【正文】 伍關(guān)系 等內(nèi)容的比較分析，建立相關(guān)模型，提取特征性關(guān)聯(lián)關(guān)系，分析在不同方劑中的地位和作用，探討 ―十八反 ‖具體應(yīng)用的病證特點，以及針對不同病證，配伍的藥物種類、劑量、給藥方式，為 ―十八反 ‖中藥能否在臨床安全、合理應(yīng)用提供參考。 建立項目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺 基于項目研究的數(shù)據(jù)特點，建立融數(shù)據(jù)存貯、展示、匯交、共享、分析、管理等功能為一體的數(shù)據(jù)管理平臺，形成多維、動態(tài)、實時、在線的 EScience 項目研究模式，使各課題之間形成有機整體，并為整合文獻和實驗信息，豐富中藥配伍禁忌理論提供支撐。 預(yù)期目標 整合古 今文獻信息和實驗結(jié)果，創(chuàng)建我國中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫； 建立在線的項目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺； 建立適宜的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖據(jù)模型，揭示其配伍特征和毒效內(nèi)在關(guān)系； 通過知識發(fā)現(xiàn)和集成，闡釋基于 ―十八反 ‖的中藥配伍禁忌理論的科學(xué)內(nèi)涵，豐富發(fā)展中藥配伍理論 ； 培養(yǎng)碩士研究生 68 名、博士研究生 23 名；在國內(nèi)外期刊發(fā)表高質(zhì)量學(xué)術(shù)論文 1520 篇。 承擔(dān)單位： 南京中醫(yī)藥大學(xué) 負 責(zé) 人： 范欣生 研究員 科研骨干： 錢大瑋 研究員 尚爾鑫 助理研究員 郭建明 助理研究員 經(jīng)費比例： 8 % 課題二 “半蔞貝蘞及攻烏 ”配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究 主要研究內(nèi)容 圍繞 ―十八反 ‖中藥配伍禁忌理論研究的總體目標，針對 ―半蔞貝蘞及 ‖與烏頭反藥配伍組合的藥性與功效特點，開展 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究。參考臨床用藥習(xí)慣選擇半夏、瓜蔞、浙貝母、川貝母、白蘞、白及、川烏、附子為研究對象，首先進行 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖相關(guān)配伍毒性評價研究，明確 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖相反配伍的致毒 /增毒特點；明確 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖單味藥材的化學(xué)組成，并考察相反配伍的體內(nèi)外化學(xué)成分變化，明確相反配伍致毒 /增毒的物質(zhì)基 礎(chǔ)；在體、離體實驗相結(jié)合考察相反配伍致毒 /增毒的物質(zhì)間的相互作用規(guī)律及其生物學(xué)基礎(chǔ)。最終闡明中藥十八反 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖反與不反、如何反以及為什么反的科學(xué)內(nèi)涵。 “半蔞貝蘞及攻烏 ”毒性評價研究 采用經(jīng)典毒理學(xué)、毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性發(fā)現(xiàn)技術(shù)等相結(jié)合，進行 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖配伍毒性評價研究，確認已知毒性，發(fā)現(xiàn)潛在毒性。 “半蔞貝蘞及攻烏 ”致毒 /增毒物質(zhì)基礎(chǔ)研究 采用體外化學(xué)組與藥物代謝物組學(xué)等方法，研究 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖配伍致毒/增毒的化學(xué)實質(zhì)；明確藥物配伍在體外發(fā)生的化學(xué)成分變化，發(fā)現(xiàn)藥物進入 體內(nèi)后藥物發(fā)生的代謝物變化。進一步利用毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性發(fā)現(xiàn)技術(shù)等進行毒性確認，最終明確相反配伍致毒 /增毒的物質(zhì)基礎(chǔ)。 “半蔞貝蘞及攻烏 ”致毒 /增毒物質(zhì)相互作用規(guī)律研究 采用動物整體 ADME、藥物吸收體外動態(tài)仿生系統(tǒng)及藥物代謝酶等技術(shù)，在體、離體實驗相結(jié)合，研究 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖配伍致毒 /增毒物質(zhì)毒代動力學(xué)特征及吸收、代謝等相互作用規(guī)律。 “半蔞貝蘞及攻烏 ”配伍量 毒 時 效關(guān)系研究 基于多劑量、多指標優(yōu)化的實驗設(shè)計，考察半蔞貝蘞及與烏頭配伍，考察其配伍后毒效變化，以及是否產(chǎn)生其他毒性。計算 藥物配伍前后的中毒劑量、有效量和安全范圍，結(jié)合各毒效相關(guān)成分的含量變化，對其量 毒 效數(shù)據(jù)進行非線性模擬建模，考察和評價反藥配伍前后在體內(nèi)致毒物質(zhì)的代謝速率、累積規(guī)律和蓄積致毒的時空關(guān)系，揭示其量 毒 時 效關(guān)系及其變化規(guī)律。 “半蔞貝蘞及攻烏 ”致毒 /增毒物質(zhì)生物學(xué)機制研究 采用代謝組學(xué)及胚胎干細胞等技術(shù)，考察 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖相反配伍及其毒性成分引起的代謝組學(xué)變化，明確相反配伍致毒 /增毒的生物學(xué)機制。 研究目標 完成 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖系統(tǒng)毒性評價研究，明確回答 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖配伍反與不反的問題 ； 完成 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖相反配伍致毒 /增毒物質(zhì)基礎(chǔ)及機理研究，明確 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖配伍致毒 /增毒的化學(xué)實質(zhì)及生物學(xué)基礎(chǔ)； 完成 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖相反配伍致毒 /增毒物質(zhì)毒代動力學(xué)及相互作用規(guī)律研究，通過量 毒 時 效關(guān)系與體內(nèi)過程變化研究，闡明 ―半蔞貝蘞及攻烏 ‖配伍致毒 /增毒物質(zhì)基礎(chǔ)相互作用規(guī)律； 培養(yǎng)碩士研究生 810 名，博士研究生 35 名；在國內(nèi)外期刊發(fā)表高質(zhì)量學(xué)術(shù)論文 2025 篇， SCI 收錄論文 10 篇以上；申請發(fā)明專利 1 項。 承擔(dān) 位： 天津中醫(yī)藥大學(xué) 江西中醫(yī)學(xué)院 負 責(zé) 人 ：張艷 軍 教授 科研骨干 ： 楊世林 教授 何 新 教授 何曉暉 教授 經(jīng)費比例 ： 16% 課題三 “藻戟遂芫俱戰(zhàn)草 ”配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究 主要研究內(nèi)容 圍繞項目總體目標，針對 ―藻戟遂芫 ‖與甘草反藥配伍組合的各組藥物，開展中藥十八反 ―藻戟遂芫俱戰(zhàn)草 ‖的系統(tǒng)研究，揭示大戟、甘遂、芫花等峻下逐水類中藥與甘草配伍和海藻類中藥與甘草配伍組對反與不反？為什么反？以及致毒增毒特點及其機理；闡明中藥十八反 ―藻戟遂芫俱戰(zhàn)草 ‖的科學(xué)內(nèi)涵。 “藻戟遂芫 ”與甘草配伍毒性評價體系的建立及其配伍毒性評價研究 建立由經(jīng)典毒理學(xué)、系統(tǒng)毒理學(xué)、毒性快速篩查技術(shù)和安全藥理學(xué)方法組成的、適宜于中藥 ―十八反 ‖反藥配伍組合毒性研究的評價體系，依據(jù)《中華人民共和國藥典》所規(guī)定的劑量范圍，通過對 ―藻戟遂芫 ‖與甘草反藥配伍組合在整體、器官、細胞和分子水平進行系統(tǒng)地毒理學(xué)研究和安全性評價，揭示 ―藻戟遂芫 ‖與甘草配伍前后的毒性變化及其規(guī)律。圍繞本課題反藥組合可能的毒性特點以及毒性靶部位，采用體外腸管孵育、離體肝臟灌流，胃腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)、肝細胞培養(yǎng)、 P 糖蛋白、水通道蛋白、 P450 酶分子等評價模型，揭示 ―藻戟遂芫 ‖與甘草反藥配伍組合致 毒 /增毒特點。 ―藻戟遂芫 ‖與甘草配伍的毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究 利用極性分級溶出法、各種色譜方法，對單味藥及反藥配伍組合進行化學(xué)物質(zhì)組分的系統(tǒng)分離，并對所得單體化合物進行結(jié)構(gòu)鑒定，建立化學(xué)物質(zhì)庫； 進而對甘草系列相反藥物配伍前后的化學(xué)物質(zhì)變化進行研究，比較配伍前后各成分含量、類型的改變，并與毒效作用進行關(guān)聯(lián)，發(fā)現(xiàn)與相反配伍和毒效作用相關(guān)的化學(xué)成分及其含量；采用制備色譜、成分剔除等技術(shù)分離制備毒效相關(guān)成分，確定相反配伍物質(zhì)基礎(chǔ)；為全面考察相反配伍的成分變化，針對單味藥和相反配伍制成的湯劑 /散劑，分析其成分差異，研 究在不同環(huán)境下各藥物毒效物質(zhì)的溶出釋放規(guī)律。 “藻戟遂芫 ”與甘草配伍量 毒 時 效關(guān)系研究 基于多劑量、多指標優(yōu)化的實驗設(shè)計，考察峻下逐水藥物大戟、甘遂、芫花與甘草配伍，對胃腸道和肝腎器官的毒性作用及其瀉下、利尿和抗水腫的藥效作用；考察海藻與甘草配伍后藥效變化，以及是否產(chǎn)生其他毒性。計算藥物配伍前后的中毒劑量、有效量和安全范圍，結(jié)合各毒效相關(guān)成分的含量變化，對其量 毒 效數(shù)據(jù)進行非線性模擬建模，考察和評價反藥配伍前后在體內(nèi)致毒物質(zhì)的代謝速率、累積規(guī)律和蓄積致毒的時空關(guān)系，揭示其量 毒 時 效關(guān)系及其變化 規(guī)律。評價反藥配伍前后經(jīng)不同環(huán)節(jié)體外煎煮、體內(nèi)代謝過程、體內(nèi)靶器官等環(huán)節(jié)，毒性物質(zhì)體內(nèi)外的定性定量變化，分析其動態(tài)變化過程，闡明配伍 毒性物質(zhì)含量 毒性間的關(guān)系，定量表征其致毒增毒程度。 “藻戟遂芫 ”與甘草各配伍組合體內(nèi)過程及相互作用研究 以藥物體內(nèi)過程各環(huán)節(jié)為研究重點，探討甘草分別與海藻、大戟、芫花、甘遂配伍前后的吸收特點、分布規(guī)律、代謝轉(zhuǎn)化過程、毒性成分排泄及蓄積致毒特征。利用中藥多成分同步定量分析技術(shù)，探討反藥配伍中多成分配伍前后體內(nèi)動力學(xué)參數(shù)的差異，分析其配伍致毒增毒的原因及其相互作用；采用體內(nèi) 體外方法，研究反藥配伍后吸收轉(zhuǎn)運過程及其相互作用機理；利用常規(guī)組織分布研究方法結(jié)合微透析技術(shù)，分析毒性靶器官與非毒性靶器官中成分差別，與毒效評價研究相結(jié)合闡明甘草組反藥配伍毒效物質(zhì)基礎(chǔ)；通過整體、在體、離體等多個層次，研究反藥配伍組合體內(nèi)外代謝途徑，明確本組藥物配伍對代謝酶的影響及其相互作用機理；探討反藥配伍對藥物排泄相關(guān)蛋白的影響及其體內(nèi)排泄經(jīng)時變化過程及其相互作用機理。 “藻戟遂芫 ”與甘草各反藥配伍組合致毒 /增毒的分子機制研究 采用細胞、分子生物學(xué)技術(shù)，研究該組反藥配伍組合對腸上皮細胞、肝細胞功能損 傷和凋亡誘導(dǎo)的毒性作用。從炎性因子釋放、細胞線粒體損傷、胞內(nèi)離子平衡、氧化壓力和凋亡蛋白表達，多角度、多途徑分析該組反藥誘導(dǎo)細胞損傷的分子機制。在此基礎(chǔ)上，以計算機分子對接技術(shù)為先導(dǎo)，快速篩選反藥毒效物質(zhì)的生物學(xué)靶標；并集成多種光譜 /色譜等技術(shù)開展小分子毒效物質(zhì)與關(guān)鍵靶標間的相互作用研究；通過毒性靶標群的生物信息學(xué)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建，揭示該組反藥配伍致毒增毒的分子網(wǎng)絡(luò)機制。 研究目標 建立客觀、適宜、系統(tǒng)的毒性評價體系，以確切回答 ―藻戟遂芫 ‖與甘草配伍反與不反及其致毒 /增毒特點； 建立涵蓋 ―藻戟遂芫 ‖與甘草 配伍前后提取物、化學(xué)部位、化學(xué)成分的化學(xué)物質(zhì)庫，以有效支撐和評價研究其毒效物質(zhì)變化； 通過量 毒 時 效關(guān)系與體內(nèi)過程變化研究，揭示 ―藻戟遂芫 ‖與甘草配伍的相互作用機制； 通過系統(tǒng)的毒理學(xué)評價，確定人體等效性毒效劑量范圍，為指導(dǎo)臨床安全用藥提供科學(xué)依據(jù)； 通過本課題研究，為系統(tǒng)揭示 ―十八反 ‖中藥配伍禁忌的科學(xué)內(nèi)涵提供支撐，為豐富和發(fā)展中藥配伍禁忌理論提供科學(xué)依據(jù)； 在國內(nèi)外學(xué)術(shù)核心期刊 發(fā)表論文 30–40 篇，其中 SCI 收錄 10–15 篇；申請國家發(fā)明專利 1–2 項； 培養(yǎng)博士后 2–3 名，博士研究生 3–4 名，碩士研究生 8–10 名。培養(yǎng)高層次青年人才 2–4 名。 承擔(dān)單位 ：南京中醫(yī)藥大學(xué) 中國藥科大學(xué) 負 責(zé) 人 ： 段金廒 教授 科研骨干 ： 唐于平 研究員 劉曉東 教 授 徐 立 教授 郝海平 副教授 宿樹蘭 副研究員 阿基業(yè) 副教授 經(jīng)費比例 ： 28% 課題四 “諸參辛芍叛藜蘆 ” 配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究 主要研究內(nèi)容 本課題以十八反中的 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖為研究對象，圍繞中藥 ―十八反 ‖配伍理論的關(guān)鍵科學(xué)問題研究項目總體目標，針對 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖配伍組合的藥性與功效特點，開展 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究。首先進行―諸參辛芍叛藜蘆 ‖相關(guān)配伍毒性評價研究，明確 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖相反配伍的致毒 /增毒特點；明確 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖中主要藥材的化學(xué)組成，并考察相反配伍的體內(nèi)外化學(xué)成分變化，明確相反配伍致毒 /增毒的物質(zhì)基礎(chǔ)；在體、離體實驗相結(jié)合考察相反配伍致毒 /增毒的物質(zhì)間的相互作用規(guī)律及其生物學(xué)基礎(chǔ)。最終闡明中藥十八反 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖反與不反、如何反以及為什么反的科學(xué)內(nèi)涵。 “諸參辛芍 ”與藜蘆配伍的毒性評價研究 以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，參照《中藥、天然藥物急性毒性 研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，采用傳統(tǒng)毒理學(xué)、毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性發(fā)現(xiàn)技術(shù)等相結(jié)合，進行 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖配伍毒性評價研究，確認已知毒性，發(fā)現(xiàn)潛在毒性。 “諸參辛芍 ”與藜蘆配伍的致毒 /增毒物質(zhì)基礎(chǔ)研究 采用現(xiàn)代色譜技術(shù)特別是液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，建立 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖中各單藥與藜蘆相互配伍后毒性成分的指紋圖譜及量毒關(guān)系；研究 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖配伍致毒 /增毒的化學(xué)實質(zhì)；明確藥物配伍在體外發(fā)生的化學(xué)成分變化，發(fā)現(xiàn)藥物進入體內(nèi)后藥物發(fā)生的代謝物變化。進一步利用毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性發(fā)現(xiàn)技術(shù)等進行毒性確認，最終明確 相反配伍致毒 /增毒的物質(zhì)基礎(chǔ)。 “諸參辛芍 ”與藜蘆配伍的前后的量 毒 時 效關(guān)系研究 以藥物體內(nèi) ADME各環(huán)節(jié)為研究重點，以人參 藜蘆配伍組合作為研究范例，進行體內(nèi)過程研究，對人參 藜蘆配伍多成分的體內(nèi)過程進行同步定量分析，構(gòu)建體內(nèi)外物質(zhì)的關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)，系統(tǒng)研究人參 藜蘆配伍前后化學(xué)成分吸收特點，分布規(guī)律、代謝轉(zhuǎn)化、毒效物質(zhì)排泄及蓄積致毒等，探討人參 藜蘆配伍前后體內(nèi)動力學(xué)參數(shù)的差異，闡明其體內(nèi)作用物質(zhì)與毒性的關(guān)系。 “諸參辛芍 ”與藜蘆配伍的致毒 /增毒物質(zhì)生物學(xué)機制研究 采用分子生物學(xué)、蛋 白質(zhì)組學(xué)、現(xiàn)代色譜分析和液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，對藜蘆中典型毒性成分的代謝特征進行動態(tài)性觀察，找到受調(diào)控的 P450 酶及對藜蘆有毒中藥成分代謝影響及其與毒性效應(yīng)的機制；利用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)尋找并確定 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖中反藥組合相互作用后與藥物毒性成分發(fā)揮作用相關(guān)的肝臟代謝、信號通路及轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中蛋白質(zhì)組的動態(tài)變化過程，尋找配伍藥物毒效成分的體內(nèi)作用靶點及診斷標志物，從分子水平揭示藜蘆配伍致毒規(guī)律，進而系統(tǒng)揭示―諸參辛芍叛藜蘆 ‖配伍藥物相互作用可能機制。為臨床合理用藥提供理論依據(jù)。 預(yù)期目標 通過安全性評價體系的建 立與毒性評價，構(gòu)建基于 PXR～ CYP3A 通路的細胞篩選模型， 從動物和細胞兩個層面建立 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖各單藥及與藜蘆配伍后毒性成分的毒效關(guān)系， 明確回答 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖配伍反與不反 ； 揭示 ―諸參辛芍叛藜蘆 ‖配伍組合致毒 /增毒物質(zhì)基礎(chǔ)。通過 現(xiàn)代色譜