【正文】 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)原理：利用沉淀法分離蛋白質(zhì)▲利用電泳法鑒定其組分▲利用考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白質(zhì)濃度▲二、實(shí)驗(yàn)步驟：自行設(shè)計(jì)教學(xué)過程中師生活動設(shè)計(jì) 實(shí)驗(yàn)完畢后各小組結(jié)果比較提綱、板書設(shè)計(jì)每個(gè)小組寫出簡要實(shí)驗(yàn)方案作業(yè) 比較各組實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分析自己的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)缺點(diǎn)主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 讓學(xué)生了解不同分離測定方法； 考察學(xué)生設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)和操作能力 。教學(xué)過程中師生活動設(shè)計(jì) DNA的種類及組成成分提綱、板書設(shè)計(jì)原理及簡要操作步驟作業(yè)本實(shí)驗(yàn)中為何用高氯酸溶液？主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 實(shí)驗(yàn)原理要讓學(xué)生知道每一步的作用和方法； 鑒定的過程要與RNA鑒定做對比《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 16 次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 卵清蛋白分離及濃度測定實(shí)驗(yàn)性質(zhì)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求能自行設(shè)計(jì)卵清蛋白分離及組分鑒定方法能較準(zhǔn)確測得蛋白質(zhì)濃度教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn)：分離鑒定方法，濃度測定方法難點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)材料試劑：考馬斯亮藍(lán)溶液、卵清、乙醇、漂洗液。 c)二苯胺水浴鑒定▲：兩只試管中各加1ml二苯胺試劑，在沸水浴中加熱10min，觀察顏色變化。b)設(shè)置對照組：另外一試管中加1ml 2 mol/L的Nacl溶液作為對照。 打開研磨桿上蓋，用移液器取研磨液 2ml，轉(zhuǎn)至試管中，緩慢沿試管閉加入4ml冰無水乙醇，輕輕轉(zhuǎn)試管，可看到白色絮狀物出現(xiàn)，即提取出的纏繞在一起的DNA。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)原理★：，DNA含量豐富，并且材料無色，便于鑒定；，釋放出DNA；，而細(xì)胞中某些物質(zhì)溶于酒精，可以用酒精提取含雜質(zhì)較少的DNA；，和二苯胺試劑沸水浴條件下作用呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺可作為鑒定DNA的試劑。掌握根據(jù)物質(zhì)性質(zhì)設(shè)計(jì)分離方法教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn)：離心機(jī)的使用及DNA分離難點(diǎn)：DNA的組分和鑒定方法實(shí)驗(yàn)材料試劑：新鮮菜花、95%乙醇、丙酮、5%高氯酸溶液、10%氯化鈉溶液、石英砂。注意事項(xiàng)：離心一定要平衡對稱放入離心機(jī)中，離心機(jī)達(dá)到設(shè)置轉(zhuǎn)速時(shí)才能離開?！?，（大約4滴），混勻，用試管夾夾好后放到沸水浴中5~10min，注意觀察溶液是否變成綠色，說明核糖的存在。，各離心管加入3mL 3mol/L硫酸，混勻，將水解液在沸水浴中加熱至少10min（使沉淀RNA充分水解）。，混勻。二、實(shí)驗(yàn)步驟： 用托盤天平稱2~3g干酵母于研缽中，加入20ml ，懸浮在沸水浴30min，冷卻。在酵母的堿性提取液上清中加入酸性乙醇溶液使解聚的核糖核酸沉淀，利用離心技術(shù)收集RNA粗提物。RNA溶于堿性溶液，加熱可使蛋白質(zhì)變性，將蛋白質(zhì)和核酸分離，同時(shí)RNA解聚。菌體容易收集，RNA也易分離。水分適宜時(shí)可復(fù)活?！「蓛粼嚬芤恢?， 硫酸氫鉀，用試管夾夾住并先在小火上略微加熱，使卵磷脂和硫酸氫鉀混熔，然后再集中加熱，待有水蒸氣放出時(shí)，嗅有何氣味產(chǎn)生。取干凈試管一支，加入10滴上述濾液，再加入1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液，振搖試管，觀察有何現(xiàn)象產(chǎn)生?！「稍镌嚬芤恢?，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氫氧化鈉溶液，放入水浴中加熱15min，在管口放一片紅色石蕊試紙，觀察顏色有無變化，并嗅其氣味。如濾液仍然混濁，可重新過濾直至完全透明。這樣通過對分解產(chǎn)物的檢驗(yàn)可以對卵磷脂進(jìn)行鑒定▲。卵磷脂被堿水解后可分解為脂肪酸鹽、甘油、膽堿和磷酸鹽。卵磷脂和腦磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性質(zhì)可將其與中性脂肪分離開；此外，卵磷脂能溶于乙醇而腦磷脂不溶，利用此性質(zhì)又可將卵磷脂和腦磷脂分離。，鞏固對卵磷脂組成結(jié)構(gòu)的認(rèn)識。教學(xué)過程中師生活動設(shè)計(jì) 牛奶中蛋白質(zhì)成份，牛奶的營養(yǎng)提綱、板書設(shè)計(jì)原理及簡要操作步驟作業(yè)設(shè)計(jì)另一種方法提取蛋白的方法。離心分離8min（8000r/min）或15min（2000r/min），棄去上清液，得到酪蛋白粗制品；（洗滌時(shí)將沉淀顆粒用干凈吸管吹開或用毛細(xì)管的封閉一端攪開，充分洗滌），離心5min（12000r/min）或10min（3000r/min），棄去上清液；%的乙醇，攪拌片刻；，烘干，得酪蛋白精制品；（g）。觀察牛奶開始有絮狀沉淀出現(xiàn)后，保溫一定時(shí)間使沉淀完全。用乙醇洗滌沉淀物，除去脂質(zhì)雜質(zhì)后便可得到純的酪蛋白。酪蛋白是含磷蛋白質(zhì)的混合物，~，不溶于水、醇、有機(jī)溶劑。教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn)：從牛奶中制取酪蛋白的原理難點(diǎn)：加乙醇和水的目的實(shí)驗(yàn)材料鮮牛奶、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、抽濾裝置。三、結(jié)果計(jì)算▲： 血清膽固醇含量（mg/mL）=A2/A1**2式中： A1為標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度；A2為樣品液的吸光度 mmol/L教學(xué)過程中師生活動設(shè)計(jì)思考人體內(nèi)膽固醇的生理作用及正常含量提綱、板書設(shè)計(jì)原理及簡要操作步驟作業(yè) 主要參考資料[1]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》，王金亭，方俊主編，華中科技大學(xué)出版社，2010總結(jié)分析重點(diǎn)講解血清膽固醇的測定原理；再次復(fù)習(xí)分光光度計(jì)使用要熟練《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 12次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 牛奶中提取酪蛋白實(shí)驗(yàn)性質(zhì)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求。二、實(shí)驗(yàn)步驟：（1）， mL，搖勻，10 min后離心（3000r/min 5 min），取上清備用。血清經(jīng)無水乙醇處理后，蛋白質(zhì)沉淀出來，膽固醇則溶于其中。教學(xué)過程中師生活動設(shè)計(jì) VC作用及缺乏癥提綱、板書設(shè)計(jì)原理及簡要操作步驟作業(yè) 本實(shí)驗(yàn)中為何用草酸稀釋VC，而不用純水？主要參考資料[1]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》，王金亭，方俊主編，華中科技大學(xué)出版社，2010總結(jié)分析滴定前要提醒檢查滴定管的氣密性，裝溶液后還要排氣泡，微量滴定管需正確使用；結(jié)果計(jì)算較復(fù)雜，幫助推導(dǎo)和理解《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 11次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 血清膽固醇的測定實(shí)驗(yàn)性質(zhì)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求教學(xué)重 點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn)：血清中膽固醇測定的原理難點(diǎn)：膽固醇測定方法實(shí)驗(yàn)材料儀器：離心機(jī)、離心管、試管、刻度吸量管、722型分光光度計(jì)。2．標(biāo)準(zhǔn)VC的滴定 吸取標(biāo)準(zhǔn)VC（），加9mL 1℅草酸混勻，用裝有2，6二氯酚靛酚的微量滴定管滴定至淡紅色（保持5s不褪去）為終點(diǎn)，記下所用體積V標(biāo)3．樣品VC的滴定 從1中取10mL，放入錐形瓶，用2，6二氯酚靛酚滴定，方法同上，作兩次平行實(shí)驗(yàn)。因此，從滴定時(shí)2，6一二氯酚靛酚標(biāo)準(zhǔn)液的消耗量，可以計(jì)算出被檢物質(zhì)中Vc的含量。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)原理★：氧化型2，6二氯酚靛酚在酸性溶液中呈粉紅色，在中性或堿性溶液中呈藍(lán)色，還原型2，6二氯酚靛酚無色。二、實(shí)驗(yàn)步驟：試劑測定管（1）測定對照管（2）標(biāo)準(zhǔn)管（3）標(biāo)準(zhǔn)對照管（4）ALT底物（mL）37度保溫5min（預(yù)熱，可略）血清（mL）丙酮酸標(biāo)液（200ug/ml)磷酸buffer（mL）混勻，37度保溫30min2,4二硝基苯肼（mL）混勻，37度保溫20minALT底物（mL）（mL）▲以dH2O為空白對照測四管的A值▲公式：教學(xué)過程中師生活動設(shè)計(jì) 什么是酶的比活力？提綱、板書設(shè)計(jì)原理及簡要操作步驟作業(yè) 混浴各管后，為何要在10min后，30min內(nèi)測其吸光值？主要參考資料[1] 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，何幼鸞、湯文浩，華師出版社，2013[2]《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》，董曉燕主編，化學(xué)工業(yè)出版社，2010總結(jié)分析 原理講解要結(jié)合血清ALT活性測定在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用； 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中加樣和操作過程需規(guī)范，否則數(shù)據(jù)差距較大； 幫助學(xué)生推導(dǎo)酶活性的計(jì)算公式《醫(yī)學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教案 第 10次課 2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 維生素C含量測定實(shí)驗(yàn)性質(zhì)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn) 教學(xué)目的和要求學(xué)習(xí)測定VC含量的原理和方法掌握微量滴定管使用方法教學(xué)重