血紅蛋白的提取和分離-wenkub.com
2025-05-23 18:25 本頁面
【正文】 A白細(xì)胞 B血小板 C紅細(xì)胞 D淋巴細(xì)胞 6．為防止血液凝固，在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)? ）。 A分子的大小 B相對分子質(zhì)量的大小 C帶電荷的多少 D溶解度 2．緩沖液的作用是：在一定范圍內(nèi)，抵制外界的影響來維持（ ）基本不變。如果色帶均勻、狹窄、平整，說明凝膠色譜柱的性能良好。 為什么？ 返回 觀察你處理的血液樣品離心后 是否分層 （見教科書圖 518）， 如果分層不明顯，可能是洗滌次數(shù)少、未能除去血漿蛋白的原因。 使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)。 貼壁加樣。 ③樣品滲入凝膠床： 加樣后打開下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)，等樣品完全進(jìn)入凝膠層后，關(guān)閉下端出口。 注意： 洗脫液面不要低于凝膠表面，否則可能有氣泡混入，影響液體在柱內(nèi)的流動(dòng)與最終生物大分子物質(zhì)的分離效果。 B、裝填：將凝膠懸浮液一次性的裝填入色譜柱內(nèi)，裝填時(shí)輕輕敲動(dòng)色譜柱，使凝膠填裝均勻。 B、代表意義 ： “ G” 表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍 。 ③頂塞的制作： 打孔 → 安裝玻璃管 。 ③分離： 用濾紙過濾，除去脂溶性沉淀層，于分液漏斗中靜置片刻后，分出下層的紅色透明液體。 ④充分?jǐn)嚢璧哪康氖?____________________________。 2. 血細(xì)胞中 ________細(xì)胞數(shù)量最多，紅細(xì)胞的含量最高的有機(jī)化合物是 _____________。要加入檸檬酸鈉防止血液凝固；離心將血液分層，用膠頭吸管吸出黃色血漿；用生理鹽水洗滌。 （ 2）粗分離：透析除去分子較小的雜質(zhì)。 （二）、緩沖溶液 1 、什么是電泳？ 影響電泳遷移速度的因素有哪些？ 學(xué)生活動(dòng) 4: 電泳分離各種分子的原理是什么？ （三）、電泳 如何消除電荷對電泳遷移速度的影響？ 5 、請描述電泳的過程？ 2．凝膠電泳法： （ 1）原理： 不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、形狀和大小不同，在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運(yùn)動(dòng)方向和運(yùn)動(dòng)速度不同。 (一 )凝膠色譜法 什么是凝膠？ 什么是凝膠色譜法？ 學(xué)生活動(dòng) 2: 凝膠色譜法的原理是什么？ 請用自己的話總結(jié)出凝膠色譜法分離相對分子質(zhì)量不同蛋白質(zhì)的具體過程。 一、基礎(chǔ)知識(shí) : 學(xué)生活動(dòng) 1: 1 、分離生物大分子的基本思路是什么？ 2 、不同蛋白質(zhì)的特性在哪些方面存在差異？ 3 、本課題我們將利用血紅蛋白與雜質(zhì)蛋白哪方面的差異進(jìn)行提純？ 4 、為什么不用雞的血紅細(xì)胞而用人的血紅細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料？ 5 、用什么方法分離相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì) ？ 一、基礎(chǔ)知識(shí) 蛋白質(zhì)提取和分離原理 蛋白質(zhì)提取與分離的依據(jù)－－蛋白質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)： 形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別。 提取分離方法 凝膠色譜法 凝膠電泳法 （ 1）原理：
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