20xx年醫(yī)學(xué)專題—第五章菌落總數(shù)和大腸菌群的檢驗(yàn)(參考版)
2024-11-13 18:02本頁面
【正文】 ,。3h(08新增)。水產(chǎn)品采用30℃177。1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h177。6.2.1 瓊脂凝固后，將平板(p237。3.3 恒溫水浴箱：46℃177。1℃。3.1 恒溫培養(yǎng)箱：36℃177。ir243。,結(jié)果(jiē guǒ)報(bào)告,第五十五頁，共五十六頁。,第五十三頁，共五十六頁。,第五十一頁，共五十六頁。 A.7 1 mol/L HCl A.7.1 成分 HCl 90 mL 蒸餾水 1 000 mL A.7.2 制法 移取濃鹽酸(y225。,A.5 無菌生理鹽水 A.5.1 成分 氯化鈉 8.5 g 蒸餾水 1 000 mL A.5.2 制法 稱取8.5ｇ氯化鈉溶于1 000 mL蒸餾水中，121 ℃高壓滅菌15 min。i)，不得超過3 h。使用前臨時(shí)制備(zh236。0.1 A.3.2 制法 將上述成分溶于蒸餾水中，靜置幾分鐘，充分?jǐn)嚢?，調(diào)節(jié)pH。,A.3 結(jié)晶紫中性(zhōngx236。121 ℃高壓滅 菌15 min。oji233。nɡ)膽鹽（BGLB）肉湯,A.2.1 成分 蛋白胨 10.0 g 乳糖 10.0 g 牛膽粉（oxgall或oxbile）溶液 200 mL 0.1%煌綠水溶液 13.3 mL 蒸餾水 800 mL pH 7.2177。,第四十八頁，共五十六頁。分裝到有玻璃小倒管的試管中，每管10 mL。n) 胰蛋白胨或胰酪胨 20.0 g 氯化鈉 5.0 g 乳糖 5.0 g 磷酸氫二鉀（K2HPO4） 2.75 g 磷酸二氫鉀（KH2PO4） 2.75 g 月桂基硫酸鈉 0.1 g 蒸餾水 1 000 mL pH 6.8177。)基硫酸鹽胰蛋白胨（LST）肉湯,A.1.1 成分(ch233。,A.1 月桂(yu232。j236。,第四十六頁，共五十六頁。例：104 樣品稀釋液1 mL，在VRBA平板上有100個(gè)典型和可疑菌落，挑取其中(q237。,8.5 大腸菌群平板(p237。o)為大腸菌群陽性。凡BGLB 肉湯管產(chǎn)氣，即可報(bào)告(b224。)試驗(yàn),從VRBA 平板上挑取10 個(gè)不同類型的典型和可疑菌落，分別移種于BGLB 肉湯管內(nèi)，36 ℃177。,8.4 證實(shí)(zh232。 典型菌落為紫紅色，菌落周圍有紅色的膽鹽沉淀環(huán)，菌落直徑為0.5 mm 或更大。)數(shù)的選擇,選取菌落(jūnlu242。,第四十三頁，共五十六頁。翻轉(zhuǎn)平板，置于36 ℃177。)將15 mL～20 mL冷至46 ℃的結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）約傾注于每個(gè)平皿中。 8.2.2 及時(shí)(j237。 8.2 平板計(jì)數(shù) 8.2.1 選取2個(gè)～3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度, 每個(gè)稀釋度接種2個(gè)無菌平皿，每皿1 mL。,第四十二頁，共五十六頁。)B），報(bào)告每g（mL）樣品中大腸菌群的MPN值。ng)數(shù)（MPN）的報(bào)告,按6.3確證的大腸菌群LST陽性管數(shù)，檢索MPN表（見附錄(f249。,第四十頁，共五十六頁。2 h，觀察產(chǎn)氣情況。o)管中，36 ℃177。,6.3 復(fù)發(fā)酵(fā ji224。i),S1,S2,1mL,1mL,1mL,滅菌(mi232。)示意圖,,1mL,1mL,1mL,101,102,103,104,10mL,10mL,10mL,1mL,1mL,1mL,1mL,1mL,1mL,空白(k242。2 h),第三十八頁，共五十六頁。 2003版增加分離培養(yǎng):伊紅美藍(lán)瓊脂平板(36℃177。2 h，產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。nx237。2 h，觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生，24 h177。o)試驗(yàn),每個(gè)樣品，選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液（液體樣品可以選擇原液），每個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨（LST）肉湯/乳糖膽鹽發(fā)酵管，每管接種1mL（如接種量超過1 mL，則用雙料LST肉湯），36℃177。,第三十七頁，共五十六頁。每遞增稀釋1 次，換用1 支1 mL 無菌吸管或吸頭。 6.1.4 用1 mL 無菌吸管或微量移液器吸取1:10 樣品勻液1 mL，沿管壁緩緩注入9 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用1 支1 mL 無菌吸管反復(fù)吹打，使其混合均勻，制成1:100 的樣品勻液。,6.1.3 樣品(y224。 6.1.2 液體樣品：以無菌吸管吸取25 mL 樣品置盛有225 mL 磷酸鹽緩 沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶（瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠）中， 充分混勻，制成1:10 的樣品勻液。,6.1 樣品的稀釋(xīsh236。),4.1 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨（Lauryl Sulfate Tryptose，LST）肉湯 4.2 煌綠乳糖膽鹽（Brilliant Green Lactose Bile，BGLB）肉湯 4.3 結(jié)晶紫中性(zhōngx236。,4.培養(yǎng)基和試劑(sh236。 3.11 菌落計(jì)數(shù)器。 3.9 無菌培養(yǎng)皿：直徑90 mm。 3.7 無菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸頭。 3.5 均質(zhì)器。1 ℃。 3.2 冰箱(bīngxiāng)：2 ℃～5 ℃。i)和材料,3.1 恒溫培養(yǎng)箱：36 ℃177。,3.設(shè)備(sh232。)大腸菌群,GB 4789.32010,第三十二頁，共五十六頁。,二、 細(xì) 菌 學(xué) 檢 驗(yàn) 程序(ch23
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