【正文】 1]，分離效能高，有時可將結(jié)構(gòu)極為相似的皂素分開。 因此， 在以后的實(shí)驗(yàn)中可以利用層析法的方法進(jìn)行分離，可以使實(shí)驗(yàn)的提取率、準(zhǔn)確度提北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 17 高，這是試驗(yàn)的最終目的。經(jīng)過發(fā)酵后油茶餅粕中的氨基酸組成更加合理，與美國 NRC雞飼料必需氨基酸模式比較，限制氨基酸從 9— 10種下降到 2— 4種，蛋氨酸為其第一限制氨基酸，酪氨酸為第二限制氨基酸 [3536]。 在走出學(xué)校大門之前，我要向你們深深的鞠一躬，道一聲謝謝。 得出利用超聲波提取皂 甙 的最佳 優(yōu)化 方法 為 A1B2C3D2組合，即提取溫度為 60℃，提取時間為 1h，料液比 1： 10，超聲波功率為 60w，利用該工藝油茶皂素的提取量為 。 皂甙 的提取技術(shù) 正在 逐步完善，即將進(jìn)入工業(yè)化生產(chǎn)。此外，反相硅膠柱層析也得到了重視，通常以反相鍵合相如 RP18(硅膠表面的輕基用含有 18個碳的鏈狀化合物鍵合而得 )， RP8或 RP2為填充劑，用 CH3OHH2O( 9:1, 7:3)等比例為洗脫劑。按照這種方法可以得到 較好 的茶油，還能夠提高皂素的提取率， 所以在以后的研究中也該對茶油的提取方法進(jìn)行改進(jìn)。 油茶分子圖譜的構(gòu) 建與基因的分離 [30] 20 世紀(jì) 90 年代中后期，中南林學(xué)院經(jīng)濟(jì)林育種與栽培國家林業(yè)局重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室譚曉風(fēng)教授等在山茶屬植物分子鑒別的基礎(chǔ)上開展油茶 cDNA文庫和 EST文庫的構(gòu)建研究，得到了 106庫容量的油茶種子油脂轉(zhuǎn)化高峰期的從 DNA文庫；在所構(gòu)建的從 DNA文庫中挑選了 2020多個克隆進(jìn)行測序分析，從中分離出油茶種子中與脂肪酸、蠟合成和代謝有關(guān)的主要基因脫酰 ACP硫酯酶 (FatB1)基因、硬脂酰一 ACP脫飽和酶 (SAD)基因、油酸脫飽和酶 (FAD2)基因、 FAD 8基因、 ACP基因等；還對中國沙梨自交不親和 等位基因進(jìn)行了分離研究，分離出 7個 S— Nase新等位基因，以上這些基因已部分登陸到了 GenBank，為油茶轉(zhuǎn)基因育種與定向培育研究奠定了基礎(chǔ)。 1981年與 1982年，湖南省邵陽地區(qū)林科所隆振雄和盧天玲 先后分別通過油茶未成熟的子葉幼胚離體培養(yǎng)獲得了完整的再生小植株，隨后油茶組織培養(yǎng)基本停滯。 油茶常規(guī)育種是在自然林分中選育出優(yōu)良品系，能夠盡快獲得增益的育種方法。 ，因?yàn)殛栯x子型聚丙烯酰胺的分子中含有大量正電荷，能吸附雜質(zhì)微粒，起到電性中和作用， 而它的長碳鏈又可以起到架橋作用，所以用它作絮凝劑可以形成大而連續(xù)的絮團(tuán)，加速沉降速度，縮短過濾時間，提高溶液澄清度。 (1)平方和與自由度 C=（∑ x） 2/n=SST=∑ x2C=++++++++ = SSA=∑ x2/3C == SSB=∑ x2/3C == SSC=∑ x2/3C == SSD=∑ x2/3C == 因?yàn)榇苏槐硎撬囊蛩厝降?L9（ 34），表中的任意兩列的互作作用出現(xiàn)在另外兩列，所以做以下組合分析 ,列方差分析表進(jìn)行 F檢驗(yàn) ： （ 2） 考慮 A、 B因素， C作為 A*B的 互作 SSe=SSTSSASSBSSC= dfT=91=8 北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 12 dfA=dfB=dfC=31=2 dfe=dfTdfAdfBdfC=8222=2 表 溫度和時間兩因素正交方差分析 影響因素 df SS x2 F 溫度 A 2 時間 B 2 影響因素 df SS x2 F 溫度 *時間 C 2 試驗(yàn)誤差 2 總誤差 8 由 ，溫度的 F值顯著，而溫度 與時間的互作作用不是很明顯。 （ 5） 濃縮液冷卻后加入陽離子型聚丙烯酰胺絮凝劑，攪拌均勻，靜置 2h，得粘稠液體。 （ 2） 將剩余的油茶籽進(jìn)行烘干， 烘干后的油茶籽進(jìn)行脫殼，稱其重量 G1。第一類沉淀劑主要有：乙醇，硫酸鋁鉀，聚丙烯乙酰胺 (PAM)，聚三氯化鐵 (PAC)以及硫酸鋁鉀 (活性三氯化鐵 )+可溶性甲殼素等；第二類沉淀劑主要有鉛鹽，丙酮，明礬，乙醚等。此法得到的皂甙純度不高，且聚酰胺柱回收不易，不適合工業(yè)生產(chǎn) 。顯然，采用合適的純化方法用于生產(chǎn)意義重大。 油茶皂素 在食品工業(yè)中的應(yīng)用 茶皂素在食品工業(yè)上，因其具有較強(qiáng)的吸收二氧化碳的特性，可用在清涼飲料上如汽水和啤酒中作助泡劑。目前市面上己有油茶皂 甙 、新 型纖微板防水材料等 [14]。此外，它還具有去痰消炎、止咳鎮(zhèn)痛、殺菌殺蟲及促進(jìn)植物生長等多種功效 [10]。據(jù)報(bào)道，以茶籽 皂甙軟化石蠟，其乳化力強(qiáng)， 分散性良好，乳液顆粒度在 m左右，穩(wěn)定性好，能在室溫下長時間存放不分層，在 40℃ 恒溫條件下存 放 24h以上 (10％濃度 )，其表面結(jié)皮厚度為 ，下層析水度為 ％ ，且乳液的穩(wěn)定性和乳化效果幾乎不受水質(zhì)硬度影響 [9]。 油 茶皂甙 具有苦辛味，純品為白色微細(xì)柱狀晶體。我國在茶 皂甙 (包括油茶 皂甙 )表面活性的理論體系的建立并指導(dǎo)應(yīng)用于實(shí)踐 是一大創(chuàng)舉 [5]。 油茶是我國特有的南方重要木本油料樹種，有 2300余年的栽培歷史?；斏蛞干?，兩 性花，白色。茶油色清味香，營養(yǎng)豐富，耐貯藏，是優(yōu)質(zhì)食用油；也可作為潤滑油、防銹油用于工 業(yè)。茶籽蛋白質(zhì)含有 18種氨基酸成分， 其中 8種是人體必需的氨基酸。因此，油茶餅粕是一種 營養(yǎng)價(jià)值較高的潛在飼料來源。茶餅既是農(nóng)藥，又是肥料，可提高農(nóng)田蓄水能力和防治稻田害蟲 ； 果皮是提制栲膠的原料。蒴果球形、扁圓形、橄欖形等。 據(jù)統(tǒng)計(jì)，全國現(xiàn)有油茶林面積為 400 萬 hm2 ，分布于南方 16個省 (區(qū) )1100多個縣，年產(chǎn)茶油 億 kg，占我國木本食用油料樹種栽培面積的 80%以上。 油茶粕的成分 茶籽餅粕的成分 [6]見表 。吸濕性強(qiáng)， 對甲基紅 顯酸性，難溶于無水甲醇、乙醇、不溶于乙醚、丙酮、苯、石油醚等有機(jī)溶劑，易溶于含水甲醇，含水乙醇以及冰醋酸、醋酐、吡啶等。 茶 皂甙 的生理活性 茶籽 皂甙 還具有多種生理活性，溶血性是其中之一。 油茶 皂甙 的用途 油茶 皂甙 是一種天然非離子表面活性劑，具有良好的乳化、分散、發(fā)泡、膠粘、潤濕等作用，同時還具有消炎、怯痰、抗?jié)B透、鎮(zhèn)痛、健胃等藥理，廣泛應(yīng)用于毛織、針織、日用化工、醫(yī)藥、農(nóng)藥方面 [11]，具體性質(zhì)及應(yīng)用如下 : 用作洗滌劑 油茶 皂甙 是天然活性劑，易酶解為無毒化合物，不會對環(huán)境產(chǎn)生污染。 油茶 皂甙 用作粘膠劑 油茶 皂甙 是一種復(fù)雜的化合物 可用 作煙草薄片的粘膠，其薄片具有良好的拉力、耐破度，含有豐富的有機(jī)糖，完全 能 滿足切絲卷煙要求 ； 同時該粘膠劑具有吸潮保潤性，不需再加糖作保潤劑，可大大降低成本 [15]。 由上可知，油茶 皂甙 是一種非離 子型的表面活性劑，其來源于天然，刺激性小，去污能力強(qiáng)，本身又具有抑菌的作用，因此，作為人體的洗滌用品和高級衣料的洗滌用品很合適，這與人們生活水平的提高，在吃、穿、用諸方面返樸歸真，回歸大自然的消費(fèi)心理和消費(fèi)要求又是十分吻合的。經(jīng)典的純化方法往往需要多次工序“對癥下藥”，例如針對 皂甙 的脫色大多采用 H2O2 氧化破壞色素、離子交換樹脂或二者相結(jié)合的方法等。 ： 硅膠柱采用干法上柱，干法上樣 。據(jù)報(bào)道，用硫酸鋁鉀 (活性三氯化鐵 )+可溶 性 甲殼素的方法，沉淀速度快，對北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 8 皂甙無影響，價(jià)格便宜，和用乙醇處理過的濾液效果相當(dāng)，且比乙醇更安全，效果更好。 北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 9 （ 3） 將脫殼的油茶籽放入液壓榨油機(jī)中， 60MPa 壓榨至恒重。 （ 6）用紗布過濾后，烘箱烘干，稱 產(chǎn)品重量，計(jì)算 提取量 。 (3)考慮 A、 D因素， B作為 A*D的 互作 SSe=SSTSSASSBSSD= dfT=91=8 dfA=dfB=dfD=31=2 dfe=dfTdfAdfBdfD=8222=2 表 溫度和 功率 兩因素正交方差分析 影響因素 df SS x2 F 溫度 A 2 功率 D 2 溫度 *功率 B 2 試驗(yàn)誤差 2 總誤差 8 由表 ，溫度的 F值最高，溫度與功率的互作作用也不是很明顯。 采用本工藝可以從原來被廢棄的油茶籽餅中得到多用途的化工原料茶皂素和家畜與生畜的飼料，真正做到了變廢為寶，對提高經(jīng)濟(jì)效益和社會效益具有重要作用。傳統(tǒng)上油茶多采用實(shí)生繁殖。 2020年，中南林學(xué)院張智俊、畢方 鋮等通過油茶優(yōu)良無性系的腋芽培養(yǎng)，誘導(dǎo)出現(xiàn)再生小植株，并篩選出了再生叢芽、子葉形成胚性愈傷組織及其不定芽分化的最適培養(yǎng)基配方；還通過 RAPD鑒別，發(fā)現(xiàn)分子水平上的變異，為油茶優(yōu)良無性系組培擴(kuò)繁和生物技術(shù)育種的再生體系建立打下了基礎(chǔ)。 油茶功能表達(dá)檢測和轉(zhuǎn)基因育種 [30] 油茶育種的目標(biāo)是提高產(chǎn)油量，為了從更深層次探索油茶油脂轉(zhuǎn)化過程中其功能基因的作用情況，湖南省林科院的陳永忠博士利用基因芯片技術(shù)對油茶果實(shí)的功能基因進(jìn)行檢測，旨在繪制各功能基因在油茶果實(shí)油脂轉(zhuǎn)化過程中的表達(dá)譜，為進(jìn)一步深入開展高產(chǎn)油量、高含油量和油茶優(yōu)良的油茶新品種的定向培育作前期探索研究。 （ 4） 皂甙 是易溶于水的，而且在提取的過程中它與糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物同時存在水溶液中，分離純化皂素是關(guān)鍵的一步。制備薄層層析也己用于皂 甙 分離，取得了較好的效果。油茶皂 甙 作為優(yōu)良的非離子型表面活性劑在日用化工、醫(yī)藥、木工、建材和農(nóng)藥等領(lǐng)域的應(yīng)用研究 必將推動油茶皂甙提取分離技術(shù)的進(jìn)步。 ，超聲波的輔助作用凸現(xiàn)出來。 致謝 四年 的大學(xué) 時光 即將