sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量(參考版)
2025-05-10 18:13本頁(yè)面
【正文】 蛋白質(zhì)樣品距分離膠頂端遷移距離 (cm) 溴酚藍(lán)區(qū)帶中心距分離膠頂端距離 (cm) 思考題 ? 在不連續(xù)體系 SDSPAGE中 ， 當(dāng)分離膠加完后 ， 需在其上加一層水 ， 為什么 ? ? 電極緩沖液中甘氨酸的作用 ? ? 在不連續(xù)體系 SDSPAGE中 ， 分離膠與濃縮膠中均含有 TEMED和 AP， 試述其作用 ? ? 樣品液為何在加樣前需在沸水中加熱幾分鐘 ? 。 脫色： 染色完畢 ， 倒出染色液 ， 加入脫色液 ，置于搖床上脫色 ， 數(shù)小時(shí)更換一次脫色液 ，直至背景清晰 ， 拍照 。 九 、 染色和脫色 小心將膠取出 ， 放入一大培養(yǎng)皿中 。 加樣 樣品遷移方向 八 、 電泳 上槽接負(fù)極 ， 下槽接正極 ， 打開(kāi)直流電源 ， 剛開(kāi)始時(shí) ， 電壓控制在不高于 100V，樣品進(jìn)入分離膠后 ， 電壓控制在不高于140V。 七 、 加樣 加入電極緩沖液 ， 小心拔出梳齒 ，用微量注射器向凝膠梳孔內(nèi)加樣 。 四、濃縮膠的配制（ 5%） 試劑 體積 H2O （ ml） 凝膠貯備液 （ ml） 分離膠緩沖液 () （ ml） 10% SDS （ ml） T
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