20xx年醫(yī)學(xué)專(zhuān)題—第五章菌落總數(shù)和大腸菌群的檢驗(yàn)-wenkub.com
2024-11-13 18:02 本頁(yè)面
【正文】 每遞增稀釋1 次，換用1 支1 mL 無(wú)菌吸管或吸頭,第五十六頁(yè)，共五十六頁(yè)。2h。1℃。1℃ 30℃177。,內(nèi)容(n232。,GB/T 4789.32003,第五十二頁(yè)，共五十六頁(yè)。 A.6 1 mol/L NaOH A.6.1 成分 NaOH 40.0 g 蒸餾水 1000 mL A.6.2 制法 稱(chēng)取40 g氫氧化鈉溶于1 000 mL蒸餾水中，121 ℃高壓滅菌15 min。b232。ng)紅膽鹽瓊脂（VRBA）,A.3.1 成分 蛋白胨 7.0 g 酵母膏 3.0 g 乳糖 10.0 g 氯化鈉 5.0 g 膽鹽或3號(hào)膽鹽 1.5 g 中性紅 0.03 g 結(jié)晶紫 0.002 g 瓊脂 15 g～18 g 蒸餾水 1 000 mL pH 7.4177。)pH至7.0～7.5），用蒸餾水稀釋到975 mL，調(diào)節(jié)pH，再加入0.1%煌綠水溶液13.3 mL， 用蒸餾水補(bǔ)足到1 000 mL，用棉花過(guò)濾后，分裝到有玻璃小倒管的試管中，每管10 mL。,A.2 煌綠乳糖(rǔ t225。0.2 A.1.2 制法 將上述成分溶解于蒸餾水中，調(diào)節(jié) pH。 ɡu236。,8.6 培養(yǎng)基和試劑(sh236。ngbǎn)計(jì)數(shù)的報(bào)告,經(jīng)最后證實(shí)為大腸菌群陽(yáng)性的試管比例乘以8.3中計(jì)數(shù)的平板菌落數(shù)，再乘以稀釋倍數(shù)，即為每g（mL）樣品中大腸菌群數(shù)。og224。ngsh237。)數(shù)在15 CFU～150 CFU 之間的平板，分別計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型和可疑大腸菌群菌落。1 ℃培養(yǎng)18 h～24 h。sh237。,8.1 樣品的稀釋 按6.1進(jìn)行。l249。產(chǎn)氣者，計(jì)為大腸菌群陽(yáng)性管。o)試驗(yàn),用接種環(huán)從產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物1環(huán)，移種于煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB）管/乳糖發(fā)酵(fā ji224。ngb225。1 ℃, 24 h177。ng)復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，如未產(chǎn)氣則繼續(xù)培養(yǎng)至48 h177。1 ℃培養(yǎng)24 h177。從制備樣品勻液至樣品接種完畢，全過(guò)程不得超過(guò)15 min。ngpǐn)勻液的pH 值應(yīng)在6.5～7.5 之間，必要時(shí)分別用1 mol/L NaOH 或1 mol/L HCl 調(diào)節(jié)。) 6.1.1 固體和半固體樣品：稱(chēng)取25 g 樣品,放入盛有225 mL 磷酸鹽緩 沖液或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)杯內(nèi), 8000 r/min～10000 r/min 均質(zhì)1 min～2 min,或放入盛有225 mL 磷酸 鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)袋 中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min～2 min，制成1:10 的樣品勻液。j236。 3.10 pH 計(jì)或pH 比色管或精密pH 試紙。 3.6 振蕩器。 3.3 恒溫水浴箱：46 ℃177。b232。ngx249。pǐn)微 生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì)數(shù),——修改了標(biāo)準(zhǔn)的中英文名稱(chēng)； ——“第二法大腸菌群平板計(jì)數(shù)法”的平板菌落數(shù)的選擇(xuǎnz233。)度各三管的乳糖發(fā)酵三步法”修改“兩步法”。威脅食品安全性的主要是腸道致病菌。guǒ)食品中檢出大腸菌群，表明該食品曾受到人或溫血?jiǎng)游锛S便污染。,第二十八頁(yè)，共五十六頁(yè)。,其中包括大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌和一些中間類(lèi)型的細(xì)菌，這群細(xì)菌能在含有膽鹽的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。,二、食品(sh237。 7.2.4 若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng)，則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。,7.2.1 菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)，按“四舍五入”方式修約，采用兩位有效數(shù)字報(bào)告。og224。,第二十三頁(yè)，共五十六頁(yè)。,第二十二頁(yè)，共五十六頁(yè)。,示例： 稀釋度 1:100（第一稀釋度） 1:1000（第二稀釋度） 菌落數(shù) 232，244 33，35 N= ∑C/(n1 +0.1n2)d＝(232+244+33+35)/(2+0.12) 102 =544/0.022=24727 上述(sh224。ish249。,平皿分4部分點(diǎn)數(shù)（見(jiàn)圖） 求同一稀釋度的平均(p237。xi224。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板平均數(shù)。)計(jì)數(shù),可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器，記錄相應(yīng)(xiāngyīng)的菌落數(shù)量和稀釋倍數(shù)。1℃培養(yǎng)72h177。ngbǎn)翻轉(zhuǎn)，36℃177。同時(shí)將平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1.0 mL空白稀釋液的無(wú)菌平皿內(nèi)作對(duì)照。同時(shí)分別取1mL稀釋液加入兩個(gè)無(wú)菌平皿作空白對(duì)照。ngpǐn)的稀釋,第十五頁(yè)，共五十六頁(yè)。d224。,細(xì) 菌 學(xué) 檢 驗(yàn) 程 序 細(xì)菌總數(shù)(zǒngsh249。0.2 4.2 磷酸鹽緩沖稀釋液，pH ＝7.2 4.3 無(wú)菌生理鹽水(shēnglǐy225。,第十二頁(yè)，共五十六頁(yè)。 3.11 放大鏡或/和菌落計(jì)數(shù)器或PetrifilmTM自動(dòng)判讀(p224。 3.5 均質(zhì)器 3.6 振蕩器 3.7 無(wú)菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及其吸頭。 3.2 冰箱：2℃～5℃。b232。 (——培養(yǎng)基由營(yíng)養(yǎng)瓊脂改為平板計(jì)數(shù)(j236。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的培養(yǎng)條件下所得結(jié)果，只包括一群(yī qng)，但本能單憑此一項(xiàng)指標(biāo)來(lái)判定食品的衛(wèi)生質(zhì)量，還必須配合大腸菌群和致病菌等檢驗(yàn)，才能作出比較全面、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。 注意：是
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