血紅蛋白的提取和分離-wenkub.com
2024-11-19 04:11 本頁面
【正文】 因此，樣品中相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出，相對分子質(zhì)量中等的分子后流出，相對分子質(zhì)量最小的分子最后流出，這種現(xiàn)象又叫分子篩現(xiàn)象。A中凝膠色譜操作及SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳為實驗操作過程中的技術(shù)答案：C☆綜合應用例3用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時，分子量大的蛋白質(zhì)（ ）A路程較長，移動速度較慢 B路程較長，移動速度較快C路程較短，移動速度較慢 D路程較短，移動速度較快解析：在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，當相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動速度較慢；而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快。（4）色譜柱成功標志：紅色區(qū)帶均勻一致地移動。步驟操作要求①操作要求色譜柱垂直固定在支架上②計算稱量凝膠根據(jù)色譜柱體積計算凝膠用量③配制懸浮液凝膠顆粒＋蒸餾水→充分溶脹凝膠顆粒＋洗脫液→沸水?、苎b填懸浮液一次性緩慢倒入；輕輕敲打⑤緩沖液洗滌平衡立刻用磷酸緩沖液洗滌平衡12h樣品加入和洗脫。根據(jù)教材圖5－19，說出制作色譜柱需要的材料?？偨Y(jié)：通過以上四個基本過程，紅細胞中的血紅蛋白就被提取出來。半透膜的選擇透過性，大分子物質(zhì)不能通過半透膜，離子和小分子能夠通過半透膜。加入甲苯的目的是溶解細胞膜，有利于血紅蛋白的釋放和分離。洗滌紅細胞的目的是什么？除去血漿蛋白的雜蛋白，有利于后續(xù)步驟的分離純化。并思考回答下列問題：血液由 和 兩部分組成。因為蛋白質(zhì)的來源和性質(zhì)不同，分離方法差別很大。［思考］閱讀教材后，填寫下表：決定運動方向形成庫侖力形成阻力決定運動速率電荷性質(zhì)√電荷量√√分子形狀√√分子大小√√（2）分離方法：瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺經(jīng)膠電泳等。（3）分離過程：（圖5－13b）混合物上柱→洗脫→大分子流動快、小分子流動慢→收集大分子→收集小分子＊洗脫：從色譜柱上端不斷注入緩沖液，促使蛋白質(zhì)分子的差速流動。所以需要從細胞中提取蛋白質(zhì)進行研究。怎樣提取蛋白質(zhì)呢？（二）進行新課1．基礎(chǔ)知識蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì)：形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別，由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。1．2緩沖溶液（1）原理：由弱酸和相應的強堿弱酸鹽組成（如H2CO3－NaHCO3，HC－NaC，
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