sds聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)的分子量(參考版)
2025-05-15 23:29本頁面
【正文】 ? 蛋白質(zhì)分子量的求算：以樣品蛋白質(zhì)遷移率比照標準蛋白質(zhì)的遷移率計算樣品的分子量 。 一天換 2～ 3次脫色液 ， 直至凝膠的藍色背景褪清 、 蛋白質(zhì)色帶清晰為止 。 有兩種染色液可供選擇 。 實驗步驟 ? 染色 ： 棄去固定液 ， 加入染色液 。將膠置于培養(yǎng)皿內(nèi)，放入固定液（或 10%W/V三氯乙酸），沒過凝膠板。 ? 剝膠和固定：電泳結(jié)束后，取下凝膠膜，卸下凝膠膜上的橡膠框，用鑷子將短板玻璃撬開后取出凝膠板。對于垂直板型電泳，一般樣品進膠前電流控制在 15～ 20mA，大約 15～ 20分鐘；樣品進膠后，將電流調(diào)到 40～ 50mA,保持電流強度不變。未知蛋白質(zhì)的相同條件下進行電泳，根據(jù)它的電泳遷移率即可在標準曲線上求得分子量。 在條件一定時 ， b和 K均為常數(shù) 。 當?shù)鞍踪|(zhì)的分子量在 15,000～ 200,000之間時 ， 電泳
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