【正文】 可用來檢測(cè)多種抗原抗體系統(tǒng)如細(xì)菌、病毒、腫瘤細(xì)胞表面抗原等。圖207 固相放射免疫分析法原理　　放射免疫分析法應(yīng)用范圍廣泛，包括多種激素（胰島素、生長(zhǎng)激素、甲狀腺素等）維生素、藥物、IgE等。圖205 免疫熒光直接法及間接法原理示意圖　　免疫熒光技術(shù)在傳染病診斷上有廣泛的用途，如在細(xì)菌、病毒、螺旋體感染的疾病，檢查抗原或抗體，如查出IgM抗體，可做為近期接觸抗原的標(biāo)志，所以使用熒光標(biāo)記抗IgM可診斷近期感染?！　?．補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)當(dāng)抗原（可溶性或顆粒性）與相應(yīng)抗體結(jié)合，由于濃度低不出現(xiàn)可見反應(yīng)時(shí)，應(yīng)用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)可檢出此抗原抗體反應(yīng)，它比凝集反應(yīng)或沉淀反應(yīng)靈敏度高?；蚶醚?xì)胞凝集現(xiàn)象檢查血型。圖202 雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)示意圖　　5．對(duì)流免疫電泳　對(duì)流電泳（counterimmunoelectrophoresis）是一敏感快速的檢測(cè)方法，即在電場(chǎng)作用下的雙向免疫擴(kuò)散?！　。?）各種半抗原物質(zhì)：某些藥物、激素和炎癥介質(zhì)等屬于小分子的半抗原，可以分別將它們偶聯(lián)到大分子的載體上，組成人工結(jié)合的完全抗原。也就是抗體濃度一定時(shí)，免疫復(fù)合物越多則樣品中的抗原量也越多。如對(duì)傳染病、免疫增殖性疾病、免疫缺損病、超敏反應(yīng)、自身免疫病、移植排斥反應(yīng)腫瘤的免疫學(xué)檢測(cè)，對(duì)診斷、治療均有很大幫助。同理也可用已知的抗原檢測(cè)樣品中是否有相應(yīng)抗體。在對(duì)這些成分的生物學(xué)作用的研究以及各種疾病的診斷有重要意義。本法敏感、快速簡(jiǎn)便，可取代單向擴(kuò)散法定量測(cè)定免疫球蛋白的濃度?！　D204 用免疫印跡法檢查血清中的HIV病毒抗體第一步：經(jīng)電泳將HIV混合抗合抗原按分子量大小分離；第二步：將已分離的抗原經(jīng)電印跡轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上；第三步：將待檢病人血清加入覆蓋于硝酸纖維膜上；第四步：加入標(biāo)記的第二抗體使之覆蓋膜上；第五步：加入顯色底物（或放射自顯影）顯現(xiàn)第二抗體　　（二）凝集反應(yīng)　　細(xì)菌、紅細(xì)胞或表面帶有抗原的乳膠顆粒等都是不溶性的顆?？乖?dāng)與相應(yīng)抗體結(jié)合，抗原與抗體結(jié)合形成凝集團(tuán)塊，即稱為凝集反應(yīng)（agglutination）。　　2．補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)各種有核細(xì)胞與針對(duì)其表面抗原的抗體相遇，所形成的免疫復(fù)合物能活化反應(yīng)中的補(bǔ)體，引起細(xì)胞膜穿孔，在一定時(shí)間內(nèi)，細(xì)胞仍能維持一定的形態(tài)不破碎，加入水溶性染如伊紅Y（eosin Y）或臺(tái)盼藍(lán)（trypan blue）后，染料即可進(jìn)入被活化補(bǔ)體穿孔的細(xì)胞，不帶相應(yīng)抗原細(xì)胞膜保持完整的活細(xì)胞不著色?！　。?）間接熒光法：可克服直接法需制備多種熒光抗體的復(fù)雜操作。預(yù)先用標(biāo)準(zhǔn)的非標(biāo)記抗原作成標(biāo)準(zhǔn)曲線后，即可查出待檢標(biāo)本中胰島素的含量（圖206）?！　￠g接法（indirecr ELISA）常用于檢查特異抗體。親合素和生物素都可與抗全、酶、熒光素等分子結(jié)合，而不影響后者的生物活性。常用于標(biāo)記的酶有辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase)、堿性磷酶（alkaline phosphatase）等。針對(duì)細(xì)胞表面不同抗原，可以使用兩種不同的熒光染料，如用異硫氰熒光素（FITC）發(fā)黃綠熒光，用羅丹明（TMRITC）發(fā)紅色熒光。另加入作為補(bǔ)體的新鮮豚鼠血清。也可以將抗體吸附到乳膠顆粒上檢查臨床標(biāo)本中的抗原，如細(xì)菌或真菌性腦膜炎抗體包被的乳顆粒，一旦與含有相應(yīng)抗原的腦脊液混合，便可發(fā)生凝集，可進(jìn)行快速診斷?！　?．免疫電泳　 免疫電泳(immunoelectrophoresis)的方法分成兩個(gè)步驟，即先進(jìn)行電泳，再進(jìn)行瓊脂擴(kuò)散?！　∪?、抗原或抗體檢測(cè)的方法　　由于各種檢測(cè)方法中所用的抗原性狀不同，出現(xiàn)結(jié)果的現(xiàn)象也不同?！　。?）抗原或抗體效價(jià)滴定的原理：當(dāng)抗原抗體復(fù)合物形成多少不能反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)強(qiáng)弱時(shí)，就不能以檢測(cè)反應(yīng)強(qiáng)度來對(duì)抗原或抗體進(jìn)行定量。第一節(jié)　抗原或抗體的檢測(cè)　　一、檢測(cè)的原理　　借助