【正文】 本論文是在 王建中 教授 親自、 精心指導(dǎo)下完成的， 他在繁忙的工作中，對(duì)我的試驗(yàn)給予大量的指導(dǎo)，同時(shí)關(guān)心我的生活， 在此致以最崇高的敬意和最衷心的感謝 ! 此外 ，在論文進(jìn)行的過程中，得到了 舍友朱保慶、陳金波、魏強(qiáng) 等同學(xué)的幫助，在此表示感謝 ，同時(shí)感謝資助我讀書的父母和姐姐 ! 北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 19 參考文獻(xiàn) [1] 莊瑞林．中國油茶 [M]．北京：中國 林業(yè)出版社， 1988 [2] 何方．我國油茶生產(chǎn)的反思 [J]．中國油脂， 1992(增刊 )： 1419． [3] 覃正亞．王永安．蘇立剛．等．湖南省油茶林生態(tài)經(jīng)濟(jì)效益研究 (續(xù) )[J]．經(jīng)濟(jì)林研究， 2020， 21(1)：29— 32． [4] 覃正亞王永安．蘇立剛．等．湖南省油茶生態(tài)經(jīng)濟(jì)效益研究 [J]．經(jīng)濟(jì)林研究， 2020， 20(3)： 4— 9． [5] 陳基余 ． 《安徽資源》安徽人民出版社 ， 1988 年版， 148頁 [6] 北京中醫(yī)學(xué)院．中草藥成分化學(xué) ， 北京：北京人民出版杜， 1980． [7] 張如意 ． 藥學(xué)學(xué)報(bào) ， 1986， 21， 510 [8] 盧基林．水解油茶餅粕制取酸洗緩蝕劑．湖南化工 ， 1997， 27(3)： 30— 32 [9] 馬世宏 ． 張衛(wèi)明．天然茶皂素在洗發(fā)制品中的應(yīng)用 [J]．中國野生植物資源， 1994(3)： 39I42． [10] 齊小鏈 ． 彭瑞福．化學(xué)世界， 1989， (6)： 275． [11] 馮志明 ． 化學(xué)世界， 1994， 35 (12)， 660662 [12] 蔡平等 ． 藥學(xué)通報(bào)， 1982， 17 (11)， 28 [13] 楊繼斌 ． 碩士畢業(yè)論文， 1997 年 [14] 李玉善等 ． 西北植物學(xué)報(bào)， 1994， 14 (5)， 149153 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對(duì)油茶餅粕培養(yǎng)基的蛋白質(zhì)最大提高率在 66． 7％ 99． 7％ ； 紫木耳、毛霉與產(chǎn)朊假絲酵母二次發(fā)酵產(chǎn)品的粗蛋白質(zhì)含量接近 20％ ，粗纖維含量下 降至 18％以下。油茶皂 甙 作為優(yōu)良的非離子型表面活性劑在日用化工、醫(yī)藥、木工、建材和農(nóng)藥等領(lǐng)域的應(yīng)用研究 必將推動(dòng)油茶皂甙提取分離技術(shù)的進(jìn)步。例如，由于茶油 含有大量的 不飽和脂肪酸，對(duì)人體非常有益， 所以 大量的開發(fā)茶油 不僅對(duì)人體健 康有益，而且可以解決人們的 吃油 問題，減少疾病的發(fā)生，是 很好的食用油 。 ，從中了解了油茶的利用用價(jià)值和相關(guān)技術(shù)的發(fā)展?fàn)顩r，據(jù)此可以 設(shè)想 一下 油茶資源未來的發(fā)展趨勢(shì) 。由于各油茶皂 甙 的結(jié)構(gòu)上差異很小，有時(shí)用一種方法往往達(dá)不到分離的目的，這時(shí)可采用多次反復(fù)層析或多種方法結(jié)合進(jìn)行，如用活性炭，三氧化二鐵， 葡聚糖凝膠，硅藻土一硅酸鎂等方法 [3334]。制備薄層層析也己用于皂 甙 分離，取得了較好的效果。常以硅膠為支持劑， 以不同比例的 CHCl3(CH2C12)CH3OHH20為溶劑系統(tǒng)進(jìn)行洗脫，也可以用含 5%, 10%, 15%CH3OH的水飽和乙酸乙 酯 等作為洗 脫劑，使硅膠柱層析得到了廣泛的應(yīng)用 [32]。該技術(shù)的原理是移動(dòng)相液滴在通過與之不相容的固定液相的過程中產(chǎn)生連續(xù)分配，從而達(dá)到分離的目的。 目前，低壓、中壓、高壓液相色譜以及反相高壓液相色譜 (RPHPLC)己經(jīng)成為分離皂 甙 的常用方法 。 （ 4） 皂甙 是易溶于水的，而且在提取的過程中它與糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物同時(shí)存在水溶液中，分離純化皂素是關(guān)鍵的一步。一般的精煉方法是堿 煉、水洗、脫色、濾壓、脫臭和皂角處理幾部分。對(duì)油茶適時(shí)的采摘能夠時(shí)期的含水量控制在一定的范圍內(nèi)有利于加工，在進(jìn)行油茶油提取前，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行蒸烤，使種子的含水量達(dá)到一定的水平， 這樣就可以保證后續(xù)加工的順利進(jìn)行。 不僅僅是規(guī)模的擴(kuò)大，而且提取的茶油和皂素的產(chǎn)量和質(zhì)量均得到相應(yīng)的改進(jìn)和提高。 油茶功能表達(dá)檢測(cè)和轉(zhuǎn)基因育種 [30] 油茶育種的目標(biāo)是提高產(chǎn)油量，為了從更深層次探索油茶油脂轉(zhuǎn)化過程中其功能基因的作用情況，湖南省林科院的陳永忠博士利用基因芯片技術(shù)對(duì)油茶果實(shí)的功能基因進(jìn)行檢測(cè)，旨在繪制各功能基因在油茶果實(shí)油脂轉(zhuǎn)化過程中的表達(dá)譜，為進(jìn)一步深入開展高產(chǎn)油量、高含油量和油茶優(yōu)良的油茶新品種的定向培育作前期探索研究。湖南省林業(yè)科學(xué)院陳永忠等也對(duì)油茶“雄性不育”優(yōu)良無性系進(jìn)行鑒別標(biāo)記，為建立比較完備的油茶優(yōu)良無性系鑒別體系積累了豐富的技術(shù)與資料。張自俊等以 22個(gè)引物對(duì) 12個(gè)油茶優(yōu)良無性系進(jìn)行 RAPD標(biāo)記，得到了 141條多態(tài)性譜帶，并通過引物將優(yōu)良無性系與自然植株區(qū)別開來。首先由中南林學(xué)院譚曉風(fēng)等建立了改良 CTAB法提取山茶屬植物總 DNA的技術(shù)方法，張自俊等在此基礎(chǔ)上進(jìn)行改良為同時(shí)提取 DNA與 RNA方法，改進(jìn)了油茶 RAPD反應(yīng)體系。 2020年，中南林學(xué)院張智俊、畢方 鋮等通過油茶優(yōu)良無性系的腋芽培養(yǎng)，誘導(dǎo)出現(xiàn)再生小植株，并篩選出了再生叢芽、子葉形成胚性愈傷組織及其不定芽分化的最適培養(yǎng)基配方；還通過 RAPD鑒別，發(fā)現(xiàn)分子水平上的變異，為油茶優(yōu)良無性系組培擴(kuò)繁和生物技術(shù)育種的再生體系建立打下了基礎(chǔ)。最早是廣西自治區(qū)林科所于 1980年報(bào)道通過油茶組織培養(yǎng)誘導(dǎo)出胚狀體；他們從 1979年開始研究油茶胚狀體、假珠芽成苗過程及腋生枝快速繁殖等再生方式，建立了油茶組織培養(yǎng)及其上山造林的技術(shù)，給油茶無性系繁育工廠化開辟了新的途徑。 油茶組織培養(yǎng) [29] 油茶與山茶屬其它植物一樣，細(xì)胞不易誘導(dǎo)分化產(chǎn)生再生植株，導(dǎo) 致油茶 組 織培養(yǎng)的難度較大。至次年春分取出畦種 ， 秋分后分栽，三年結(jié)實(shí)， 屬于較早的自然選種了。傳統(tǒng)上油茶多采用實(shí)生繁殖?，F(xiàn)在有很多 科技人員 開始著手進(jìn)行研究，將 生物技術(shù)應(yīng)用于改良品種是很好的方法。 （ 4） 在提取皂素的過程中，分離產(chǎn)物也是很重要的，由于試驗(yàn)條件的限制，僅能用紗布過濾，這樣操作會(huì)使一部分皂素?fù)p失，所以應(yīng)改進(jìn)分離技術(shù)，提高皂素的提取率。 （ 2）在進(jìn)行壓榨之前，應(yīng)控制種子的含水量，含有過多的水會(huì)對(duì)壓榨有一定的影響，從而給后面的試驗(yàn)帶來不必要的 麻煩，也可能會(huì)對(duì)皂素的產(chǎn)量有影響。 采用本工藝可以從原來被廢棄的油茶籽餅中得到多用途的化工原料茶皂素和家畜與生畜的飼料，真正做到了變廢為寶，對(duì)提高經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益具有重要作用。 ，絕大部分的有毒物質(zhì)可以除掉，因而可以作為生北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 14 畜的飼料。 討論 ，如果只用水來浸提，得到的茶皂 甙 顏色深，含量和得率低，但如果在增加一道乙醇浸提過程，則得到的茶皂素相對(duì)來所顏色淺，含量和得率亦高。由于功率較為顯著，浸 提 時(shí)間 作用 不明顯， 時(shí)間 *功率互作顯著， 功率和時(shí)間的最優(yōu)水平應(yīng)根據(jù)時(shí)間 *功率互作而定，即 在 D2確定為最優(yōu)水平后，在 D2水平上比較 B，確定時(shí)間的最優(yōu) 水平。 (3)考慮 A、 D因素， B作為 A*D的 互作 SSe=SSTSSASSBSSD= dfT=91=8 dfA=dfB=dfD=31=2 dfe=dfTdfAdfBdfD=8222=2 表 溫度和 功率 兩因素正交方差分析 影響因素 df SS x2 F 溫度 A 2 功率 D 2 溫度 *功率 B 2 試驗(yàn)誤差 2 總誤差 8 由表 ，溫度的 F值最高，溫度與功率的互作作用也不是很明顯。 根據(jù)各試驗(yàn)因子的總計(jì)數(shù)或平均數(shù)可以看出： A 取 A1， B 取 B2， C 取 C3， D 取 D2為好，即皂素提取的 優(yōu)化方案 是 A B C D2的組合。 皂甙 9份油茶粕，每份 50g，分別按照 表 L9（ 34） 正交表進(jìn)行試驗(yàn)，得數(shù)據(jù)填入下表。 仁 率的測(cè)定 未脫殼的油茶籽 G=4152g，脫殼后的油茶籽重 G1=2930g