免疫學檢測法匯總(已改無錯字)
2023-07-25 16:56:14 本頁面
【正文】 進行淋巴細胞中T細胞總數(shù)或其亞類的計數(shù)。在一些免疫學實驗中也可用這種方法，根據(jù)需要特異地消除帶某種抗原的細胞。 3．補體結(jié)合試驗當抗原（可溶性或顆粒性）與相應抗體結(jié)合，由于濃度低不出現(xiàn)可見反應時，應用補體結(jié)合試驗可檢出此抗原抗體反應，它比凝集反應或沉淀反應靈敏度高。本法包括兩個抗原抗體系統(tǒng)。一為檢測系統(tǒng)由待檢樣品與已知抗原（或抗體）組成；另一為指示系統(tǒng)，由綿羊紅細胞（SRBC）和抗SRBC組成。另加入作為補體的新鮮豚鼠血清。試驗時試管中先加入檢測系統(tǒng)和補體，混合經(jīng)37℃30分鐘使抗原、抗體、補體形成復合物，再加入指示系統(tǒng)，如出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，說明檢測系統(tǒng)中沒有相對應的抗原抗體，補體是游離的指示系統(tǒng)的SRBC和抗體結(jié)合而出現(xiàn)溶血，即為反應陰性。如不出現(xiàn)溶血，表明檢測系統(tǒng)中有抗原抗體復合物并結(jié)合補體，則指示系統(tǒng)無多余的補體作用而沒有溶血現(xiàn)象，即為陽性?！ ≡诿舾械目乖?、抗體檢測方法（如酶標方法）出現(xiàn)之前補體結(jié)合試驗曾廣泛用于檢測各種細菌、病毒或螺旋體（如梅毒）的抗原或抗體，由于本試驗影響因素多，結(jié)果不穩(wěn)定現(xiàn)已被新檢測方法所代替?！ ∷?、用標記抗體或抗原進行的抗原、抗體反應 用熒光素、同位素或酶標記抗體或抗原，用于抗原或抗體檢測是廣泛應用的敏感、可靠的方法。上述三種常用的標記物與抗原或抗體化學連接之后不改變后者的免疫特性。本方法可用于定性、定量或定位檢測?！ ?．免疫熒光技術(shù) 免疫熒光技術(shù)（immunofluorescence techni）是用化學方法使熒光素標記的抗體（或抗原）與組織或細胞中的相應抗原（或抗體）結(jié)合，進行定性定位檢查抗原或抗體的方法。 ?。?）直接熒光法：把熒光抗體加到待檢的細胞懸液，細胞涂片或組織切片上進行染色，經(jīng)抗原抗體反應后，洗去未結(jié)合的熒光抗體，將待檢標本在熒光顯微鏡下觀察，有熒光的部位即有相應抗原存在，此法可用于病毒感染細胞、帶某種特異抗原的細胞（如T細胞和B細胞）或病原菌的檢查，也可用于組織中沉著的免疫復合物的檢查。本法的缺點是檢查多種抗原，就需分別制備相應的多種標記抗體。 ?。?）間接熒光法：可克服直接法需制備多種熒光抗體的復雜操作。將組織或細胞上的抗原直接與相應抗體（不標記熒光）結(jié)合，此為第一抗體，再把能與第一抗體特異結(jié)合的熒光標記的抗免疫球蛋白抗體加入，此為熒光標記的第二抗體，觀察結(jié)果與直接法相同。間接法比直接法敏感性高，如果用于檢查抗原的第一抗體是人或動物的只需制備一種抗人或動物的免疫球蛋白熒光抗體（圖205）。圖205 免疫熒光直接法及間接法原理示意圖 免疫熒光技術(shù)在傳染病診斷上有廣泛的用途，如在細菌、病毒、螺旋體感染的疾病，檢查抗原或抗體，如查出IgM抗體，可做為近期接觸抗原的標志，所以使用熒光標記抗IgM可診斷近期感染。除微生物學方面的應用外，還可利用單克隆抗體鑒定淋巴細胞的亞類。使用流式細胞儀(fluoresceneactivated cell sorting,FACS)，能自動檢測細胞的大小、熒光強度。針對細胞表面不同抗原，可以使用兩種不同的熒光染料，如用異硫氰熒光素（FITC）發(fā)黃綠熒光，用羅丹明（TMRITC）發(fā)紅色熒光。由于熒光顏色不同標記兩種不同的抗體，對同一細胞進行雙標記染色。對淋巴細胞亞類鑒定起著巨大推動作用。應用間接熒光法也用于自身免疫病的抗核抗體檢查?！ ?．放射免疫分析法 放射免疫分析法（radioimmunoassay RIA）應用競爭性結(jié)合的原理，應作放射性同素標記抗原（或抗體）與相應抗體（或抗原）結(jié)合，通過測定抗原抗體結(jié)合物的放射活性判斷結(jié)果，本方法可進行超微量分析，敏感性高，可用于測定抗原、抗體、抗原抗體復合物。本法常用的同位素有125Ⅰ和131Ⅰ?！ 》派涿庖叻治龀Ｓ玫挠幸合喾ê凸滔喾▋煞N： ?。?）液相法：將待檢標本（例如含胰島素抗原）與定時的同位素標記的胰島素（抗原）和定時的抗胰島素抗體混合，經(jīng)一定作用時間
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