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高中生物同步課件:53血紅蛋白的提取和分離6人教版選修1(參考版)

2024-11-21 07:19本頁面
  

【正文】 (在分離過程中,如果紅色區(qū)帶均勻一致的移動(dòng),說明色譜柱制作成功) 。 ④洗脫: 小心加入 pH= 的 20mmol/l的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度,連接緩沖液洗脫瓶,打開下端出口進(jìn)行洗脫。 ② 滴加透析樣品 : 吸管吸 1ml樣品加到色譜柱的頂端,滴加樣品時(shí),吸管管口貼著管壁環(huán)繞移動(dòng)加樣,同時(shí)注意不要破壞凝膠面。 不能發(fā)生洗脫液流干, 露出凝膠顆粒的現(xiàn)象 。 ④ 洗滌平衡: 裝填完畢后,立即用緩沖液洗脫瓶,在50cm高的操作壓下,用 300ml的 20mmol/l的 磷酸緩沖液( pH為 ) 充分洗滌平衡 12小時(shí) 。 注意: 凝膠裝填時(shí)盡量緊密,以降低凝膠顆粒之間的空隙。 ③ 凝膠色譜柱的裝填方法: A、固定: 將色譜柱裝置固定在支架上。 75表示凝膠的得水值,即每克凝膠膨脹時(shí)吸水 。 透析過程動(dòng)畫演示 分離純化血紅蛋白 凝膠色譜操作 : ( 1)凝膠色譜柱的制作: ( 2)凝膠色譜柱的裝填 ① 凝膠的選擇: A、材料: 交聯(lián)葡聚糖凝膠( G75)。 ②透析目的: 除去樣品中分子量較小的雜質(zhì) 。 ③分離: 用濾紙過濾,除去脂溶性沉淀層,于分液漏 斗中靜置片刻后,分出下層
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