 篇， SCI 收錄論文 10 篇以上；申請(qǐng)發(fā)明專利 1 項(xiàng)。 “半蔞貝蘞及攻烏 ”致毒 /增毒物質(zhì)相互作用規(guī)律研究 采用動(dòng)物整體 ADME、藥物吸收體外動(dòng)態(tài)仿生系統(tǒng)及藥物代謝酶等技術(shù)，在體、離體實(shí)驗(yàn)相結(jié)合，研究 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖配伍致毒 /增毒物質(zhì)毒代動(dòng)力學(xué)特征及吸收、代謝等相互作用規(guī)律。最終闡明中藥十八反 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖反與不反、如何反以及為什么反的科學(xué)內(nèi)涵。 建立項(xiàng)目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺(tái) 基于項(xiàng)目研究的數(shù)據(jù)特點(diǎn)，建立融數(shù)據(jù)存貯、展示、匯交、共享、分析、管理等功能為一體的數(shù)據(jù)管理平臺(tái)，形成多維、動(dòng)態(tài)、實(shí)時(shí)、在線的 EScience 項(xiàng)目研究模式，使各課題之間形成有機(jī)整體，并為整合文獻(xiàn)和實(shí)驗(yàn)信息，豐富中藥配伍禁忌理論提供支撐。 “十八反 ”中藥配伍關(guān)系的 數(shù)據(jù)挖掘研究 探索改進(jìn)更適用于方藥特征的挖掘方法，建立適宜于中藥配伍多屬性、多層次關(guān)系研究的數(shù)據(jù)挖掘模型，進(jìn)行挖掘算法和模型的適應(yīng)性評(píng)價(jià)。回顧五十年來(lái)的相關(guān)研究成果和研究經(jīng)驗(yàn)，為項(xiàng)目研究參考。 （ 2）通過(guò)對(duì) ―十八反 ‖三組反藥組合配伍關(guān)系的系統(tǒng)研究，客觀界定各反藥組合反與不反，明確配伍致毒 /增毒的化學(xué)實(shí)質(zhì)及生物學(xué)基礎(chǔ)，闡明反藥配伍的相互作用規(guī)律，揭示基于 ―十八反 ‖的中藥配伍禁忌科學(xué)內(nèi)涵，提煉形成 創(chuàng)新知識(shí)和豐富發(fā)展中藥配伍禁忌理論。 團(tuán)隊(duì)合理的知識(shí)結(jié)構(gòu)和相關(guān)積累是實(shí)現(xiàn)項(xiàng)目預(yù)期目標(biāo)的根本保證 項(xiàng)目組整合了我國(guó)在中藥 ―十八反 ‖相關(guān)領(lǐng)域具有深厚積累的學(xué)術(shù)團(tuán)隊(duì)，在相關(guān)研究積累中形成了集傳統(tǒng)中醫(yī)與臨床中藥，化學(xué)研究與毒效評(píng)價(jià)、信息科學(xué)與生物技術(shù)相結(jié)合、知識(shí)結(jié)構(gòu)合理是項(xiàng)目高質(zhì)量完成的根本保證。 圍繞項(xiàng)目總體目標(biāo)，緊扣擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題， 設(shè)立了環(huán)環(huán)相扣的 6 個(gè)研究課題，集成各課題組在中藥配伍禁忌領(lǐng)域的特色優(yōu)勢(shì)開展相關(guān)研究。 項(xiàng)目總體研究思路的特色在于：以海量古今信息數(shù)據(jù)挖掘?yàn)橹?，集成藥物安全性評(píng)價(jià)、毒理毒代、毒效物質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法， 創(chuàng)建客觀表征中藥配伍禁忌量 毒 時(shí) 效關(guān)系的研究模式。 （二）五年預(yù)期目標(biāo) 完成中藥 ―十八反 ‖烏頭組、甘草組、藜蘆組的系統(tǒng)毒性評(píng)價(jià)研究，明確回答各反藥組合反與不反的問(wèn)題； 完成烏頭組、甘草組、藜蘆組的各反藥配伍組合致毒 /增毒物質(zhì)基礎(chǔ)及機(jī)理研究，明確其配伍致毒 /增毒的化學(xué)實(shí)質(zhì)及生物學(xué)基礎(chǔ)； 完成烏頭組、甘草組、藜蘆組的各反藥配伍致毒 /增毒的多組分毒代動(dòng)力學(xué)及其體內(nèi)過(guò)程研究，闡明反藥配伍的相互作用規(guī)律； 確定中藥 ―十八反 ‖烏頭組、甘草組、藜蘆組各反藥配 伍組合的人體等效性毒效劑量范圍； 創(chuàng)建基于藥物相互作用的客觀表征中藥配伍禁忌量 毒 時(shí) 效關(guān)系的研究模式、方法和技術(shù)體系； 闡明中醫(yī)臨床常用代表性反藥組合及其同方配伍妨害治療的效應(yīng)機(jī)制與理論基礎(chǔ)； 揭示含反藥配伍組合及代表性方劑的宜忌條件和配伍關(guān)系； 完善中藥配伍禁忌理論，豐富和發(fā)展中藥配伍理論體系； 培養(yǎng)中藥配伍禁忌與藥物相互作用研究的學(xué)術(shù)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)；培養(yǎng) 博士后 79名， 博士研究生 2028 名 ， 碩士研究生 5060 名，； 國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)核心期刊發(fā)表論文 110130 篇，其中 SCI 收錄 2030 篇；申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明專利 35 項(xiàng)；出版相關(guān)專著 12 部。 課題 6：針刺對(duì)功能性腸病雙向調(diào)節(jié)與自主神經(jīng)功能的關(guān)系 ? 與其他課題的關(guān)系及與總體目標(biāo)的關(guān)系 : 在系統(tǒng)生物學(xué)理念指導(dǎo)下，采 用基因敲除動(dòng)物，敲除不同自主神經(jīng)系統(tǒng)受體，深入研究 針刺 不同穴位對(duì)腸道功能性紊亂變化的雙向調(diào)節(jié)機(jī)制與自主神經(jīng)功能的關(guān)系，是課題 5 的機(jī)制研究的進(jìn)一步深入。 課 題 4：針刺不同穴位對(duì)功能性腸病的雙向調(diào)節(jié)作用及機(jī)制 ? 與其他課題的關(guān)系及與總體目標(biāo)的關(guān)系。解決穴位和所謂的非穴位的概念問(wèn)題，旨在闡述穴位的固定定位、旁開 “ 非穴位 ” 的對(duì)照點(diǎn)能否作為 ― 假針刺 組 選擇的重要問(wèn)題，是本項(xiàng)目研究工作的基礎(chǔ)性工作。將采取健康人體、病人以及動(dòng)物多層次、多穴位、多指標(biāo)、系統(tǒng)研究的方法，觀察針刺治療功能性腹瀉和功能性便秘的雙向調(diào)節(jié)的治療效應(yīng)，揭示這種效應(yīng)的生物學(xué)基礎(chǔ)，歸納提升針灸學(xué)現(xiàn)代理論。選用正常大鼠，觀察針刺不同穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)的基礎(chǔ)上，采用特異性辣椒素受體阻斷、激動(dòng)劑，觀察該感受器參與針刺雙向調(diào)節(jié)作用的程度。 （ 22） 選用正常大鼠，觀察針刺不同穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)的基礎(chǔ)上，給予 β2 受體激動(dòng)劑和拮抗劑，研究該受體參與針刺雙向調(diào)節(jié)腸道運(yùn)動(dòng)的程度。 （ 21）選用副交感神經(jīng)毒蕈堿乙酰膽堿能 M2M3 受體特異性基因敲除的動(dòng)物模型（毒蕈堿乙酰膽堿能 M2M3 受體主要分布于消化道平滑肌上），該模型由于去除了副交感神經(jīng)對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)施加的興奮作用，從而表現(xiàn)腸道運(yùn)動(dòng)的抑制（可出現(xiàn)便秘癥狀）。 （ 20） 選用交感神經(jīng)腎上腺素能 β2 受體特異性基因敲除的動(dòng)物模型（交感神經(jīng)腎上腺素能 β2 受體主要分布于消化道平滑肌上），該模型由于去除了交感神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)施加的抑制作用，從而表現(xiàn)腸道運(yùn)動(dòng)的加強(qiáng)（可出現(xiàn)腹瀉癥狀）。 （ 18） 觀察不同穴位刺激在調(diào)節(jié)腸道運(yùn)動(dòng)的同時(shí)對(duì)自主神經(jīng)系統(tǒng)的效應(yīng)。 （ 16）在單純腹瀉 和便秘 的動(dòng)物模型，采用胃黏膜應(yīng)變片電極記錄腸道活動(dòng)，分析與腸消化、運(yùn)動(dòng)相關(guān)的生物活性物質(zhì)（如胃動(dòng)素、胃泌素等）的變化， 觀察不同穴位刺激對(duì)腸道 消化、運(yùn)動(dòng) 的影響和 對(duì) 排便功能的作用。 （ 13） 闡明哪類感受器和神經(jīng)纖維介導(dǎo)了針刺的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)，為臨床提供相應(yīng)的針刺參數(shù)。系統(tǒng)研究針刺不同穴位對(duì)腸道運(yùn)動(dòng)的影響。 3．針刺 雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)的生物學(xué)基礎(chǔ)研究 以不同功能性腸道疾病動(dòng)物模型系統(tǒng)研究 針刺 不同穴位對(duì)腸道功能的雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)，明確是否同一穴位對(duì)不同生理病理狀態(tài)下的腸 道 有雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)，或者是不同穴位才能表現(xiàn)出雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)。 （ 9） 分別在功能性腹瀉患者和便秘患者，觀察在針刺得氣與非得氣的情況下，應(yīng)用 MRI 觀察針刺得氣、治療效應(yīng)以及大腦皮層之間的內(nèi)在聯(lián)系。 依據(jù)針灸經(jīng)絡(luò)理論及臨床經(jīng)驗(yàn)， 按照針灸臨床選穴原則 ，設(shè)立 ： ① 俞募配穴（ 功能性 單元取穴）組：天樞、大腸俞（雙側(cè)）； ② 合治內(nèi)腑的 循經(jīng)遠(yuǎn)道配穴（ 功能性 集元取穴）組： 曲池 、上巨虛（雙側(cè)）； ③ 合募俞配穴（單元 +集元取穴）組：天樞、大腸俞、 曲池 、上巨虛（單側(cè)）； ④ 敏化 穴 治療組：選擇經(jīng)檢測(cè)具有 敏化現(xiàn)象 的 4 個(gè) 穴位進(jìn)行臨床觀察研究 ； ⑤ 標(biāo)準(zhǔn)藥物治療組。 （ 3） 采用腸道局部損傷或傷害性刺激引起神經(jīng)源性炎性反應(yīng)后經(jīng)尾靜脈注射 Evans 蘭引起皮膚蘭點(diǎn)滲出反應(yīng)點(diǎn)的分布與相關(guān)穴位的關(guān)系； （ 4） 用微電極記錄延髓全身會(huì)聚神經(jīng)元的活動(dòng)，用 von Frey 毛檢測(cè)體表各部位刺激對(duì)神經(jīng)元反應(yīng)的敏感度，然后用上述方法造成內(nèi)臟局部傷害性刺激；在此基礎(chǔ)上觀察神經(jīng)元對(duì) 穴位的 敏化 變化 。 因此， 本研究 擬采用臨床觀察和實(shí)驗(yàn)相結(jié)合研究腸道病變時(shí)體表反應(yīng)點(diǎn)及與常用治療腸道 疾 病