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正文內(nèi)容

sds聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量-文庫(kù)吧在線文庫(kù)

  

【正文】 度梯度)的凝膠上進(jìn)行分離。mR+K MW為蛋白質(zhì)分子量 , mR為相對(duì)遷移率 , b為斜率 , k為截距 。在溴酚藍(lán)區(qū)帶的中心作好標(biāo)志(插入細(xì)金屬絲),用水慢慢沖洗一下膠面。 脫色時(shí)間一般約需一晝夜 ( 注意:與上述兩種染色液相對(duì)應(yīng) , 也有兩種脫色液 ) 。 染色 4小時(shí)以上或過(guò)夜 。 實(shí)驗(yàn)步驟 ? 凝膠的制備 ? 蛋白質(zhì)樣品的處理 ? 加樣: 用微量注射器依次在各個(gè)樣品槽內(nèi)加樣,各加 10~ 15μ l(含蛋白質(zhì) 10~ 15μ g),稀溶液可加 20~ 30μ l 實(shí)驗(yàn)步驟 ? 電泳 : 上槽接負(fù)極,下槽接正極,打開(kāi)直流電源。這樣的蛋白質(zhì) SDS復(fù)合物在凝膠中的遷移率,不再受蛋白質(zhì)原有電荷和形狀的影響,而只是橢圓棒的長(zhǎng)度,也就是蛋白質(zhì)分子量的函數(shù)。因電泳后,樣品不同組分形成帶狀區(qū)間,故稱區(qū)帶電泳。 實(shí)驗(yàn)
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