免疫學檢測法匯總-wenkub.com
2025-06-21 16:56 本頁面
【正文】 目前應用生物酶標親合素系統(tǒng)（biotinavidin system ELISA,BASELISA），它是通過生物素標記抗體連接免疫反應系統(tǒng)，同時借助生物素化酶或酶標親合素引入酶與底物反應系統(tǒng)。結合非常穩(wěn)定。先將已知特異抗原包被固相載體，加入待檢標本（可能含有相應抗體），再加入酶標抗Ig的抗全（即第二抗體），經加底物顯色后，根據(jù)顏色的光密度計算出標本中抗體的含量。使抗原抗體反應在固相載體表面進行政區(qū)。目前常用的方法有酶標免疫組化法和酶聯(lián)免疫吸附法。本法將抗原抗體反應的特異性與酶對底物高效催化作用結合起來，根據(jù)酶作用底物后顯色，以顏色變化判斷試驗結果，可經酶標測定儀作定量分析，敏感度可達ng水平。圖206 液相放射免疫分析法原理及標準曲線 ?。?）固相法：將抗原或抗體吸附到固相載體表面，然后加待檢標本，最后加標記抗體。在反應系統(tǒng)中，待檢標本的胰島素抗原與同位素標記的胰島素競爭奪戰(zhàn) 性與胰島素抗體結合。應用間接熒光法也用于自身免疫病的抗核抗體檢查。使用流式細胞儀(fluoresceneactivated cell sorting,FACS)，能自動檢測細胞的大小、熒光強度。將組織或細胞上的抗原直接與相應抗體（不標記熒光）結合，此為第一抗體，再把能與第一抗體特異結合的熒光標記的抗免疫球蛋白抗體加入，此為熒光標記的第二抗體，觀察結果與直接法相同?！ ?．免疫熒光技術 免疫熒光技術（immunofluorescence techni）是用化學方法使熒光素標記的抗體（或抗原）與組織或細胞中的相應抗原（或抗體）結合，進行定性定位檢查抗原或抗體的方法?！ ≡诿舾械目乖⒖贵w檢測方法（如酶標方法）出現(xiàn)之前補體結合試驗曾廣泛用于檢測各種細菌、病毒或螺旋體（如梅毒）的抗原或抗體，由于本試驗影響因素多，結果不穩(wěn)定現(xiàn)已被新檢測方法所代替。一為檢測系統(tǒng)由待檢樣品與已知抗原（或抗體）組成；另一為指示系統(tǒng)，由綿羊紅細胞（SRBC）和抗SRBC組成。此方法可用于帶各種抗原的細胞的檢測，如進行細胞MHC抗原的鑒定，和進行淋巴細胞中T細胞總數(shù)或其亞類的計數(shù)?！ 。ㄈ┭a體參與抗原抗體反應 這一類反應主要包括溶血反應（hemolytic assay）、補體介導的細胞毒試驗（plement mediated cytotoxicuty test）及補體結合試驗（plement fixation test）。例如應用于診斷自身免疫溶血性貧血癥時，Rh+紅細胞與抗Rh血清間的反應。如用γ球蛋白包乳膠顆粒檢測類風濕關節(jié)炎病人血清中的類風濕因子，用甲狀腺球蛋白包被乳膠顆粒用于檢測甲狀腺球蛋的抗體?！ ?．直接凝集 直接凝集（direct agglutination）是將細菌或紅細胞與相應抗體結合產生的細菌凝集或紅細胞凝集現(xiàn)象。第二步，將電泳分離的蛋白質轉移到硝酸纖維膜上（電印跡），然后將印跡有病毒抗原的硝酸纖維膜浸濕于病人血清中。常用此法進行血清的蛋白種類分析。只需1小時左右即可觀察結果?！ ?，雙向免疫擴散試驗 雙免疫擴散試驗（double immunodiffusion）是在瓊脂板上按一定距離打數(shù)小孔，在相鄰的兩孔內分別放入抗原和抗體材料。當復合物體積增加到一定程度時停止擴散，出現(xiàn)以小孔為中心的圓形沉淀圈，沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度成正相關。 1．環(huán)狀沉淀試驗 。對運動員進行服用違禁藥品的檢測，都是應用半抗原檢測的方法?！ 。?）人和動物細胞的表面分子：包括細胞表面各種分化抗原（如CD抗原）、同種異型抗原（血型抗原或MHC抗原）、病毒相關抗原和腫瘤相關性情抗原等。臨床上檢測病人的抗病原生物的抗體、抗過敏原的抗體、抗HLA抗原的抗體、血型抗體及各種自身抗體，對有關疾病的診斷有重要意義。也就是表示效價的稀釋度越高，樣品中所含待檢成分越多。如免疫單向擴散試驗、免疫比濁試驗和酶聯(lián)免疫檢測等都屬于類方法?！ 乖蚩贵w進行定量檢
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