高中生物同步課件：53血紅蛋白的提取和分離6人教版選修1-wenkub.com
2024-11-13 07:19 本頁面
【正文】 ⑤收集： 待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時，用試管收集流出液，每 5ml收集一試管，連續(xù)收集。 （ 2）凝膠色譜柱的裝填 50cm高 裝配好的凝膠柱 （ 3）樣品加入與洗脫 ① 調(diào)節(jié)緩沖液面： 打開下端出口，使柱內(nèi)緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊，關閉出口。 裝填凝膠柱時不得有氣泡存在： 因為氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果 。 ② 凝膠的前處理： 配置凝膠懸浮液： 計算并稱取一定量的凝膠浸泡于蒸餾水或洗脫液中充分溶脹后，配成凝膠懸浮液。 實驗操作 ② 原理：透析袋能使小分子自由進出，而大分子保留在袋內(nèi)。 ②試管中溶液層次： 第 1層（最上層）：甲苯層（ 無色 透明 ）；第 2層（中上層）：脂溶性物質(zhì)沉淀層（ 白 色薄層固體 ）；第 3層（中下層）：血紅蛋白的水溶 液層（ 紅色透明液體 ）；第 4層（最下層）：雜質(zhì)沉 淀層（ 暗紅色 ）。鹽水洗滌：用五倍體積的質(zhì)量分數(shù)為 ％的氯化鈉 溶液洗滌。 (1)紅細胞的洗滌 : ① 洗滌目的 : 去除雜蛋白，以利于后續(xù)血紅蛋白的 分離純化。 凝膠電泳法 電泳 帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的
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