免疫學(xué)檢測法匯總-在線瀏覽
2024-08-04 16:56本頁面
【正文】 驗、免疫比濁試驗和酶聯(lián)免疫檢測等都屬于類方法。在實際工作中，把濃度低的反應(yīng)成分（抗原或抗體）的濃度固定，把濃度高的另反應(yīng)成分作一系列稀釋。也就是表示效價的稀釋度越高，樣品中所含待檢成分越多?！ 《?、抗原或抗體檢測的實用意義 1．抗體檢測的意義檢測抗體可用于評價人和動物免疫功能的指標(biāo)。臨床上檢測病人的抗病原生物的抗體、抗過敏原的抗體、抗HLA抗原的抗體、血型抗體及各種自身抗體，對有關(guān)疾病的診斷有重要意義。 ?。?）生物體內(nèi)各種大分子物質(zhì)：包括各種血清蛋白（如各類免疫球蛋白、補體的各種成分）、可溶性血型物質(zhì)、多肽類激素、細(xì)胞因子及癌胚抗原等均可做為抗原進行檢測?！ 。?）人和動物細(xì)胞的表面分子：包括細(xì)胞表面各種分化抗原（如CD抗原）、同種異型抗原（血型抗原或MHC抗原）、病毒相關(guān)抗原和腫瘤相關(guān)性情抗原等?！ 。?）各種半抗原物質(zhì)：某些藥物、激素和炎癥介質(zhì)等屬于小分子的半抗原，可以分別將它們偶聯(lián)到大分子的載體上，組成人工結(jié)合的完全抗原。對運動員進行服用違禁藥品的檢測，都是應(yīng)用半抗原檢測的方法。最廣泛應(yīng)用方法有下述幾種： （一）沉淀反應(yīng) 可溶性抗原與抗體結(jié)合，在兩者比例合適時，可形成較大的不溶性免疫復(fù)合物?！ ?．環(huán)狀沉淀試驗 ?！ ?．單向免疫擴散試驗 單向免疫擴散試驗（single immunodiffusion）是在凝膠中進行的沉淀反應(yīng)。當(dāng)復(fù)合物體積增加到一定程度時停止擴散，出現(xiàn)以小孔為中心的圓形沉淀圈，沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度成正相關(guān)。免疫比濁法（immunonephelomytry）就是在一定的抗體濃度下，加入一定體積的樣品，經(jīng)過一段時間，用光散射濁度計（nephelometry）測量反應(yīng)液體的濁度，來推算樣品中的抗原含量?！ ?，雙向免疫擴散試驗 雙免疫擴散試驗（double immunodiffusion）是在瓊脂板上按一定距離打數(shù)小孔，在相鄰的兩孔內(nèi)分別放入抗原和抗體材料。圖202 雙向免疫擴散試驗示意圖 5．對流免疫電泳 對流電泳（counterimmunoelectrophoresis）是一敏感快速的檢測方法，即在電場作用下的雙向免疫擴散。只需1小時左右即可觀察結(jié)果。先將樣品加入瓊脂中電泳，將抗原各成分依電泳速度不同而分散開。常用此法進行血清的蛋白種類分析。圖203 免疫電泳法基本步示決圖 7．免疫印跡法免疫印跡法（immunoblotting）又稱為Western印跡法，用于AIDS的血清抗體檢測。第二步，將電泳分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上（電印跡），然后將印跡有病毒抗原的硝酸纖維膜浸濕于病人血清中。在洗去未沉淀的抗原和抗體后，在膜上加標(biāo)記的抗人免疫球蛋白的抗體，此抗體可以和病毒抗原與人抗體形成的免疫復(fù)合物發(fā)生反應(yīng)，最后加入顯色底物（如果抗人Ig是用酶標(biāo)記的）或做放射自顯影（抗人Ig用125Ⅰ標(biāo)記）以顯示結(jié)果（圖204）。 1．直接凝集 直接凝集（direct agglutination）是將細(xì)菌或紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體結(jié)合產(chǎn)生的細(xì)菌凝集或紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象?；蚶醚?xì)胞凝集現(xiàn)象檢查血型。如用γ球蛋白包乳膠顆粒檢測類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病人血清中的類風(fēng)濕因子，用甲狀腺球蛋白包被乳膠顆粒用于檢測甲狀腺球蛋的抗體。故凝集反應(yīng)即可測定抗原，也可測抗體，方法簡便、敏感。例如應(yīng)用于診斷自身免疫溶血性貧血癥時，Rh+紅細(xì)胞與抗Rh血清間的反應(yīng)。如果加入抗IgG的抗體，就可幫助抗Rh的IgG的抗體凝集紅細(xì)胞?！ 。ㄈ┭a體參與抗原抗體反應(yīng) 這一類反應(yīng)主要包括溶血反應(yīng)（hemolytic assay）、補體介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗（plement mediated cytotoxicuty test）及補體結(jié)合試驗（plement fixation test）。溶血反應(yīng)也是用于抗體分泌細(xì)胞即空斑形成細(xì)胞（PFC）檢測的原理。此方法可用于帶各種抗原的細(xì)
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