sds-page測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量ppt-powe(參考版)
2025-02-18 19:49本頁面
【正文】 思考題 ? 1． SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳與聚丙烯酰胺凝膠電泳原理上有何不同？ ? 2. 用 SDS凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)分子量時為什么要用巰基乙醇？ ? 3．用 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)的分子量，為什么有時和凝膠層析法所得結(jié)果有所不同？是否所有的蛋白質(zhì)都能用SDS凝膠電泳法測定其分子量？為什么？ 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH 。因此，對于這一類蛋白質(zhì)， SDS凝膠電泳測定的只是它們的亞基或單條肽鏈的分子量，而不是完整分子的分子量。因此，最好至少用兩種方法來測定未知樣品的分子量，互相驗證。包括：電荷異?；驑?gòu)象異常的蛋白質(zhì)，帶有較大輔基的蛋白質(zhì)（如某些糖蛋白）以及一些結(jié)構(gòu)蛋白如膠原蛋白等。 計算 ? mR =樣品遷移距離（ cm） /染料遷移距離（ cm） ? 作圖，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)待測樣品相對遷移率，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其分子量。拔掉固定板，取出玻璃板，用刀片輕輕將一塊玻璃撬開移去，在膠板一端切除一角作為標(biāo)記，將膠板移至大培養(yǎng)皿中染色。待樣品進(jìn)入分離較時，將電流調(diào)至 20－ 30 mA。用微量注射器小心將樣品通過緩沖液加到凝膠凹形樣品槽底部，待所有凹形樣品槽內(nèi)都加了樣品，即可開始電泳。 一般加樣體積為 10－ 15μL（即 2－ 10μg蛋白質(zhì)）。 ? 4．樣品處理及加樣
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