高中生物同步課件：53血紅蛋白的提取和分離2人教版選修1(參考版)
2024-11-21 07:19本頁(yè)面
【正文】 A白細(xì)胞 B血小板 C紅細(xì)胞 D淋巴細(xì)胞 6．為防止血液凝固，在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)? ）。 A相同 B相反 C相對(duì) D相向 4. 哺乳動(dòng)物和人的成熟的紅細(xì)胞中的（ ）與氧氣的運(yùn)輸有關(guān)。 A分子的大小 B相對(duì)分子質(zhì)量的大小 C帶電荷的多少 D溶解度 2．緩沖液的作用是：在一定范圍內(nèi)，抵制外界的影響來(lái)維持（ ）基本不變。 ： 根據(jù)蛋白質(zhì) 各種特性 的差異，如 分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對(duì)其他分子的親和力 等等，可以用來(lái)分離 不同種類 的蛋白質(zhì)。 血紅蛋白 血紅蛋白 兩個(gè) α －肽鏈 兩個(gè) β 一肽鏈 四個(gè)亞鐵 血 紅素基團(tuán) 每個(gè)肽鏈環(huán)繞一個(gè)亞鐵血紅素基團(tuán)， 此基團(tuán)可攜帶一分子氧或一分子二 氧化碳，血紅蛋白因含有血紅素而 呈紅色。 你能觀察到蛋白質(zhì)的分離過(guò)程中紅色區(qū)帶的移動(dòng)嗎？請(qǐng)描述紅色區(qū)帶的移動(dòng)情況，并據(jù)此判斷分離效果？ 課題重點(diǎn)： 凝膠色譜法的原理和方法 課題難點(diǎn)： ①樣品的處理 ②色譜柱填料的處理和色譜柱的裝填。 如果色譜柱出現(xiàn)紋路或是氣泡，輕輕敲打柱體以消除氣泡，消除不了時(shí)要重新裝柱。此外，還可以加入大分子的有色物質(zhì)， 例如藍(lán)色葡聚糖 — 2020或紅色葡聚糖，觀察色帶移動(dòng)的情況。 此外，離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀，也得不到純凈的紅細(xì)胞，影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。 你能描述血紅蛋白分離的完整過(guò)程嗎？ （三） SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳（選做） ： 鑒定血紅蛋白純度。 血紅蛋白提取和分離的程序可分為四大步，包括： 樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定 。 在血紅蛋白純化的整個(gè)過(guò)程中不斷用磷酸緩沖液處理的目的是什么？ 與其他蛋白質(zhì)相比，血紅蛋白有什么特點(diǎn)？這一特點(diǎn)對(duì)你進(jìn)行血紅蛋白的分離有什么啟示？ 血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分離時(shí)可以通過(guò)觀察顏色來(lái)判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液。 使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)。 （ 3）樣品加入與洗脫 注意： 正確的加樣操作是： 不要觸及并破壞凝膠面。 貼壁加樣。 ⑤收集： 待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每 5ml收集一試管，連續(xù)收集 。 ③樣品滲入凝膠床： 加樣后打開(kāi)下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)，等樣品完全進(jìn)入凝膠層后，關(guān)閉下端出口。 （ 2）凝膠色譜柱的裝填 50cm高 （ 3）樣品加入與洗脫 ① 調(diào)節(jié)緩沖液面： 打開(kāi)下端出口，使柱內(nèi)緩沖液緩慢下降到與凝
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