植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(參考版)
2024-08-12 19:43本頁(yè)面
【正文】 。6) 工作中不能面向操作區(qū)講話或咳嗽，以免唾沫把細(xì)菌或支原體帶入工作臺(tái)面發(fā)生污染。同樣，培養(yǎng)液在未用前，不要過(guò)早開瓶；用過(guò)之后如不再重復(fù)使用，應(yīng)立即封閉瓶口直立可增加落菌機(jī)會(huì)。3) 為拿取方便，工作臺(tái)面上的用品要有合理的布局，原則上應(yīng)是右手使用的東西放置在右側(cè)，左手用品在左側(cè)，酒精燈置于中央。5. 無(wú)菌操作培養(yǎng)時(shí)：1) 進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不必太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。3. 接種用的酒精燈，火焰不要調(diào)得太高，接種時(shí)應(yīng)靠近酒精燈火焰操作，接種的速度要快。每瓶放置外植體的數(shù)量，應(yīng)該根據(jù)培養(yǎng)瓶瓶的大小來(lái)確定，一般放置胡蘿卜46塊。但要注意大燒杯底的外表面不能沾水，否則加熱時(shí)燒杯容易炸裂，使溶液外溢，造成燙傷。4) 溶化瓊脂需要注意的是，在加熱瓊脂、制備培養(yǎng)基的過(guò)程中，操作者千萬(wàn)不能離開，否則沸騰的瓊脂外溢，就需要重新稱量、制備。3. 接種及培養(yǎng)（同無(wú)菌苗的建立）4. 剔除長(zhǎng)菌嚴(yán)重的培養(yǎng)瓶，其余繼續(xù)培養(yǎng)5. 觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)結(jié)果：組別材料染菌率枯死率存活率長(zhǎng)芽率二波斯菊第三周有染菌%%100%75%酒精15s升汞：15min番茄100%第一周（2016/5/20）材料波斯菊結(jié)果有部分死亡，未死亡的均已生芽，長(zhǎng)勢(shì)好該培養(yǎng)基適宜用于誘導(dǎo)波斯菊生芽材料番茄結(jié)果無(wú)生芽趨勢(shì)，但是可能要長(zhǎng)愈傷組織該培養(yǎng)基濃度不適宜誘導(dǎo)番茄生芽第二周(2016/5/27)材料波斯菊結(jié)果莖段生芽長(zhǎng)勢(shì)良好，開始形成愈傷組織材料番茄結(jié)果番茄長(zhǎng)勢(shì)較波斯菊緩慢，第二周生芽（腋芽較多），也形成愈傷組織第三周（2016/6/3）材料波斯菊結(jié)果部分長(zhǎng)勢(shì)良好，愈傷組織和芽軍生長(zhǎng)旺盛；波斯菊部分死亡，部分開始長(zhǎng)菌，多數(shù)為真菌：可能是植物本身含有的菌，培養(yǎng)一段時(shí)間后開始生長(zhǎng)；培養(yǎng)瓶蓋子上部的通氣孔有破損培養(yǎng)室內(nèi)不干凈材料番茄結(jié)果番茄是無(wú)菌苗，未出現(xiàn)染菌情況。3. 接種及培養(yǎng)（同無(wú)菌苗的建立）一瓶接種2~3個(gè)莖段，直接插入培養(yǎng)基中，形態(tài)學(xué)上端朝上；4. 剔除長(zhǎng)菌嚴(yán)重的培養(yǎng)瓶，其余繼續(xù)培養(yǎng)5. 觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)結(jié)果：組別材料染菌率枯死率存活率二菊花莖（1）0100%075%酒精15s升汞：15min月季莖（2）100%（2）月季花（2）第一周50%（1）第二周100%（2）女貞莖（4）0100%（1長(zhǎng)愈傷組織、3無(wú)變化）香樟（1）100%（有愈傷）杜鵑（1）100%波斯菊莖（1）100%（略長(zhǎng)根，第二周長(zhǎng)菌）第一周(206/4/29)材料月季花月季莖結(jié)果綻開，無(wú)根花苞長(zhǎng)真菌，無(wú)根長(zhǎng)真菌，無(wú)根葉稍長(zhǎng)，無(wú)根，未染菌材料菊花莖香樟結(jié)果褐化，無(wú)根無(wú)根有白色菌點(diǎn)？or愈傷組織？材料杜鵑波斯菊莖結(jié)果無(wú)根，幾乎無(wú)變化長(zhǎng)勢(shì)旺盛，略微生根材料女貞莖結(jié)果無(wú)變化，無(wú)根第二周(2016/5/6)其余材料均無(wú)明顯變化材料月季花波斯菊結(jié)果開始枯萎，無(wú)根波斯菊開始長(zhǎng)菌，黃色細(xì)菌，菌落光滑稍長(zhǎng)根，但不明顯綜合對(duì)比不同濃度NAA對(duì)波斯菊生根的影響(2016/5/6)NAA濃度 低 —————————— 高實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：較高濃度NAA誘導(dǎo)長(zhǎng)根效果更好。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：所有馬齒莧無(wú)菌苗均染菌（未拍照）實(shí)驗(yàn)分析：①馬齒莧種子消毒、滅菌時(shí)間不足②接種室和培養(yǎng)實(shí)滅菌不徹底，環(huán)境較臟③實(shí)驗(yàn)操作不正確④超凈工作臺(tái)不干凈(五) 愈傷組織誘導(dǎo)(2016/3/25)1. 培養(yǎng)基的配制（方法同（二）培養(yǎng)基的配制與滅菌）愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基組別6BANNA貯備液Ⅰ貯備液Ⅱ貯備液Ⅲ貯備液Ⅳ蔗糖瓊脂一%%25mL5mL5mL5mL15g
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