電泳技術(shù)方王楷ppt課件(參考版)
2025-05-04 18:13本頁面
【正文】 靠水流壓力將膠與玻璃管分開，最后可用吸耳球在一端輕輕施壓，將其取下。 上槽接正極 ， 下槽接負(fù)極 ， 50V預(yù)電泳 30min，然后將電壓維持在 250 V，電泳 2小時 。 電 泳 將已聚合的凝膠去除水層，垂直插入電泳槽的橡皮管中，注意不要漏液 。 b 按實驗指導(dǎo) page 17 配制凝膠液（ 按順序，每加一種試劑后都要輕輕充分搖勻， TEMED最后才加入，加入搖勻后要立即灌膠 ），用長滴管吸取配好的凝膠液，沿玻璃管注入至7 ml標(biāo)記平面，緩緩注入， 避免產(chǎn)生氣泡 。 血紅蛋白的pI 約在 6 . 9 ，細(xì)胞色素 C 的 pI 為 10 . 5 ，兩者的 pI 相差較大，可以得到較好的分離。 NH3+ + OH－ NH3+ + OH－ NH2 P P P COOH ＋ H＋ COO－ ＋ H＋ COO－ 蛋白質(zhì)的陽離子 蛋白質(zhì)的兼性離子 蛋白質(zhì)的陰離子 以聚丙烯酰胺作為支持物，兩性電解質(zhì)（ A m p h o l i n e ）在支持物內(nèi)形成穩(wěn)定的 pH 梯度，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)在電場力的作用下，便會在支持物中運動到相當(dāng)于自身 pH 梯度中聚合成一狹窄的區(qū)帶而停留。 蛋白質(zhì)具有許多可解離的酸性基團(tuán)（－ COOH）和堿性基團(tuán)（－ NH2）及其它基團(tuán) ,在一
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