免疫學檢測法匯總-全文預覽
【正文】 盼藍（trypan blue）后，染料即可進入被活化補體穿孔的細胞，不帶相應抗原細胞膜保持完整的活細胞不著色。也就是經抗Ig的作用提高凝集反應的靈敏度?！ ?．抗球蛋白試驗 抗球蛋白試驗（antiglobulin test,coombs test）的原理為間接凝集試驗?！ ?．間接凝集 間接凝集（indirect agglutination）是用可溶性抗原包被在乳膠顆?；蚣t細胞表面，與相應抗體混合出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。 圖204 用免疫印跡法檢查血清中的HIV病毒抗體第一步：經電泳將HIV混合抗合抗原按分子量大小分離；第二步：將已分離的抗原經電印跡轉移到硝酸纖維膜上；第三步：將待檢病人血清加入覆蓋于硝酸纖維膜上；第四步：加入標記的第二抗體使之覆蓋膜上；第五步：加入顯色底物（或放射自顯影）顯現(xiàn)第二抗體 （二）凝集反應 細菌、紅細胞或表面帶有抗原的乳膠顆粒等都是不溶性的顆?？乖?，當與相應抗體結合，抗原與抗體結合形成凝集團塊，即稱為凝集反應（agglutination）。第一步，為電泳分離HIV抗原，在電場中根據分子量大小不同病毒抗原各成分散開。然后在適當的位置上沿電泳方向挖一直線形槽，于槽內加入含有針對各種抗原混合抗體液，讓各抗原成分與相應抗體進行雙向免疫擴散，可形成多答卷沉淀線。將瓊脂板放入電泳槽內，使瓊脂板的兩孔沿著電場的方向，于負極側的孔內加入抗原，于正極側的孔內加入抗體，通電后，抗原帶負電荷向正極泳動，抗體分子雖也帶負電荷，但因分子量大，向正極的位移小，而受瓊脂中電滲作用向負極移動，抗原和抗體能較快地集中在兩孔之間的瓊脂中形成免疫復合物的沉淀線。本法敏感、快速簡便，可取代單向擴散法定量測定免疫球蛋白的濃度。將抗體混入加熱溶解的瓊脂中，傾注于玻片上，制成含有抗體的瓊脂板，在適當位置打孔，將抗原材料加入瓊脂板的小孔內，讓抗原從小孔向四周的瓊脂中擴散，與瓊脂中的抗體相遇形成免疫復合物。在反應體系中出現(xiàn)不透明的沉淀物，這種抗原抗體反應稱為沉淀反應（precipitation neaction）。用其免疫動物，制備出各種半抗原的抗體，應用于各種半抗原物質的檢測，例如對某些病人在服用藥物后進行血中藥物濃度的監(jiān)測。在對這些成分的生物學作用的研究以及各種疾病的診斷有重要意義。抗體用于臨床治療或實驗研究時也需做純度分析和定量測定。例如用人血清作抗原免疫3只家兔，比較3只家兔產生抗體的多少，即滴定3只兔血清抗體效價，可用雙向瓊脂擴散法來滴定，例如將抗體濃度固定，將抗原作不同的稀釋度，分別將抗原或抗體滴入瓊脂的相應小孔中，觀察免疫兔血清與不同稀釋度的抗原出現(xiàn)明顯沉淀淺的抗原稀釋度（如甲兔的抗體效價為1/2000，而丙免的是1/8000則可比較出后者比前者產生抗體的效價要高）?？捎脤嶒炐詷藴是€推算出樣品中抗原（或抗體）的含量。同理也可用已知的抗原檢測樣品中是否有相應抗體。高親合力的抗體與抗原的結合力強，即使抗原濃度很低時也有較多的抗體結合抗原形成免疫復合物?？乖瓫Q定簇和抗體分子可變區(qū)互補構型，造成兩分子間有較強的親和力。此外在醫(yī)學生物學研究中對抗原性物質或細胞的定性、定量檢查不僅推動了對各種免疫學現(xiàn)象的研究，而且擴大免疫學與醫(yī)學生物許多領域的聯(lián)系。如對傳染病、免疫增殖性疾病、免疫缺損病、超敏反應、自身免疫病、移植排斥反應腫瘤的免疫學檢測，對診斷、治療均有很大幫助?！ ?．抗原與抗體的親和力(affinity)抗原抗體的結合就像酶與底物的結合，激素與其受體的結合一樣不是化學的反應，而是非共價鍵的可逆的結合。此外，反應溫度、酸堿度和離子濃度對抗原和抗體分子上各基因的解離性和電荷特性也有重要的影響，抗體與抗原決定簇之間的結合力大小可用親合力來表示。若無預期的現(xiàn)象發(fā)生，則說明樣品中無相應的抗原存在。也就是抗體濃度一定時，免疫復合物越多則樣品中的抗原量也越多。在實際工作中，把濃度低的反應成分（抗原或抗體）
法律信息相關推薦
鄂ICP備17016276號-1