高中生物專題5第18課時血紅蛋白的提取和分離同步課時作業(yè)新人教版選修1(參考版)
2024-12-09 06:17本頁面
【正文】 一旦發(fā)生上述兩種情況，凝膠色譜柱需要重新裝填。一是在裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在，因為氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外，還可以進入凝膠顆粒的 微孔中，在向下移動的過程中，從一個凝膠內(nèi)擴散到顆粒間隙后再進入另一凝膠顆粒，如此不斷地進入和擴散，小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì)，從而落后于大分子物質(zhì)洗脫出來。 ] 9． (1)a a相對分子質(zhì)量大，無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快 (2)尼龍網(wǎng)和尼龍紗 (3)氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分 離效果 (4)凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍 凝膠得水值 解析 用凝膠色譜法分離各種大分子物質(zhì)時，大分子物質(zhì)先洗脫出來，然后是小分子 物質(zhì)。 ] 7． B [凝膠柱制作的一般流程是：選擇玻 璃管 → 選擇合適的橡皮塞 → 打孔 → 挖凹穴 →蓋尼龍網(wǎng) → 蓋尼龍紗 → 將橡皮塞插到玻璃管 → 接尼龍管 → 裝螺旋夾 → 柱頂插入安裝玻璃管的橡皮塞。 ] 5． D [電泳是指帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程，樣品分子的帶電性質(zhì)不同、分子的大小和形狀不同都會影響帶電粒子在電場中的遷移速度，與分子的變性溫度無關，故選 D 項。 ] 4． A [凝膠的種類較多，但每種凝膠內(nèi)部都有孔隙。 ] 3． B [血紅蛋白的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。 ] 達標測試 1． B [在一定 pH 作用下，生物大分子中有某些可解離的基團，這些基團會帶上正電荷或負電荷，在電場作用下，這些帶電分子會向著與其所 帶電荷相反的電極移動。根據(jù)紅色區(qū)帶的移動狀況判斷收集流出液的時間。一旦發(fā)生上述兩種情況，凝膠色譜柱需要重新裝填。因為氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。 4．凝膠色譜柱的裝填 在色譜柱中裝填凝膠的時候要盡量緊密，以降低凝膠顆粒之間的空隙。 3．色譜柱填料的處理 為了加速干凝膠的膨脹，可將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱，通常只需 1～ 2 h。 2．血紅蛋白的釋放 (1)蒸餾水的作用：使紅細胞的細胞膜和核膜破裂。 ] 規(guī)律鏈接 血紅蛋白提取與分離過程中的注意事項 1．紅細胞的洗滌 (1)離心速度與離心時間十分重要，離心轉(zhuǎn)速要低，時間要短，否則白細胞等會一同沉淀，達不到分離的效果。對于分子大小不同，但同屬于凝膠分離范圍內(nèi)的各種分子，在凝膠床中的分布情況是不同的，分子較大的只能進入孔徑較大的那一部分凝膠。三類分子彼此間較易分開。所以，蛋白質(zhì)可以按不同順序洗脫出來。 第 18 課時 血紅蛋白的提取和分離 知識清單 一、 相對分子質(zhì)量 蛋白質(zhì) 大于 外面 較快 小于 較慢 2． (1)酸 堿 pH (2)1～ 2 使用比例 在不同 pH 范圍內(nèi)使用 3． (1)帶電粒子 電場 遷移 多肽 核酸 正電 負電 與其所帶電荷相反 (2)帶電 大小 形狀 不同的遷移速度 (3)① 瓊脂糖凝膠 ② 聚丙烯酰胺凝膠 二、 1.(1)去除雜蛋白 (2)② 離心 ③ 血漿 ④ 洗滌 2．釋放 (1)蒸餾水 甲苯 (2)漲破 3． (1)① 離心管 離心 (2)血紅蛋白 4． (1)透析袋 三、 1.(1)玻璃管 (2)凹穴 橡皮塞 2． (2)溶脹 (3)固定 (4)裝填 (5)洗滌平衡 3． (1)平齊 (2)滴加 (4)緩沖液面 (5)洗脫 四、 ；低速、短時離心 2．沸水浴法不但節(jié)約時間，而且可以除去凝膠中可能帶有的微生物和氣泡 3．裝填盡量緊密，降低顆粒間隙；無氣泡；洗脫液不能斷流 4．紅色區(qū)帶均勻一致地移動 五、 —聚丙烯酰胺凝膠電泳 對點訓練 1． C [分子很大，完全不能進入凝膠內(nèi)的任何孔隙的蛋白質(zhì)洗脫出來的時間最短；分子大小適中，能進入凝膠內(nèi)孔隙中孔徑大小相應部 分的蛋白質(zhì)，洗脫出來的時間次之；分子很小 ，能進入分子篩全部孔隙內(nèi)的蛋白質(zhì)，洗脫出來的時間最長。 (8)然后通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經(jīng) SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。 (7)將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進行透析，即樣品的粗分離。 (5)分離紅細胞時的離心速度及離心時間分別是 __________________________________ __________________________________________。 (3)洗滌紅細胞的目的是 ___________________________________________________。 ① 加入檸檬酸鈉的目的是 ____________________________________________________。 10．紅細胞含有大量血紅蛋白，紅細胞的機能
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