【正文】 抗原和抗體在體外特異結(jié)合后出現(xiàn)的各種現(xiàn)象，對(duì)樣品中的抗原或抗體進(jìn)行定性、定量、定位的檢測(cè)?！　?．抗原或抗體外檢測(cè)原理根據(jù)抗原抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物的性狀與活性特點(diǎn)，對(duì)標(biāo)本中的抗原或抗體進(jìn)行定性、定位或定量的檢測(cè)。臨床上檢測(cè)病人的抗病原生物的抗體、抗過敏原的抗體、抗HLA抗原的抗體、血型抗體及各種自身抗體，對(duì)有關(guān)疾病的診斷有重要意義。當(dāng)復(fù)合物體積增加到一定程度時(shí)停止擴(kuò)散，出現(xiàn)以小孔為中心的圓形沉淀圈，沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度成正相關(guān)。第二步，將電泳分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上（電印跡），然后將印跡有病毒抗原的硝酸纖維膜浸濕于病人血清中?！　。ㄈ┭a(bǔ)體參與抗原抗體反應(yīng)　　這一類反應(yīng)主要包括溶血反應(yīng)（hemolytic assay）、補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)（plement mediated cytotoxicuty test）及補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（plement fixation test）?！　?．免疫熒光技術(shù)　免疫熒光技術(shù)（immunofluorescence techni）是用化學(xué)方法使熒光素標(biāo)記的抗體（或抗原）與組織或細(xì)胞中的相應(yīng)抗原（或抗體）結(jié)合，進(jìn)行定性定位檢查抗原或抗體的方法。在反應(yīng)系統(tǒng)中，待檢標(biāo)本的胰島素抗原與同位素標(biāo)記的胰島素競(jìng)爭(zhēng)奪戰(zhàn)　性與胰島素抗體結(jié)合。使抗原抗體反應(yīng)在固相載體表面進(jìn)行政區(qū)。目前應(yīng)用生物酶標(biāo)親合素系統(tǒng)（biotinavidin system ELISA,BASELISA），它是通過生物素標(biāo)記抗體連接免疫反應(yīng)系統(tǒng)，同時(shí)借助生物素化酶或酶標(biāo)親合素引入酶與底物反應(yīng)系統(tǒng)。目前常用的方法有酶標(biāo)免疫組化法和酶聯(lián)免疫吸附法。應(yīng)用間接熒光法也用于自身免疫病的抗核抗體檢查?！　≡诿舾械目乖?、抗體檢測(cè)方法（如酶標(biāo)方法）出現(xiàn)之前補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)曾廣泛用于檢測(cè)各種細(xì)菌、病毒或螺旋體（如梅毒）的抗原或抗體，由于本試驗(yàn)影響因素多，結(jié)果不穩(wěn)定現(xiàn)已被新檢測(cè)方法所代替。例如應(yīng)用于診斷自身免疫溶血性貧血癥時(shí)，Rh+紅細(xì)胞與抗Rh血清間的反應(yīng)。常用此法進(jìn)行血清的蛋白種類分析。　　1．環(huán)狀沉淀試驗(yàn)　　。也就是表示效價(jià)的稀釋度越高，樣品中所含待檢成分越多?？臻g構(gòu)型互補(bǔ)程度不同，抗原和抗體分子之間結(jié)合力強(qiáng)弱也不同?；パa(bǔ)程度高，則親和力強(qiáng)。因人血清（抗原）和抗體（免疫兔血清）相比，濃度高，故應(yīng)稀釋抗原。將稀釋的含有可溶性抗原的材料重疊于上，讓抗原與抗體在兩液體的界面相遇，形成白色免疫復(fù)合物沉淀環(huán)，故名為環(huán)狀沉淀試驗(yàn)（ring precipitationtest）,此法簡(jiǎn)便易行，需用材料較多是其缺點(diǎn)。對(duì)于免疫球蛋白缺損或增多的疾病的診斷或鑒別診斷有重要意義（圖203）。因抗Rh抗體是IgG只有兩個(gè)結(jié)合價(jià)，分子較?。ú蝗鏘gM結(jié)合價(jià)多，分子大）很難直接引起Rh+紅細(xì)胞凝集?！　∷?、用標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行的抗原、抗體反應(yīng)　　用熒光素、同位素或酶標(biāo)記抗體或抗原，用于抗原或抗體檢測(cè)是廣泛應(yīng)用的敏感、可靠的方法?！　?．放射免疫分析法 放射免疫分析法（radioimmunoassay RIA）應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的原理，應(yīng)作放射性同素標(biāo)記抗原（或抗體）與相應(yīng)抗體（或抗原）結(jié)合，通過測(cè)定抗原抗體結(jié)合物的放射活性判斷結(jié)果，本方法可進(jìn)行超微量分析，敏感性高，可用于測(cè)定抗原、抗體、抗原抗體復(fù)合物。前者測(cè)定細(xì)胞表面抗原或組織內(nèi)的抗原；后者主要測(cè)定可溶性抗原或抗體。表20－1　免疫學(xué)測(cè)定方法敏感性比較全屏顯示該表格 測(cè)定方法敏感性（每升）單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)＜1～2mg雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)＜1mg火箭電泳＜對(duì)流電泳＜免疫電泳＜5～10mg凝集試驗(yàn)1μg被動(dòng)血凝試驗(yàn)1μg血凝抑制試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)放射免疫分析法＜1pg酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)＜1ng定量免疫熒光分析＜1pg。圖208　生物素－酶標(biāo)親合素系統(tǒng)反應(yīng)示意圖　?。?）酶聯(lián)免疫吸附試