sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量(更新版)
【正文】 凝膠腔的長(zhǎng)玻璃板的內(nèi)面緩緩注入 ， 留出梳齒的齒高加 1cm的空間以便灌注濃縮膠 ， 然后加滿蒸餾水 。 九 、 染色和脫色 小心將膠取出 ， 放入一大培養(yǎng)皿中 。 脫色： 染色完畢 ， 倒出染色液 ， 加入脫色液 ，置于搖床上脫色 ， 數(shù)小時(shí)更換一次脫色液 ，直至背景清晰 ， 拍照 。 四、濃縮膠的配制（ 5%） 試劑 體積 H2O （ ml） 凝膠貯備液 （ ml） 分離膠緩沖液 () （ ml） 10% SDS （ ml） TEMED 5（ ul） 10%過(guò)硫酸銨 25（ ul） 總體積 （ ml） 五 、 濃縮膠的灌注和聚合 用移液管將所配制的濃縮膠緩沖液沿著凝膠腔的長(zhǎng)玻璃板的內(nèi)面緩緩注入 ， 將梳子插入膠液頂部 ， 放置室溫下待其聚合 。 在條件一定時(shí) ， b 和 K均為常數(shù) 。 ? 運(yùn)用 SDSPAGE測(cè)定蛋白質(zhì)分子量及染色鑒定 。 在蛋白質(zhì)混合樣品中各蛋白質(zhì)組分的分子大小和形狀以及所帶電荷多少等因素所造成的電泳遷移率有差別。 標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子量 未知蛋白 在一定的凝膠濃度下，多肽鏈分子量的對(duì)數(shù)與多肽鏈的相對(duì)遷移率成線性關(guān)系，所以可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線求未知多肽鏈分子量 。同時(shí)加入Marke
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