20xx人教版高中生物選修一53血紅蛋白的提取和分離(參考版)
2024-12-13 14:55本頁面
【正文】 。因此，樣品中相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出，相對分子質(zhì)量中等的分子后流出，相對分子質(zhì)量最小的分子最后流出，這種現(xiàn)象又叫分子篩現(xiàn)象。教師可以發(fā)揮學(xué)生的主動性，讓學(xué)生介紹當(dāng)前有關(guān)蛋白質(zhì)研究的新進展，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，然后指出本課題的學(xué)習(xí)意義，讓薛生初步體會分離純化蛋白質(zhì)的過程和方法 九、【 資料袋】 凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理 凝膠色譜法也稱為分配色譜法，它是根據(jù)分子量的大小分離蛋白質(zhì)的方法之一。 A 中凝膠色譜操作及 SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳為實驗操作過程中的技術(shù) 答案： C ☆綜合應(yīng)用 例 3用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時，分子量大的蛋白質(zhì)（ ） 血 紅 蛋 白 的 取 和 分 離 凝膠色譜法 原 理 分離過程 凝膠電泳法 緩沖溶液 組 成 作 用 蛋白質(zhì)的 提取分離 樣品處理 粗 分 離 純 化 純度鑒定 血紅蛋白的提 取和 離蛋白質(zhì)分子的差異性 蛋白質(zhì)分子的差異性凝膠色譜法 原 理 分離過程凝膠電泳法凝膠色譜法 原 理 分離過程凝膠電泳法緩沖溶液 組 成 作 用緩沖溶液 組 成 作 用蛋白質(zhì)的提取分離樣品處理 粗 分 離純 化純度鑒定蛋白質(zhì)的提取分離樣 品處理 粗 分 離純 化純度鑒定 A路程較長，移動速度較慢 B路程較長，移動速度較快 C路程較短，移動速度較慢 D路程較短，移動速度較快 解析：在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，當(dāng)相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動速度較慢；而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快。相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)能進入凝膠內(nèi)部通道，路程較長，移動速 度較慢；相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)，路程較短，移動速度較快，首先洗脫出來。 （ 4）色譜柱成功標(biāo)志：紅色區(qū)帶均勻一致地移動。在整個操作過程中，應(yīng)當(dāng)注意以下事項： （ 1）紅細胞的洗滌： 洗滌次數(shù)不能過少；低速、短時離心。 步驟 操作要求 ① 操作要求 色譜柱垂直固 定在支架上 ② 計算稱量凝膠 根據(jù)色譜柱體積計算凝膠用量 ③ 配制懸浮液 凝膠顆粒＋蒸餾水→充分溶脹 凝膠顆粒＋洗脫液→沸水浴 ④ 裝填懸浮液 一次性緩慢倒入；輕輕敲打 ⑤ 緩沖液洗滌平衡 立刻用磷酸緩沖液洗滌平衡 12h 樣品加入和
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