植物組織培養(yǎng)步驟(參考版)
2025-07-07 22:32本頁面
【正文】 11 。在管理過程中不要澆水過多，過多的水應(yīng)迅速瀝除，以利根系呼吸。 ?。?）保持基質(zhì)適當(dāng)?shù)耐庑浴．?dāng)小植株有了新的生長時，逐漸加強(qiáng)光照，后期可直接利用自然光照。溫度過高會使水分蒸發(fā)，從而使水分平衡受到破壞，并會促使菌類滋生。 試管苗移栽以后要保持一定的溫光條件，適宜的生根溫度是1820℃，冬春季地溫較低時，可用電熱線來加溫。%的尿素，或用1/2MS大量元素的水溶液作追肥，可加快苗的生長與成活。可以適當(dāng)使用一定濃度的殺菌劑以便有效的保護(hù)幼苗，如多菌靈、托布津，濃度8001000倍，噴藥宜710天一次。由于試管苗原來的環(huán)境是無菌的，移出來以后難以保持完全無菌，因此，應(yīng)盡量不使菌類大量滋生，以利成活。約15天以后揭去拱棚的薄膜，并給予水分控制，逐漸減少澆水，促進(jìn)小苗長得粗壯。保持小苗水分供需平衡首先營養(yǎng)缽的培養(yǎng)基質(zhì)要澆透水，所放置的床面也要澆濕，然后搭設(shè)小拱棚，以減少水分的餓蒸發(fā)，并且初期要常噴霧處理，保持拱棚薄膜上有水珠出現(xiàn)。 ?。?）保持小苗的水分供需平衡。再將苗移入高濕度的環(huán)境中。移植時用一個筷子粗的竹簽在基質(zhì)中插一小孔，然后將小苗插入，注意幼苗較嫩，防止弄傷，栽后把苗周圍基質(zhì)壓實(shí)，栽前基質(zhì)要澆透水。 移栽和幼苗的管理 從試管中取出發(fā)根的小苗，用自來水洗掉根部粘著的培養(yǎng)基，要全部除去，以防殘留培養(yǎng)基滋生雜菌。前者占地大，耗用大量基質(zhì)，但幼苗不用移栽，后者需要二次移苗，但省空間、省基質(zhì)。摻有腐殖土的栽培基質(zhì)有助于植株發(fā)根。一種是自然形成，一種是人為造成，人工制造時可將秋季的落葉收集起來，然后埋入坑中，灌水保濕的條件下使其風(fēng)化，然后過篩即可獲得。 ?。?）草炭土 草炭土是由沉積在沼澤中的植物殘骸經(jīng)過長時間的腐爛所形成，其保水性好，蓄肥能力強(qiáng)，呈中性或微酸性反應(yīng)，但通常不能單獨(dú)用來栽種試管苗，宜與河砂等種類相互混合配成盆土而加以使用。細(xì)砂即通常所說的面砂。 ?。?）河砂 河砂分為粗砂、細(xì)砂兩種類型。要根據(jù)不同植物的栽培習(xí)性來進(jìn)行配制，這樣才能獲得滿意的栽培效果。這些介質(zhì)在使用前應(yīng)高壓滅菌。配時需按比例搭配，一般用珍珠巖、蛭石、草炭土或腐殖土比例為1：1：。 移栽用基質(zhì)和容器 適合于栽種試管苗的基質(zhì)要具備透氣性、保濕性和一定的肥力，容易滅菌處理，并不利于雜菌滋生的特點(diǎn)，一般可選用珍珠巖、蛭石、砂子等。 另外，對栽培馴化基質(zhì)要進(jìn)行滅菌是因為試管苗在無菌的環(huán)境中生長，對外界細(xì)菌、真菌的抵御能力極差。由此可知，試管苗更適合于高濕的環(huán)境生長，當(dāng)將它們移栽到試管外環(huán)境時，試管苗失水率會很高，非常容易死亡。所以必須通過煉苗，例如通過控水、減肥、增光、降溫等措施，使她們逐漸地適應(yīng)外界環(huán)境，從而使生理、形態(tài)、組織上發(fā)生相應(yīng)的變化，使之更適合于自然環(huán)境，只有這樣才能保證試管苗順利移栽成功。為了做好試管苗的移栽，應(yīng)該選擇合適的基質(zhì)，并配合以相應(yīng)的管理措施，才能確保整個組織培養(yǎng)工作的順利完成。但光線過強(qiáng)刺激蒸騰加強(qiáng)，會使水分平衡的矛盾更尖銳。春季低溫時苗床可加設(shè)電熱線，使基質(zhì)溫度略高于氣溫23℃，這不但有利于生根和促進(jìn)根系發(fā)達(dá)，而且有利于提前成活。而且還牽涉到菌類易滋生的問題。如菊花，以1820℃為宜。 試管內(nèi)生根壯苗的階段，為了成功地將移植到試管外的環(huán)境中，以使試管苗適應(yīng)外界的環(huán)境條件。 從胚狀體發(fā)育成的小苗，常常有原先已分化的根，這種根可以不經(jīng)誘導(dǎo)生根階段而生長?？梢允∪ヒ淮闻囵B(yǎng)基制作，切割下的插穗可用生長素溶液浸蘸處理，但這種方法只適于一些容易生根的作物。 另外也可采用下列方法就可生根。其原因是當(dāng)根原始體形成后較高濃度生長素的繼續(xù)存在，則不利于幼根的生長發(fā)育。 上述三種方法均能誘導(dǎo)新梢生根，但前兩種方法對新生根的生長發(fā)育則更為有利。生根培養(yǎng)可采用1/2或者1/4MS培養(yǎng)基，全部去掉細(xì)胞分裂素，并加入食糧非的生長素（NAA、IBA等）。若不能及時將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上去，就會使久不轉(zhuǎn)移的苗子發(fā)黃老化，或因過分擁擠而使無效苗增多造成拋棄浪費(fèi)。這種情況主要是由于培養(yǎng)容器中空氣濕度過高，透氣性較差造成的，其具體解決的方法為： a、增加培養(yǎng)基中的 溶質(zhì)水平，以降低培養(yǎng)基的水勢； b、減少培養(yǎng)基中含氮化合物的用量； c、增加光照 d、增加容器通風(fēng)，最好進(jìn)行CO2施肥，這對減輕試管苗玻璃化的現(xiàn)象有明顯的作用； e、降低培養(yǎng)溫度，進(jìn)行變溫培養(yǎng)，有助于減輕試管苗玻璃化現(xiàn)象發(fā)生； f、降低培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素含量，可以考慮加入適量脫落酸。在培養(yǎng)基中添加少量聚乙烯醇、脫落酸等物質(zhì)，能夠在一定程度上減輕玻璃化的現(xiàn)象發(fā)生。在不同的種類、品種間，試管苗的玻璃化程度也有所差異。玻璃化為試管苗的生理失調(diào)癥。 （3）繼代培養(yǎng)時材料的玻璃化 實(shí)踐表明，當(dāng)植物材料不斷地進(jìn)行離體繁殖時，有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會呈半透明水跡狀，這種想象通常稱為玻璃化。但在達(dá)到相當(dāng)數(shù)量之后，則應(yīng)考慮使其中一部分轉(zhuǎn)入生根階段。 增殖使用的培養(yǎng)基對于一種植物來說每
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