食品中大腸菌群的檢驗(參考版)
2025-01-18 18:10本頁面
【正文】 以 BGLB產(chǎn)氣為陽性，查 MPN表，報告每 ml（ g）樣品中大腸菌群的 MPN值。 1℃ 培養(yǎng) 48177。2h，觀察是否產(chǎn)氣。 36177。例： 104樣品稀釋液 1 mL，在 VRBA平板上有 100個典型和可疑菌落，挑取其中 10個接種 BGLB肉湯管，證實有 6個陽性管，則該樣品的大腸菌群數(shù)為： 1006/10104/g（ mL） =105CFU/g（ mL）。凡 BGLB 肉湯管產(chǎn)氣，即可報告為大腸菌群陽性。5）證實試驗 從 VRBA 平板上挑取 10 個不同類型的典型和可疑菌落，分別移種于 BGLB 肉湯管內(nèi)， 36 ℃ 177。實驗步驟及操作要點：4）平板菌落數(shù)的選擇 選取菌落數(shù)在 15 CFU～ 150 CFU 之間的平板，分別計數(shù)平板上出現(xiàn)的典型和可疑大腸菌群菌落。翻轉(zhuǎn)平板，置于 36 ℃ 177。3）及時將 15 mL～ 20 mL冷至 46 ℃ 的結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（ VRBA）約傾注于每個平皿中。1）樣品的稀釋 ：如第一法2） 平板計數(shù) 選取 2個～ 3個適宜的連續(xù)稀釋度 , 每個稀釋度接種 2個無菌平皿，每皿 1 mL。6）大腸菌群最可能數(shù)（ MPN）的報告 按 5）確證的大腸菌群 LST陽性管數(shù)，檢索 MPN表（見附錄 B），報告每 g（ mL）樣品中大腸菌群的 MPN值。2 h，觀察產(chǎn)氣情況。5）復(fù)發(fā)酵試驗 用接種環(huán)從產(chǎn)氣的 LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物 1環(huán)，移種于煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB）管中， 36 ℃ 177。LST結(jié)果判斷l(xiāng) 大腸菌群的產(chǎn)氣量，多者可以使發(fā)酵倒管全部充滿氣體，少者可以產(chǎn)生比小米粒還小的氣泡。2 h，產(chǎn)氣者進行復(fù)發(fā)酵試驗。2 h，觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生， 24 h177。l 4）初發(fā)酵試驗 每個樣品，選擇 3個適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液（液體樣品可以選擇原液），每個稀釋度接種 3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨（ LST）肉湯，每管接種 1mL（如接種量超過 1 mL，則用雙料 LST肉湯）， 36℃ 177。 實驗步驟及操作要點：1）無菌取樣并制作梯度稀釋液；2）樣品勻液的 pH 值應(yīng)在 ～ 之間，必要時分別用 1 mol/L NaO
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