免疫學(xué)檢測法匯總-wenkub
2023-07-09 16:56:14 本頁面
【正文】 測時(shí)，以反應(yīng)中加入抗原和抗體的濃度與形成免疫復(fù)物的濃度呈函數(shù)關(guān)系?！ ?．抗原或抗體外檢測原理根據(jù)抗原抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物的性狀與活性特點(diǎn)，對(duì)標(biāo)本中的抗原或抗體進(jìn)行定性、定位或定量的檢測?？臻g構(gòu)型互補(bǔ)程度不同，抗原和抗體分子之間結(jié)合力強(qiáng)弱也不同。本章僅介紹常用免疫學(xué)檢測方法的原理，簡要過程和實(shí)用意義?！∶庖邔W(xué)檢測法 免疫學(xué)檢測技術(shù)的用途非常廣泛，它們可用于有關(guān)免疫疾病的診斷、療效評(píng)價(jià)及發(fā)病機(jī)制的研究。第一節(jié) 抗原或抗體的檢測 一、檢測的原理 借助抗原和抗體在體外特異結(jié)合后出現(xiàn)的各種現(xiàn)象，對(duì)樣品中的抗原或抗體進(jìn)行定性、定量、定位的檢測。互補(bǔ)程度高，則親和力強(qiáng)。定性和定位檢測比較簡單，即用已知的抗體和待檢樣品混合，經(jīng)過一段時(shí)間，若有免疫復(fù)合物形成的現(xiàn)象發(fā)生，就說明待檢樣品中有相應(yīng)的抗原存在?！ 。?）根據(jù)免疫復(fù)合物產(chǎn)生的多少來推算樣品中抗原（或抗體）的含量：在一定的反應(yīng)條件下，加入的已知抗體（或抗原）的濃度一定，反應(yīng)產(chǎn)生的免疫復(fù)合物多少與待檢樣品中含有相應(yīng)抗原（或抗體）量成正比?！ 。?）抗原或抗體效價(jià)滴定的原理：當(dāng)抗原抗體復(fù)合物形成多少不能反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)強(qiáng)弱時(shí)，就不能以檢測反應(yīng)強(qiáng)度來對(duì)抗原或抗體進(jìn)行定量。因人血清（抗原）和抗體（免疫兔血清）相比，濃度高，故應(yīng)稀釋抗原?！ ?．抗原檢測的意義可做為抗原進(jìn)行檢測的物質(zhì)可以下四類： （1）各種微生物及其大分子產(chǎn)物：用于傳染病診斷、微生物的分類及鑒定以及對(duì)菌苗、疫苗的研究。檢測這些抗原對(duì)各種細(xì)胞的分類、分化過程及功能研究、對(duì)各種與免疫有關(guān)的疾病的診斷及發(fā)病機(jī)制的研究，均有重要意義?！ ∪?、抗原或抗體檢測的方法 由于各種檢測方法中所用的抗原性狀不同，出現(xiàn)結(jié)果的現(xiàn)象也不同。將稀釋的含有可溶性抗原的材料重疊于上，讓抗原與抗體在兩液體的界面相遇，形成白色免疫復(fù)合物沉淀環(huán)，故名為環(huán)狀沉淀試驗(yàn)（ring precipitationtest）,此法簡便易行，需用材料較多是其缺點(diǎn)。本方法簡便，易于觀察結(jié)果，可測定抗原的靈敏度（最低濃度）約為10～20μg/ml，常用于定量測定人或動(dòng)物血清IgG、IgM、IgA和C3等，其缺點(diǎn)是需1～2天才能看結(jié)果（圖201）圖201 單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)示意圖 3．免疫比濁法 當(dāng)抗體濃度高，加入少量可溶性抗原，即可形成一些肉眼看不見的小免疫復(fù)合物，它可使通過液體的光束發(fā)生散射，隨著加入抗原增多，形成的免疫復(fù)合物也增多，光散射現(xiàn)象也相應(yīng)加強(qiáng)。當(dāng)抗原和抗體向四周凝膠中擴(kuò)散，在兩孔間可出現(xiàn)2～3條沉淀線，本法常用于抗原或抗體的定性或定量檢測，或用于兩種抗原材料的抗原相關(guān)性分析（圖202）?！ ?．免疫電泳 免疫電泳(immunoelectrophoresis)的方法分成兩個(gè)步驟，即先進(jìn)行電泳，再進(jìn)行瓊脂擴(kuò)散。對(duì)于免疫球蛋白缺損或增多的疾病的診斷或鑒別診斷有重要意義（圖203）。如果病人血清中含有與一種或幾種抗原相對(duì)應(yīng)的抗體的話，則在該抗原印跡部位形成免疫復(fù)合物沉淀?？捎糜趥魅静≡\斷如肥達(dá)氏反應(yīng)（Widal reaction）診斷傷寒病。也可以將抗體吸附到乳膠顆粒上檢查臨床標(biāo)本中的抗原，如細(xì)菌或真菌性腦膜炎抗體包被的乳顆粒，一旦與含有相應(yīng)抗原的腦脊液混合，便可發(fā)生凝集，可進(jìn)行快速診斷。因抗Rh抗體是IgG只有兩個(gè)結(jié)合價(jià)，分子較?。ú蝗鏘gM結(jié)合價(jià)多，分子大）很難直接引起Rh+紅細(xì)胞凝集?！ ?．溶血反應(yīng) 抗體與紅細(xì)胞表面抗原相遇，形成紅細(xì)胞抗體復(fù)合物即可使加入反應(yīng)中的補(bǔ)體活化，導(dǎo)致紅細(xì)胞溶解，此方法可用于紅細(xì)胞的各種抗原或相應(yīng)抗體的檢測，此法比凝集反應(yīng)敏感。在一些免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中也可用這種方法，根據(jù)需要特異地消除帶某種抗原的細(xì)胞。另加入作為補(bǔ)體的新鮮豚鼠血清?！ ∷?、用標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行的抗原、抗體反應(yīng) 用熒光素、同位素或酶標(biāo)記抗體或抗原，用于抗原或抗體檢測是廣泛應(yīng)用的敏感、可靠的方法?！ 。?
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