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sds聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量-wenkub.com

2025-05-07 23:29 本頁(yè)面
   

【正文】 脫色時(shí)間一般約需一晝夜 ( 注意:與上述兩種染色液相對(duì)應(yīng) , 也有兩種脫色液 ) 。 染色 4小時(shí)以上或過(guò)夜 。在溴酚藍(lán)區(qū)帶的中心作好標(biāo)志(插入細(xì)金屬絲),用水慢慢沖洗一下膠面。 實(shí)驗(yàn)步驟 ? 凝膠的制備 ? 蛋白質(zhì)樣品的處理 ? 加樣: 用微量注射器依次在各個(gè)樣品槽內(nèi)加樣,各加 10~ 15μ l(含蛋白質(zhì) 10~ 15μ g),稀溶液可加 20~ 30μ l 實(shí)驗(yàn)步驟 ? 電泳 : 上槽接負(fù)極,下槽接正極,打開(kāi)直流電源。mR+K MW為蛋白質(zhì)分子量 , mR為相對(duì)遷移率 , b為斜率 , k為截距 。這樣的蛋白質(zhì) SDS復(fù)合物在凝膠中的遷移率,不再受蛋白質(zhì)原有電荷和形狀的影響,而只是橢圓棒的長(zhǎng)度,也就是蛋白質(zhì)分子量的函數(shù)。由于濃縮膠的堆積(濃縮)作用,可使樣品(即使是稀釋樣品)在濃縮膠和分離膠的界面上先濃縮成
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