【正文】 iosgenin of root was obviously higher than potato skins.This topic research the soxhlet method and utrasonicassisted extraction method. Two methods in parison, utrasonicassisted extraction method, have higher extraction yield, extracting time short, simple operation etc, the third time extraction yield is %. By single factor and orthogonal test won the ultrasonic extraction auxiliary the optimal conditions: acid concentration 1 mol/L, acid solution temperature of 100℃, acid solution time 3 h, pH value for 5,solvent extraction time 1 h. Best extraction conditions of secondary extraction yield to %.Silica gel purification diosgenin coarse extraction solvent the best elution liquid for petroleum ether:ethyl acetate= 1:1, purification of sample purification and could reach %. RPHPLC method to detect the sweet potato diosgenin best detection conditions for: mobile phase: acetonitrile: methanol: water=8:1:1。兩種方法比較而言，超聲波輔助提取方法，具有提取率高，提取時(shí)間短，操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，%。本課題主要針對河北省農(nóng)科院甘薯組選育的新品種，進(jìn)行甘薯中薯蕷皂甙元的提取工業(yè)研究；對檢測方法進(jìn)行對比優(yōu)化；并對甘薯膨大期到成熟期薯蕷皂甙元在甘薯根、莖和葉中的含量進(jìn)行了檢測。 年 月 日 年 月 日 河北科技大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)　　 　 　大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名： 指導(dǎo)教師簽名：通過試驗(yàn)可知，在膨大期隨著淀粉含量逐漸增加，薯蕷皂甙元含量的增加趨勢也越明顯。關(guān)鍵詞 甘薯；薯蕷皂甙元；分光光度法；提取；純化 IAbstractAbstractChina is the world39。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國甘薯作為動物飼料的為50%，用于工業(yè)加工成產(chǎn)品的占15 %，食用占14%，用作種薯占6%，因保藏不當(dāng)而霉?fàn)€掉占15% [4]。 甘薯主要營養(yǎng)成分簡介甘薯中的營養(yǎng)成分比較豐富，徐州甘薯研究中心通過對790份甘薯塊根的分析，%～%，%～%，%～%，以上均以干物質(zhì)計(jì)算，而每100 mg[9]。多糖是一種單糖聚合度大于10 的高分子化合物，而植物中的多糖是由許多相同或不同的單糖以α或β糖苷鍵組成的化合物[13]。Shuichi Kusano[20]等采用水提醇沉法，經(jīng)過TCA透析、柱層析和超濾的處理，在甘薯中獲得了一種新的酸性糖蛋白。工業(yè)上通過合成的方法來生產(chǎn)的DHEA與天然的DHEA結(jié)構(gòu)和性質(zhì)很難保證完全一樣，因此在天然植物中提取DHEA逐漸被人們所重視。其中盾葉薯蕷中薯蕷皂甙元的含量最高，其次為黃山藥和穿山龍等[37]。此外，薯蕷皂甙元在降低血糖方面效果也比較明顯。于武江和俞斌[51]通過二次酸水解法從黃姜中提取了薯蕷皂甙元，通過正交試驗(yàn)經(jīng)過二次水解來提取薯蕷皂甙元，%，%。以薯蕷皂苷元的提取率為指標(biāo)，優(yōu)化了該法制備薯蕷皂苷元的工藝條件，得到以下結(jié)論：酶解法比水浸提法更有利于提高皂甙元的提取率；確定料液比為1:14，纖維素酶(每克原料10 U，45℃)酶解6 h為最佳工藝條件。其操作流程為稱取黃姜粉末100 mg， mol/L濃硫酸水解4 h，然后用去離子水沖洗殘?jiān)林行院蟪闉V，濾渣干燥，加入100 mL氯仿在超聲波中提取30 min，之后用LiebemannBarcharad試劑進(jìn)行顯色反應(yīng)，最后測吸光度，計(jì)算薯蕷皂甙元含量。李輝[62]等通過單因素和正交試驗(yàn)確定了超臨界CO2提取黃姜中薯蕷皂甙元的最佳工藝條件：夾帶劑為95%的乙醇，萃取時(shí)間、壓力、萃取溫度和解析溫度分別為3 h、20 MPa、60℃、50℃；各因素對提取率影響大小為：提取時(shí)間萃取溫度萃取壓力解析溫度。劉詠[67]等用硅膠層析加重結(jié)晶的方法對黃姜中薯蕷皂甙元粗品進(jìn)行了提純，并對純品的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步鑒定，方法如下：取一定量薯蕷皂甙元粗品，以10% H2OCH3OH作溶劑溶解，將濾液加到硅膠柱上，然后用CHCl3MeOH（體積比為65:30）做沖洗劑洗柱，以TCL法帶標(biāo)樣鑒別，合并相同組分，濃縮，析出晶體，離心干燥得薯蕷皂甙純品。馬敬中[70]等用乙酸酐一濃硫酸作顯色劑對甾體化合物在460 nm進(jìn)行分光光度法測定，顯色溫度為50℃，顯色劑占總體積2/5，少則色度變淺或難以顯色，多則雜質(zhì)發(fā)生干擾雖然此顯色劑對甾體皂甙元顯色具有專一性， 但由于色素的干擾，往往導(dǎo)致測定結(jié)果偏高。陶莉[75]等分別用氣相色譜法和紅外光譜法對薯蕷皂苷元進(jìn)行了定性和定量?！?10 mg/mL范圍內(nèi)，薯蕷皂甙元峰面積與其質(zhì)量濃度呈良好的線性關(guān)系，r=。本課題采用超聲波輔助法提取甘薯中的薯蕷皂甙元，選用鹽酸進(jìn)行酸解預(yù)處理，目前工業(yè)上生產(chǎn)薯蕷皂甙元也多采用酸解預(yù)處理操作，此方法操作簡便，易實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，且酸解溶液中存在的大量單糖可以進(jìn)行發(fā)酵，進(jìn)而回收乙醇，增加企業(yè)收益。53第2章 甘薯中薯蕷皂甙元分光光度檢測法第2章 甘薯中薯蕷皂甙元分光光度檢測法 試驗(yàn)材料與設(shè)備 試驗(yàn)材料與試劑甘薯（冀9冀7冀65） 河北省農(nóng)科院糧油所薯蕷皂甙元標(biāo)準(zhǔn)品（97%） 中國藥品生物制品檢定所鹽酸，分析純天津市大茂化學(xué)試劑廠高氯酸，分析純天津市大茂化學(xué)試劑廠香草醛，分析純天津市大陸化學(xué)試劑廠氫氧化鈉，分析純天津市大陸化學(xué)試劑廠濃硫酸，分析純新光化工試劑廠氯化鉀，分析純天津市大陸化學(xué)試劑廠冰醋酸，分析純天津市大茂化學(xué)試劑廠石油醚，分析純天津大茂化學(xué)試劑廠乙腈，色譜純天津康科德科技有限公司甲醇，色譜純天津康科德科技有限公司 試驗(yàn)設(shè)備1011型電熱鼓風(fēng)干燥箱 天津華北試驗(yàn)電爐廠玻璃儀器氣流烘干器河南豫華儀器有限公司JA 1003型電子天平( g)上海精科天平JJ 1000型電子天平( g)美國雙杰兄弟(集團(tuán))有限公司DK981型電熱恒溫水浴鍋河南省鞏義市英峪予華儀器廠SP756 p紫外可見分光光度計(jì) 上海光譜儀器有限公司DELTA 320型pH計(jì)梅特勒托利多儀器有限公司北京醫(yī)用離心機(jī)廠SHZD(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵鞏義市英峪予華儀器廠Re201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器河南省鞏義市英峪予華儀器廠201升降恒溫水浴鍋河南省鞏義市英峪予華儀器廠SHZD(Ⅲ)型予華牌循環(huán)水式真空泵河南省鞏義市英峪予華儀器廠超聲波昆山市超聲波儀器有限公司高效液相色譜儀上海島津儀器有限公司 試驗(yàn)內(nèi)容與方法 分光光度法檢測甘薯中薯蕷皂甙元方法的確定 甘薯中薯蕷皂甙元樣品的制備將甘薯清水洗凈后切片，40℃鼓風(fēng)干燥24 h，冷卻后粉碎過40目篩。因此，本實(shí)驗(yàn)選用香草醛冰醋酸高氯酸顯色法。 水浴溫度對顯色穩(wěn)定性的影響反應(yīng)體系水浴時(shí)間分別為50、60、70、80、95℃，水浴20 min，其他反應(yīng)條件如上?！?mg/mL范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性相關(guān)關(guān)系，如圖25。 加樣回收率試驗(yàn)取已知薯蕷皂甙元含量的甘薯樣品粉末20 g，共6份，精密稱取，加入一定量薯蕷皂甙元標(biāo)準(zhǔn)品，測其吸光度，計(jì)算其含量。這一階段薯塊增重占全重的60%～70%，是甘薯高產(chǎn)的關(guān)鍵時(shí)期，此期間內(nèi)甘薯中的物質(zhì)成分如淀粉、蛋白質(zhì)、糖類、花色苷、β胡蘿卜素以及薯蕷皂甙元含量等都會隨塊根的生長而發(fā)生變化。 甘薯中水分的測定方法，采用常壓干燥法，利用食品中水分的物理性質(zhì)， kPa，溫度101℃～105℃下采用揮發(fā)吸濕水、部分結(jié)晶水和該條件下能揮發(fā)的物質(zhì)方法測定樣品中干燥減失的重量，再通過干燥前后的重量變化計(jì)算出水分的含量。水解前后測量還原糖的差值即為蔗糖含量。甘薯中粗纖維含量計(jì)算公式如下： (36)式中：X——樣品中粗纖維含量，單位為（g）；G——?dú)堄辔锏馁|(zhì)量，單位為（g）；m——樣品質(zhì)量，單位為（g）。樣品經(jīng)灼燒后殘留的無機(jī)物質(zhì)為灰分。而塊根和薯皮在膨大期到成熟期薯蕷皂甙元的含量有增加的趨勢。由表32可以看出，隨著生長天數(shù)的增加，甘薯中淀粉含量呈現(xiàn)明顯的增加趨勢，冀7%～%、%～%%～%，其中增幅最大的為冀71。結(jié)果顯示，在膨大期甘薯莖和葉中均不含有薯蕷皂甙元，而塊根中的薯蕷皂甙元含量隨著生長周期的延長呈現(xiàn)明顯的增加趨勢，而薯皮中的薯蕷皂甙元只在膨大期開始和結(jié)束時(shí)增長趨勢明顯，并且薯塊中的薯蕷皂甙元含量明顯高于薯皮。如此反復(fù)提取殘?jiān)?，直到紫外檢測吸光度值A(chǔ)bs。OH超聲波輔助提取法是一種較為成熟的用于植物原材料提取過程的方法。甘薯中薯蕷皂甙元的提取受很多因素的影響，包括原料粒度、酸濃度、酸水解時(shí)間、酸水解溫度、pH值、提取溶劑種類和溶劑提取時(shí)間等。薯蕷皂甙元提取正交設(shè)計(jì)方案見表42。 洗脫根據(jù)對樣品進(jìn)行薄層色譜檢測，得出最佳的洗脫溶劑為石油醚：乙酸乙酯=1:1，并在洗脫。表4–2 正交設(shè)計(jì)方案實(shí)驗(yàn)號因 素HC濃度（mol/L）A酸解時(shí)間（h）B酸解溫度（℃）C溶劑提取時(shí)間（h）DpHE123456789101112131415161（）1（）1（）1（）2（）2（）2（）2（）3（）3（）3（）3（）4（）4（）4（）4（）1（1）2（2）3（3）4（5）1（1）2（2）3（3）4（5）1（1）2（2）3（3）4（5）1（1）2（2）3（3）4（5）1（70）2（80）3（90）4（100）2（80）1（70）4（100）3（90）3（90）4（100）1（70）2（80）4（100）3（90）2（80）1（70）1（）2（）3（）4（）3（）4（）1（）2（）4（）3（）2（）1（）2（）1（）4（）3（） 1（3） 2（5） 3（7） 4（9） 4（9） 3（7） 2（5） 1（3） 2（5） 1（3） 4（9） 3（7） 3（7） 4（9） 1（3） 2（5） 正交結(jié)果的驗(yàn)證以正交試驗(yàn)所得到的最優(yōu)條件做驗(yàn)證性試驗(yàn)，重復(fù)試驗(yàn)三次。主要因素包括原料粒度（60目）鹽酸濃度（、 mol/L）、酸水解時(shí)間（5 h）、酸水解溫度（70、80、90、100℃）、pH值（9）、溶劑提取時(shí)間（、2 h）。OOH (42)形成的自由基擴(kuò)散溶解，同時(shí)釋放出過氧化氫。采用超聲波輻射的傳播在液體中促進(jìn)了一系列的壓縮和稀疏波。 甘薯中薯蕷皂甙元索氏提取法 提取裝置及原理 圖41 索氏提取裝置索式提取法是一種常用的利用溶劑萃取樣品的方法，圖41為提取裝置圖。而以上物質(zhì)與甘薯塊根和薯皮中薯蕷皂甙元有一定的相關(guān)性，但值得注意的是，淀粉含量增加明顯，薯蕷皂甙元含量的增加趨勢也越明顯。表32 甘薯膨大期基礎(chǔ)成分含量(%)指標(biāo)%（干基）甘薯品種時(shí)間（天）水分脂肪蛋白質(zhì)淀粉還原糖纖維素灰分冀71142842冀65142842冀981428